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[成果] 1700520396 浙江
R51 应用技术 医院 公布年份:2018
成果简介:新发突发传染病始终是全球安全的重大威胁和人类面临的严峻挑战。2003年中国SARS的惨痛教训记忆犹新。为了有效应对新发传染病,项目组承担国家任务,创建国家平台,汇聚国家力量,发挥举国体制优势,协同攻关。2013年春,长三角地区突发人感染H7N9禽流感病毒疫情,中国政府和国际社会高度关注。项目组快速行动,在发现新病原、确认感染源、明确发病机制、开展临床救治、研发新型疫苗和诊断技术等方面取得了六项重大创新和技术突破,创建了新发突发传染病防治“中国模式”和“中国技术”,成功防控了人感染H7N9禽流感病毒疫情。1.创立了以深度测序和高通量数据分析技术为核心的中国新发突发传染病病原早期快速识别技术体系。应用该体系5天内迅速发现并确认了此次突发疫情病原是一种全新的三源重配H7N9禽流感病毒,第一时间向全世界公布了该病毒全基因组序列,阐明其分子特征、起源和进化机制,发现该病毒具有多个导致病毒突破种属屏障感染人的基因特征,使中国新发突发病原发现能力达到世界领先水平。2.创立了分子分型和溯源为特色的新发突发传染病预测预警技术体系和防控模式。发现从人感染H7N9禽流感病毒患者体内分离的病毒和从活禽市场环境分离的病毒基因序列同源性高达99.4%,从分子水平获得了人感染禽流感H7N9病毒从禽向人传播的科学依据。通过迅速关闭活禽市场,实现了精准防控,防止了疫情迅速蔓延,大幅度减少了经济损失。3.创立了从蛋白结构到哺乳动物模型精确解析新发突发传染病感染和发病机制研究新体系。发现了人感染H7N9禽流感病毒禽传人的关键突变位点,揭示了“细胞因子风暴”等免疫病理反应是导致重症和死亡的关键因素,为临床救治提供了科学依据,创新了新发突发传染病发病机制理论。4.创建了引领世界的新发突发传染病危重症患者救治的“中国技术”。首次系统揭示人感染H7N9禽流感病毒患者临床特征,创建了“四抗二平衡”治疗新策略,创造性运用“李氏人工肝”技术消除“细胞因子风暴”,显著降低病死率,为全球提供了重症传染病救治新技术,并使之成为国际指南。5.创建了中国流感疫苗快速研发新技术体系。成功研制中国首个人感染H7N9禽流感病毒疫苗种子株,打破了中国流感疫苗株必须依赖国际提供的历史,提升了中国流感疫苗研发能力和水平,为应对重大新发突发传染病提供了快速研发疫苗新技术平台。6.创建了中国新发突发传染病诊断试剂高效快速研发平台。病原发现后两天内成功研发人感染H7N9禽流感病毒快速检测试剂,被世界卫生组织推荐,向全球推广,标志着中国该领域技术已达国际水平。上述重大科研成果在《Science》、《Nature》、《NEJM》和《Lancet》等国际顶尖杂志发表SCI论文248篇,影响因子大于30的论文19篇,5篇入选中国百篇最具影响国际学术论文,授权专利17件,出版专著25部,发布指南38个。研究成果入选2013年中国科学十大进展。对保障人民健康、维护社会稳定和经济发展做出了重大贡献。成功控制MERS、寨卡等传染病的输入传播,成功援助非洲控制埃博拉疫情,为全球提供了“中国经验”,展现了“中国力量”,世界卫生组织(WHO)评价该成果具有里程碑意义,堪称“国际典范”。中国在国际新发传染病防治领域从“跟随者”成为“领跑者”。
[成果] 1700470312 北京
TP3 应用技术 公共软件服务 公布年份:2017
成果简介:该项目围绕中国重要传染病发热呼吸道、腹泻、发热伴出疹和脑炎脑膜炎症候群的主要病原体监测及病原谱构成分析和突发疫情病原快速应急筛查中所面临的技术问题,为满足我国省、市不同层次疾控机构对多病原快速检测和筛查技术的迫切需求,建立了具有中国自主知识产权的新型多重PCR技术平台。 1.该技术平台整合了温度转换扩增(temperature switch PCR, TSP)、全自动毛细管电泳仪检测和PathoMPSTM软件系统智能分析,达到PCR结果自动判断。 2.研制了11个针对不同病原的多重PCR检测试剂盒,检测病原覆盖发热呼吸道症候群16种病毒、腹泻症候群6种病毒和7种细菌、5种大肠埃希氏菌、14种食源性致病菌、23种肺炎链球菌血清分型、4种副溶血性弧菌毒力基因、6种大肠埃希氏菌O157:H7相关基因、4种志贺氏菌分型、5种小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力相关基因、5种致病弯曲菌分型和6种大肠埃希氏菌O104:H4相关基因等。 3.开发了9个针对不同靶标的多重PCR检测方法,内容包括15种肠道病毒、8种脑炎相关虫媒病毒、4个结核杆菌利福平耐药位点、7种氨基糖苷类抗生素耐药基因、6种转基因成分、6个女性乳腺癌和宫颈癌相关SNP、11种HPV分型、6种人冠状病毒分型和8种流感病毒分型等。 4.呼吸道和腹泻症候群检测试剂盒推广应用于15个省疾控中心,对阐明这些省份发热呼吸道或腹泻症候群病原构成本底及其动态变化提供了重要科学手段。