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[硕士论文] 刘倩倩
病原生物学 安徽理工大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  调查扬州6个地区白纹伊蚊感染Wolbachia的规律,分析扬州6个地区的白纹伊蚊线粒体DNA COI基因遗传多样性,初步探究内共生菌Wolbachia对白纹伊蚊线粒体DNA COI基因多样性的影响,为将来基于Wolbachia特性对蚊媒及蚊媒病的控制奠定基础。
  方法:
  1.2017年7月-10月,采集扬州6个地区的白纹伊蚊,提取单只蚊虫的DNA,利用Wolbachia wsp基因的通用型和分型引物分别进行PCR扩增,统计阳性样本的数量,分析其感染规律。
  2.利用线粒体DNA COI基因特异性引物对蚊虫DNA样本进行PCR反应,PCR产物经测序仪测序后,通过DnaSP5.1软件分析COI基因的遗传多样性。
  3.利用生物信息学分析方法,对感染Wolbachia和不感染Wolbachha的白纹伊蚊种群的线粒体DNA多样性进行分析比较。
  结果:
  利用Wolbachia wsp基因的通用型引物进行PCR扩增的结果显示,扬州市6个不同地区的白纹伊蚊种群的感染频率在27.5%~67.5%之间;利用A大组和B大组的特异性引物的检测结果为:只感染A组的频率为0~22.5%,只感染B组的频率为5%~17.5%,共同感染A和B的频率为0~35%。
  对白纹伊蚊COI基因进行PCR扩增,测序所获得的序列用MEGA6.0分析的结果为:A+T含量为67.93%,C+G含量为32.07%,核苷酸多样性(Pi)为0.28190,单倍型多样性(Hd)为0.933。
  基于COI基因序列构建的进化树表明,邗江区、江都区采样点的白纹伊蚊聚成一小分支后又与广陵区和仪征区聚成一类,高邮市与宝应县采集点的白纹