腹泻症候群检测试剂盒应用到非洲苏丹,获得苏丹腹泻症候群病原谱构成的本底数据;16种呼吸道病毒多重检测试剂盒被国际知名的Qiagen公司收录为应用成果,并评价该方法是对常规病毒诊断的重大贡献。 5. 9个不同组合的细菌类多重PCR检测试剂盒广泛应用于全国疾控系统、食品安全和出入境检验检疫等领域,为致病菌准确分型和毒力基因分析提供了可靠的工具,为快速处置提供了有效的依据。 该技术平台是首次将温度转换扩增原理引入多重检测,进行整合性创新,其创新性在于国内外首次采用嵌合引物引导和通用引物主导的温度转换扩增的策略,采用全自动毛细管电泳仪作为终端检测设备提高检测通量;采用自主研发的软件系统智能自动分析结果,提高判读准确性;具高灵敏度、高特异性和高通量的特点。与国外同类技术相比,具有更快速和成本低的优势。2014至2016年项目执行期间,该技术平台产品在全国的总销售额约1085万元,取得了较好的社会效益和经济效益。发表相关文章33篇,其中SCI文章13篇,他引总次数197,获发明专利4项,获软件著作权1项。
[成果] 1700290241 湖南
R37 应用技术 医学研究与试验发展 公布年份:2016
成果简介:该研究采用真核细胞表达体系表达重组HBoV VP2 VLPs,经纯化后免疫小鼠,检测免疫后小鼠血清中的特异性IgG抗体效价、抗体活性、抗体亚型以及不同基因型之间交叉反应,同时建立ELISPOT检测方法,检测HBoV VLPs免疫小鼠后特异性细胞免疫反应。综合探讨重组HBoV VP2 VLPs的免疫原性。通过该研究课题组在国内外首次发现多肽GYIPIENEL和LYQMPFFLL为HBoV1小鼠特异性T细胞表位多肽,GYIPVIHEL为HBoV2小鼠特异性T细胞表位多肽;该研究首次证实HBoV VP2 VLPs能诱导机体产生强烈的体液免疫反应和细胞免疫反应,且免疫途径对其无影响,明矾佐剂增强体液免疫反应,减弱细胞免疫反应。由此得出结论HBoV VP2 VLPs可作为预防HBoV感染的候选疫苗,HBoV VP2 VLPs作为预防性疫苗使用时应添加明矾佐剂,作为治疗性疫苗使用时应不加明矾佐剂。该研究结果以学术论文形式发表与公开刊物,共发表学术论文4篇,其中SCI收录1篇(IF=3.795),核心期刊2篇,其它期刊1篇。人博卡病毒是2005年发现的新型感染人类的病毒,HBoV在全世界范围都有被检出的文献报道,HBoV1主要存在于呼吸道分泌物中,集中于6-24月龄的婴幼儿,血清学研究证实:HBoV1是引起人类呼吸道感染的主要病毒之一,与婴幼儿喘息密切相关。流行病学调查显示HBoV2与婴幼儿胃肠炎的发生密切相关。HBoV感染已经危害到人类尤其是婴幼儿生命健康,尚没有关于针对HBoV感染的特异性抗病毒药物治疗的文献报道,因此,预防是降低HBoV对人类健康危害最有效的方法。疫苗接种是感染性疾病预防的主要手段。关于博卡病毒还有诸多未知的领域,该研究首次探讨了重组HBoV VP2 VLPs的免疫原性,证实了重组HBoV VP2 VLPs具有良好的细胞核体液免疫原性,同时该研究还探讨了免疫途径和免疫佐剂应用等相关问题,首次获得了重组HBoV VP2 VLPs免疫原性的详细数据资料,为进一步深入研究重组HBoV VP2 VLPs提供了充足的理论和实践资料,具有很好的应用前景。该研究产生的经济效益主要为间接经济效益,该研究所建立的实验条件方法给研究人博卡病毒相关单位提供了实验数据,节省探索实验条件和方法的经济投入约18万元。该研究结果证实了HBoV VP2 VLPs能在小鼠体内诱导强烈的特异性细胞免疫反应和体液免疫反应,具有很好的免疫原性,是一种良好的候选疫苗。该研究的试验数据资料为进一步研究人博卡病毒疫苗提供了充足的理论基础和实践指导,对人类博卡病毒感染的预防和人类健康的保护具有重要的价值。该研究发表的论文Immunogenicity of recombinant human bocavirus-1,2 VP2 gene virus-like particles in mice被以下论文引用[Fuxiao Liu;Xiaodong Wu;Yanli Zou,et al. Peste des petits ruminants virus-like particles induce both complete virus-specific antibodies and virus neutralizing antibodies in mice[J]. Journal of Virological Methods, 2015, 213:45-49.]。
[成果] 1700260309 安徽
R51 应用技术 医学研究与试验发展 公布年份:2016
成果简介:2009年以来,中国安徽、湖北、河南等6省市相继报告一组表现为发热,血小板减少、白细胞减少及多脏器衰竭等不明原因的新发传染病病例,重者可引发全身弥漫性血管出血及死亡,病死率起初高达30%,一度引起社会恐慌和关注。被新闻媒体称为“蜱虫病”。该项目团队在“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项及其它经费支持下,迅速对未知病原体分离培养,基因组解析、病毒分类、病因确定,实验室检测和诊断方法建立,流行病学分布特征,病毒宿主、传播媒介及传播方式,疾病临床特征、进程及转归、动物模型和发病机制等多个方面取得重大突破,在全球首次发现和确定一种新发传染病的病原,命名该病原为“发热伴血小板减少综合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)”,该病为“发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)”,及时为国家制定防治策略提供了理论依据和技术支撑。主要技术内容:首次培养出该病的病原体,首次解析该病原体全基因组序列,分类为布尼亚病毒科白岭病毒属的新病毒,命名为SFTSV,首次获得病毒纯化颗粒、电镜形态特点及病毒与SFTS病人血清反应的特异性免疫荧光等。首次证实SFTSV为发热伴血小板减少综合征病原和病因,实现了郭霍假说中关于病因确定的基本要素,建立了疾病与病原之间因果关系。首次建立SFTSV感染实验室病毒核酸和蛋白检测和诊断方法。首次阐述SFTS的流行病学特征,发现蜱虫为SFTS主要传播媒介,发现SFTSV具有广泛宿主范围,羊、牛、狗、鸡等为病毒的中间扩增宿主,发现人、动物和蜱中分离的病毒基因序列具有高度同源性。首次提出SFTS的临床特征和对临床进程进行分类,将SFTS病程发展分为三期:发热期、多器官障碍期、和恢复期,指出多器官障碍期为治疗和护理的关键期。上述成果首次发表在国际顶级医学杂志《新英格兰医学杂志》(N Engl J Med. 2011 Apr 21;364(16):1523-32.),杂志于同期配发了关于该病毒发现的编者按,在国内外产生巨大影响;同时为卫生部于2010年10月印发的《发热伴血小板减少综合征防治指南(2010版)》提供了理论依据和技术支撑,指导临床医生和疾病预防控制专业人员做好该病的预防和治疗,并对全国疾控系统提供了SFTS预防控制技术支持。对美国、韩国、日本自2012年以来发现类似SFTSV,提供了思路和技术支持。首次发现SFTSV感染可发生人传人传播,证实SFTSV人-人传播由直接接触SFTS病人血液或分泌液引起。首次建立SFTSV感染和致死性感染动物模型及致病机理研究。发现病毒攻击的靶细胞主要为脾脏的网状纤维细胞,且病毒和血小板共定位于巨噬细胞的胞浆中。发现血小板减少这一SFTS重要的临床症状可能由于脾巨噬细胞对病毒黏附的血小板大量清除所致,初步了解了病毒感染引发血小板减少的可能机制。SFTSV人传人的研究发现以及合适动物模型的建立和致病机理研究进一步加强和完善了课题组对SFTSV致病的了解。通过该项目的实施,提高了新发传染病应答能力以及临床医务人员救治能力,是一个新发传染病未知病原筛查和病因确定的典型范例,对于提高中国新发、突发公共卫生问题应急处置能力具有重要意义。
[成果] 1400220120 北京
R18 应用技术 医学研究与试验发展 公布年份:2014
成果简介:该成果属于预防医学领域。主要发现点有:1.首次阐明中国虫媒病毒种类、地域分布及传播媒介关系。绘制了中国虫媒病毒分布图、虫媒病毒与传播媒介种类及地区分布图。2.首次从病毒基因组阐明乙脑病毒分子进化及其与疾病流行规律。发现乙脑病毒的起源时间为距今1695年以前;发现蝙蝠作为乙脑病毒长期储存宿主并在乙脑流行中的起重要作用;证明了基因1型乙脑病毒可以引起病毒性脑炎。3.首次分离到Tahyna病毒并证明其人畜动物感染。4.发现了中国蜱传脑炎病毒分离及与疾病的关系。该成果发表论文211篇,主编专著4部,申报专利5项,有415项病毒基因序列登陆国际基因库。成果填补了中国虫媒病毒研究领域空白,对中国相关疾病预防控制、疫情处理、疾病预警预测等提供了技术支撑,对该类疾病的国际联防联控具有重要意义。
[成果] 1500210206 北京
R51 应用技术 医学研究与试验发展 公布年份:2015
成果简介:该成果属于传染病流行病学领域。成果针对H5N1的人际传播能力、感染发病的危险因素、潜伏期和临床特征等国际科学界急需攻克的难题,开展了多学科协作攻关研究,取得了重大科技创新和突破,包括:通过不明原因肺炎监测系统,成功发现并确认中国首例和后续H5N1人间病例;在全球首次开展流行病学、病毒学、血清学和遗传学集成创新性研究,全面评估了H5N1病毒在人际间的传播能力和引起大流行的风险:通过描述流行病学,发现暴露于城市活禽市场存在H5N1感染发病的风险;应用分析流行病学,定量征明了农村和城市人感染H5N1发病的危险因素;全面阐述了人感染H5N1的潜伏期和基本临床特征,报道了抗流感病毒药物对H5N1的临床疗效,为制定中国及WHO防控策略和技术指南提供了重要依据;研究结果直接转化为防控策略和技术方案,应用于指导H5N1疫情的科学防控。成果共发表论文30篇,其中SCI收录10篇,累计IF161分,SCI他引675次。2009年以来,中国H5N1疫情得到有效控制,降低了病毒发生重配或适应性突变的风险。具有重要的社会效益。
[成果] 1600060127 北京
R51 应用技术 医院 公布年份:2015
成果简介:该研究围绕安徽阜阳2008年“幼儿不明原因重症肺炎”重大突发疫情和随后中国大陆手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)大规模暴发流行所面临的重大科学问题,率先开展了HFMD病原学系统研究,建立了中国HFMD系列组合检测和监测技术,满足了中国省、市、县不同层次网络实验室和临床医疗机构对HFMD防控的迫切需求。24小时内迅速鉴定出EV-A71是引起安徽阜阳“幼儿不明原因重症肺炎”疫情的病原,该病毒也是随后引起全国HFMD重症和死亡病例的绝对优势病原体,为本土流行株,属于EV-A71 C4基因亚型;通过病原学回顾性研究,证实其由1998年深圳株C4基因亚型衍生而来;全基因组序列证实该病毒与柯萨奇A16(CVA16)病毒发生了重组,重组现象最早可溯源至1998年。通过连续多年、系统的HFMD病原学研究,阐明了中国HFMD肠道病毒病原学构成随年代和地域存在着动态变化;EV-A71在HFMD病原的构成比例与当地出现重症和死亡病例的多少呈高度正相关。该研究为卫生行政机构集中优势医疗资源,开展重症早期救治,降低病死率提供了关键的病原学依据。首次在国际上依据C4基因亚型在人群流行传播10年间的基因组变异变迁,将C4基因亚型划分为C4a和C4b,2007年之后C4a完全替代C4b成为中国EV-A71绝对优势流行株,EV-A71 C4a的流行与中国HFMD重症和死亡病例增多密切相关。建立了中国HFMD病原学三级监测网络体系,实现了对中国HFMD疫情的实时动态监控;率先研制了针对中国HFMD防控所急需的检测和监测系列关键技术。通过培训,使全国省、市、县级实验室和老挝、越南等东南亚国家具备了HFMD病原的检测和监测能力。上述关键技术已被国家卫计委制订的《HFMD预防控制指南》所采纳并在网站上公布,用于指导全国HFMD病原学监测,为各个省市HFMD防控提供了关键技术体系。获得了近5000株毒株和2000多条基因序列,建立了中国本土特色的HFMD相关病毒毒株资源库和基因数据库,积累了大量HFMD相关肠道病毒的分子流行病学研究数据,为HFMD早期诊断方法的建立、疫苗研制、临床救治和重症预警提供了重要的资源保障。该研究是国内外唯一连续多年针对HFMD开展系统病原学监测和研究的项目。对中国HFMD防控,保护中国儿童生命健康有非常重要的科学意义和重大的社会效益,并取得了较好的经济效益。发表文章61篇,SCI文章22篇,影响因子73.185;获得国家药监局颁发的HFMD诊断试剂批准文号10个,发明专利1项。
[成果] gkls122374
R725 应用技术 公布年份:2009
成果简介:人类博卡病毒(HBoV)是2005年8月瑞典学者从急性呼吸道感染儿童的呼吸道分泌物中鉴定出来的一种新型的人类细小病毒,暂时被命名为人类博卡病毒,我们在国内也首次检出此病毒在儿童急性呼吸道感染中的存在。本项目拟在现有工作基础上,建立HBoV的血清ELISA检测方法和病毒核酸荧光实时定量PCR检测方法,对阳性样本进行病毒分离并构建感染性克隆,建立HBoV感染的动物实验模型,用于病原学研究。结合流行病学资料和HBoV感染动物实验的研究结果,综合评价HBoV与儿童呼吸道感染的相关性,为HBoV的预防与控制提供科学依据。
[成果] 0900930017 北京
R730 应用技术 医学研究与试验发展 公布年份:2009
成果简介:食管癌是中国的一种常见的恶性肿瘤,因此,研究食管癌的病因对癌症的控制有十分重大的意义。课题组应用分子生物学、生物学、病毒学和肿瘤学等技术开展了HPV与食管癌病因关系的研究,取得了如下成果:HPV与食管癌病因有关:1.课题组1995年发表汕头地区食管癌组织与HPV有关,随后又对潮汕高发区(汕头市和揭阳市)的食管癌进一步进行研究,发现癌组织中,约54.2%有HPV16型DNA,约20.0%有HPV18型DNA存在。其中86.9%HPV16阳性癌组织中有HPV DNA整合到人细胞DNA中。证明林县(州)食管癌HPV DNA的检出率为90%。2.证实30多年前在林县现场实验室建立的食管癌细胞株(EC109)有HPV18型DNA存在。首次证实HPV E6E7能诱发人胚食管上皮细胞永生化和癌变。1.成功构建HPV18 E6E7 AAV病毒和HPV16型 E6E7 AAV病毒。2.HPV18 E6E7 AAV感染人胚食管上皮细胞能诱发食管上皮细胞永生化,建立了永生化食管上皮细胞株SHEE。SHEE在体外连续传代至80代,接种细胞于Scid小鼠,能形成肿瘤,表示细胞已经癌变,建立了癌细胞株SHEEC,证明HPV E6E7基因能够单独诱发正常食管上皮细胞癌变。3.HPV18 E6E7诱发食管上皮细胞癌变,大体上可分为永生前期、永生期、癌变前期和癌变期。但永生期60代细胞移植至裸鼠或Scid小鼠虽不能形成肿瘤,但从中可克隆出致癌性很强的癌细胞,表示永生细胞中已有少数癌细胞存在。4.促癌物(TPA和丁酸)、化学致癌物(亚硝基吡啶)、三氧化二砷及放射线等可起协同作用,加速HPV E6E7诱发的永生化细胞的癌变,提示食管癌的发生可以是多因素协同作用的结果。5.HPV16 E6E7 AAV感染人胚食管粘膜组织,移植至Scid小鼠,在TPA的协同作用下,可诱发细胞癌变。6.证明食管永生化和癌变细胞中有HPV E6E7基因存在。在细胞从永生化到癌变过程中,一些癌基因的表达不断加强,染色体增加和畸变,端粒酶活性不断增加。7.用基因芯片和蛋白质谱等技术比较永生化细胞SHEE和癌变细胞SHEEC的基因表达差异,发现25个有差异的基因,其中3个为已知,22个为未知,7个已登录基因库,包括与转移有关癌基因NGAL等。另外发现,6个蛋白表达有显著差异,其中5个为已知,1个为未知。上述结果表明HPV与食管癌的发生有十分密切的关系,是食管癌病因之一,食管癌的发生可能是多因素中单独或起协同作用的结果。项目组的研究成果完整地阐明了HPV以及其他促/致癌物在食管癌发生中的意义,对于食管癌的防治、预后等具有深远的理论意义和应用前景。课题组的研究成果得到该领域国内外同行的公认,发表的论文被国内外大量引用。在上述国家自然科学基金重点项目架构下,课题组课题组已累计发表论文73篇,其中英文专著2篇,SCI收录论文25篇(SCI总点数为55.008),这些论文被其它SCI论文引用累计386次;此外,项目组发表的45篇论文被CMCI、CNKI以及CSCD等数据库收录,其中39篇论文被国内发表的论文所引用,共计285次,合计影响因子为76.270。而与此同时,美国著名学者Antonio邀请课题组写综述文章并在2007年编著的《New Research on Esophageal Cancer》一书中作为第二章内容予以发表。
[成果] 0900940021 北京
R725 应用技术 医学研究与试验发展 公布年份:2009
成果简介:急性呼吸道感染(acute respiratory tract infection,ARTI)是引起婴幼儿住院、发病和死亡的常见原因。报道在儿童ARTI疾病中,病毒感染主要包括呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒、副流感病毒、腺病毒、鼻病毒、人冠状病毒(HCoV)、人偏肺病毒(HMPV)。另外,还有约60%儿童的急性呼吸道感染,虽然被认为是由病毒感染引起,但是其确切病原并未阐明,2005年发现的细小病毒科的新成员-人博卡病毒(human bocavirus,HBoV)可以引起人类呼吸道感染,已受到广泛关注。课题组结合流行病学资料、样本检测结果来综合评价HBoV与儿童呼吸道感染的相关性。另外,对HBoV衣壳蛋白独特区的磷脂酶活性也进行了研究。对HBoV的研究已取得了一些重要的研究成果.1、建立了针对HBoV NS1基因的PCR检测方法,并用所建立的方法从252份鼻咽抽吸物标本中共检测到21份HBoV阳性扩增产物,阳性率为8.3%。这是中国首次检出HBoV的报道,是继瑞典、澳大利亚之后,世界上第3次证实该病毒的存在,相应的序列均已在Genebank注册。2、对HBoV阳性患者的临床感染特征进行了研究,基主要临床症状表现为咳嗽(86%),发热(33%),喘息(33%),腹泻(29%)等典型的感冒样临床症状,基本诊断主要为肺炎,支气管炎,支气管肺炎等下呼吸道感染。3、建立了HBoV核酸和他国报道的HBoV NS1、NP1、VP1基因全序列进行了分析,发现HBoV基因组核酸虽然具有相当高的保守性,但仍表现了一定的核酸差异。其中,各分离株NS1、NP1基因同源性分别为99.1%明HBoV衣壳蛋白独特区具有磷脂酶活性和钙离子依赖性;HBoV磷脂酶模体结构域关键氨基酸的置换显著降低磷脂酶活性;HBoV磷脂酶能被特异的分泌型磷脂酶抑制剂抑制,其抑制活性具有时间依赖性。该研究建立的快速、可靠的核酸鉴定方法已在哨点医院得到广泛应用,推动了中国新发呼吸道病毒,尤其是HBoV的防治工作;HBoV磷脂酶活性的阐明,为进一步研究HBoV宿主感染及抗病毒药物研究提供了初步的试验依据。该研究结论对指导中国新发呼吸道病毒防治工作,保障人民生命健康,完善中国公共卫生体系具有重要意义。
[成果] 1400500170 河北
R730 应用技术 [医学研究与试验发展, 医院] 公布年份:2013
成果简介:主要技术内容:中国是世界上食管癌发病率和死亡率最高的国家。高危型人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染是食管癌发生的重要因素。HPVE6E7基因与宿主细胞内重要蛋白相互作用发挥致癌功能,全面认识HPVE6E7基因在食管癌发生中的作用,阐明食管癌发生、发展及转移的可能机制,为研制以HPVE6E7基因为靶向的HPV相关肿瘤治疗型疫苗奠定基础。该项目利用携带高危型HPVE6E7基因的重组病毒,感染人食管上皮细胞,获得了稳定表达高危型HPVE6E7基因的细胞株;用该细胞株及其促癌物刺激组细胞分别接种至Scid鼠,观察肿瘤形成情况;利用实时荧光定量聚酶链反应(Polymerasechainreaction,PCR)、HPV癌基因转录扩增及基因比对,分析食管癌细胞株中高危型HPV整合状态及整合位点,探讨食管癌发生可能的机制。主要创新成果:1.建立了稳定表达高危型HPVE6E7基因的人食管上皮细胞株,为高危型HPV相关肿瘤的预防与治疗提供了体外模型。2.表达高危型HPVE6E7基因的细胞单独接种至Scid鼠不能形成肿瘤,但表达高危型HPVE6E7基因的细胞与促癌物协同作用,接种至Scid鼠能形成肿瘤;发现了肿瘤的形成不仅需要癌基因的作用,还需环境中促癌物较长时间的诱导;阐明了肿瘤的发生是多基因多步骤的复杂过程。3.食管癌EC109细胞株中HPV18整合于该患者的8号染色体;表明高危型HPVE6E7整合在宿主细胞染色体,是宿主细胞恶性转化和癌变的关键。推广应用及效益情况:该项研究成果已在河北联合大学及中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所应用,推广到唐山市人民医院,证实了研究成果的可靠性。利用荧光定量PCR技术,以高危型HPVE6E7基因做标记进行HPV相关肿瘤的诊断,检出HPV相关肿瘤早期患者881例;及早为HPV相关肿瘤患者明确了诊断,提高了诊断的准确率,及时为患者进行了治疗,使患者的生存期由原来的3年延长至5年。为临床HPV相关肿瘤的早期诊断、预防及治疗提供了科学依据。相关研究成果已经在国际和国内核心期刊杂志《OncolRep》(影响因子1.25)、《WorldJGastroenterol》(影响因子3.31)及《JMedVirol》(影响因子3.28)等上发表,共计50篇,其中SCI论文19篇,总影响因子38.46;被国内外学者SCI他引215次。项目研究期间培养青年教师4人,科研技术骨干12人,培养本科生66人,硕士生16人,博士生3人,对本科生、研究生教学及学科建设起到了重要的促进作用。推动科技进步作用:利用携带高危型HPVE6E7基因的重组病毒,感染人食管上皮细胞作为研究对象,在基因水平研究高危型HPVE6E7基因的致癌机制,发现了肿瘤的发生不但要有癌基因的存在,还需促癌物诱导,阐明了肿瘤的发生是多基因多步骤的复杂过程;完善了高危型HPV感染导致食管癌发生可能机制的理论。建立了以高危型HPV早期E6及E7基因为靶点的HPV相关肿瘤的早期筛查及研究平台,推动了HPV相关领域分子生物学,病毒学及肿瘤学的发展;为HPV相关肿瘤的预防和治疗提供了重要实验依据。
[成果] 1400210507 北京
R-33 应用技术 医学研究与试验发展 公布年份:2012
成果简介:该成果属于基础医学医学实验动物学领域,取得了如下技术创新该研究整合各种动物和毒株资源,通过病原学、免疫学、病理学、实验动物学、分子生物学、兽医学等核心技术和自主研发的H1N1和H5N1实时荧光定量PCR检测方法高度集成,在国内外首次建立了规模化、标准化、系统化的甲型流感动物模型;建立了科学的抗流感药物和疫苗评价技术体系;在国际上首次建立了预测流感病毒跨物种传播,监测病毒传播能力,可为新病毒暴发提供预警信息的动物预警模型系统。该成果发表论文7篇,已成功应用于国内20多家单位的评价。特别是北京市卫生局临床药学研究所应用该成果,对自主研发的抗“甲流”新药金花清感颗粒进行了药效评价,已获得SFDA临床批件,成果转让金总额达一亿元。
[成果] 1200370252 河北
R735 应用技术 [医学研究与试验发展, 疾病预防控制及防疫活动] 公布年份:2012
成果简介:主要技术内容及创新点:1.通过EBV感染及BARF1基因转染人胃上皮细胞,获得了携带EBV的人胃上皮细胞株GES-1/EBV及稳定表达BARF1基因的细胞株GES-1/BARF1,发现了EBV感染及BARF1基因转染均可使人胃上皮细胞形态与行为发生改变。2.将携带BARF1基因的细胞株及其TPA刺激组细胞分别接种至Scid小鼠,观察肿瘤形成情况。发现了表达BARF1基因的细胞单独接种至Scid小鼠不能形成肿瘤,但表达BARF1基因的细胞用TPA刺激后,接种至Scid鼠能形成肿瘤;阐明了肿瘤的形成不仅需要癌基因的作用,还需环境中促癌物较长时间的诱导;完善了EBV感染导致胃癌发生可能机制的理论。3.通过检测北京地区0-14岁儿童EBV感染血清学调查、EBV感染重症疾病患儿血浆中游离EBV病毒载量及抗体效价、胃癌患者中EBV感染状况分析,发现了EBV感染的病毒载量及其产生的抗体效价可作为EBV相关疾病早期诊断的参考依据。4.使用EBV潜伏膜蛋白(EBV-LMP)免疫树突状细胞、Balb/C小鼠及猴子,观察EBV-LMP蛋白产生的免疫应答水平,发现了EBV-LMP蛋白可产生EBV-LMP特异性细胞和体液免疫反应,证实了EBV-LMP蛋白具有抗肿瘤的作用。推广应用及效益情况:该项成果自2009年1月起在河北联合大学及附属医院,推广到中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所及唐山市人民医院。应用杂交技术、病毒感染技术及免疫学技术等,检出0-14岁儿童EBV感染阳性率城市为80.8%,农村为86.2%。检出73例EBV原发感染和18例EBV相关重症疾病患儿,检出EBV相关恶性肿瘤早期患者665例,及早为患者进行了治疗,使这些患者的生存期由原来的3年延长至5年。推动科技进步的作用:利用EBV感染及癌基因BARF1转染人胃上皮细胞GES-1作为研究对象,在基因水平研究EBV的致癌机制,发现了肿瘤的发生不但要有癌基因的存在,还需促癌物刺激,阐明了肿瘤的发生是多基因多步骤的复杂过程;完善了EBV感染导致胃癌发生可能机制的理论。建立了以EBV早期抗原的抗体,衣壳抗原的抗体为靶点的EBV相关疾病的早期筛查及研究平台,推动了EBV相关领域分子生物学,病毒学及肿瘤学的发展;发展了以EBV-LMP蛋白为靶向的实验治疗策略,为EBV相关肿瘤的预防和治疗提供了重要实验依据。成果应用期间培养青年教师5人,科研技术骨干11人,培养硕士研究生18人,本科生68人,对研究生、本科生教学及学科建设起到了重要的促进作用。
[成果] hg08015290 北京
R51 应用技术 医院 公布年份:2008
成果简介:本发明提供的来源于中国高致病性禽流感H5N1恢复期病人抗体基因文库的特异性结合禽流感病毒H5N1的人源基因工程抗体,其主要特征在于此重组抗体是由存在于抗体轻链和重链基因可变区中的高变区(CDRs)特异性基因序列决定的,并在原核和真核细胞中获得有效表达的特异性结合禽流感病毒血凝素蛋白HA的中和性功能抗体。   利用此抗体CDR区或部分或全基因,可在原核、酵母、昆虫和真核细胞及任何表达系统中改造和生产不同形式的基因工程抗体,可在临床上预防或治疗H5N1禽流感病毒相关疾病。200710111098.8
[成果] hg08015291 北京
TQ42 应用技术 专用化学产品制造 公布年份:2008
成果简介:本发明涉及一种病原微生物的DNA检测芯片,该芯片包括载体和位于载体上的核酸探针,该核酸探针具有用于检测病原微生物目标基因的目标检测探针。其中所述的病原微生物包括但不限于:霍乱弧菌、致病性大肠杆菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌、副溶血弧菌、沙门菌、志贺菌、李斯特菌。   本发明还涉及所述病原微生物DNA检测芯片的制备方法。本发明还提供病原微生物DNA检测芯片在检测病原微生物中的应用。本发明还提供一种病原微生物DNA检测芯片试剂盒。200710099758.5
[成果] 0800970011 北京
R44 应用技术 医学研究与试验发展 公布年份:2008
成果简介:长期以来,中国病毒性腹泻缺乏系统的监测,研究和预防控制工作基础薄弱。为掌握中国病毒性腹泻主要病原的流行特征和毒株变化趋势,评估疾病负担,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所等单位通过哨点医院监测、人群为基础的监测和实验室病原学监测相结合的方法,对中国病毒性腹泻进行了长达近20年的病原学和流行病学的系统研究,取得了重要的创新性研究结果:1、在国际上首次报道了中国病毒性腹泻的流行病学特征,婴幼儿轮状病毒腹泻的流行现状和疾病负担估计;阐明了中国近20年来A组轮状病毒流行株的基因型别和流行变化趋势,并发现了5个全新的轮状病毒毒株。2、在国际上首次建立了从粪便中获得高度纯化的B组轮状病毒的方法,鉴定了B组轮状病毒的结构蛋白和基因编码关系;首次发现了轮状病毒的第11基因编码2个多肽;进行了成人腹泻轮状病毒血清流行病学研究;确定了B组轮状病毒隐性感染者的存在。3、在国内首次大规模系统研究了中国病毒性腹泻的病原谱,明确了轮状病毒是中国婴幼儿腹泻的最主要病原,次之为人杯状病毒、肠道腺病毒和星状病毒。4、在国内首次明确了中国腹泻患儿中人杯状病毒和星状病毒的感染,二种病毒不同基因型、不同血清型在中国的三间分布;首次在中国成人腹泻暴发中分离到小双节RNA病毒中国株,鉴定了病毒RNA多聚酶基因编码区。5、在国际上最早参与建立了A组轮状病毒的PCR分型方法;确定了中国A组轮状病毒G1、G2和G3流行株的主要中和抗原基因的变异位点;建立了B组轮状病毒的PCR和打点杂交检测方法;确定了人星状病毒衣壳蛋白区的保守序列。该项研究建立的系列病原血清学检测、基因检测和流行病学研究方法,已在全国疾病预防控制系统广泛应用。研究结果已在国外JV、EID、JID、JCM等专业杂志发表论文23篇,国内发表35篇。经中国医学科学院医学信息研究所检索,其中19篇论文被SCI收录的文献引用799次;25篇论文被国内文献引用194次,获得了国内外同行的认可。该项研究培养了3位博士研究生和6位硕士研究生,并为全国培养了一批从事病毒性腹泻防治工作的骨干人员。该研究较为全面地阐明了中国病毒性腹泻的流行规律、主要病原和流行毒株的特点及变化规律;初步评估了中国病毒性腹泻的疾病负担,为中国病毒性腹泻相关的研究工作和疫苗的开发应用奠定了基础,在制定中国腹泻相关疾病的卫生政策和干预措施等方面发挥了重要作用,对中国乃至全球病毒性腹泻的预防及控制均具有重要意义。
[成果] hg08039406 北京
R37 应用技术 医学研究与试验发展 公布年份:2008
成果简介:目的:构建包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗并探讨它在体内外的免疫性质。 方法:采用pAdeasy-1系统构建包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗,并用IFA、PCR和TCID50等方法对其特异性进行鉴定。通过重组腺病毒感染人树突状细胞(DC),在体外活化自体T细胞;以及通过重组腺病毒感染小鼠淋巴细胞,皮下免疫同种小鼠,体内活化CTL评价其免疫效果。 结果:通过PCR以及间接免疫荧光试验分别证实了病毒目的基因LMP2的存在以及蛋白在293细胞中的表达。采用TCID50方法,测定第6代的病毒滴度为2×10^8。体内外的免疫实验结果显示通过这两种方式均可以有效地引发针对EBV-LMP2的CTL反应。 结论:包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗可以在体内外有效地引发CTL应答,这些资料为下一步临床应用含LMP2的重组腺病毒作为疫苗治疗和预防EBV相关肿瘤奠定了基础。
[成果] hg08039155 北京
R73-3 应用技术 医院 公布年份:2008
成果简介:为了进一步研究以EB病毒潜伏膜蛋白2(LMP2)为靶抗原制备EB病毒相关肿瘤的治疗性疫苗,利用AdEasy系统构建了EBV-LMP2的重组腺病毒。PCR鉴定结果证明病毒DNA中含有目的基因的特异性片段;RT-PCR证明了外源基因在真核细胞中得以转录;免疫酶和Western blot的结果也显示LMP2蛋白在真核细胞得到表达。将扩增后的病毒感染Hela细胞测定病毒滴度为1.5×10^9pfu/ml。将重组病毒以灌胃、肌肉注射和滴鼻的方式感染小鼠,经免疫荧光检测其特异性抗体,LDH法检测特异性CTL的杀伤作用,结果发现三种给药途径均可诱发小鼠针对LMP2的特异性体液免疫和细胞免疫,而且Ad5作为对照组的小鼠则没有引起相应的免疫反应。对诱导机体产生特异性抗瘤活性有重要意义。
[成果] hg08039638 北京
R37 应用技术 [医院, 医学研究与试验发展] 公布年份:2008
成果简介:为进一步研究利用EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)进行免疫治疗的可行性,构建了含有去除致癌基因的EB病毒LMP1片段(LMP1△)的穿梭质粒pAdTrack CMV LMP1△,将它与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1用电转染的方法共同导入大肠杆菌BJ5183中,在宿主菌重组酶的介导下进行同源重组。通过抗性筛选,获得含有重组腺病毒基因的质粒;然后再通过脂质体将重组腺病毒质粒导入腺病毒包装细胞HEK293细胞中,在HEK293细胞E1蛋白的反式作用下,病毒被包装。将包装病毒的细胞裂解上清进行PCR鉴定证实,病毒DNA中含有目的基因的特异性片段。RT PCR证明了外源基因在真核细胞中得以转录,免疫酶和Westernblot的结果也显示,LMP1△蛋白在真核细胞得到表达。将扩增后的病毒感染HeLa细胞,测定病毒滴度为3.0×109PFU/ml。为初步探讨其免疫效果,采用肌肉注射和滴鼻的方式感染Balb/c纯系小鼠,免疫酶检测其特异性抗体,LDH法检测特异性CTL的杀伤作用,结果发现,两种免疫途径均可诱发小鼠针对LMP1的特异性体液免疫和细胞免疫,而且Ad5作为免疫对照组的小鼠则没有引起相应的免疫反应。
[成果] hg08039672 北京
R31 应用技术 医学研究与试验发展 公布年份:2008
成果简介:该项目通过制备多种PrP单克隆抗体和片段特异性抗体,建立了多种检测技术;建立了朊病毒病实验动物平台技术;建立了同位素和生物素标记的无细胞构象转化技术系统。在此基础上发现在羊瘙痒因子感染仓鼠脑组织中的无糖基化PrPSc比例随着临床病程而增加,而双糖基化分子比例明显减少。系统分析了PrPSc分子和大脑的神经病理学和其他神经蛋白的动态改变,感染终末期金黄地鼠大脑皮质中出现细胞凋亡征象。系统研究了PrP蛋白在哺乳动物细胞中糖基化的特点,发现野生型PrP主要分布在细胞膜,而去糖基化的PrP蛋白主要分布在细胞浆中。证明去糖基化的PrP蛋白可引起不同细胞系发生凋亡,凋亡调节蛋白Bcl-2可能参与去糖基化PrP引起的细胞凋亡。   该项目还进行了去除PrPSc感染能力的理化灭活方法、变性剂和药物等的体内和体外研究,建立了一系列技术指标,构建了多种PrP八肽重复区的插入和缺失突变体,发现可明显影响蛋白酶敏感性和细胞生长。系统证明了PrP蛋白与tau分子间的相互作用,并因此影响微管结构稳定。发现PrP还可与ApoE、CK2等蛋白相互作用。在此基础上表达与纯化了两种朊蛋白相关蛋白和多种神经退行性相关蛋白。
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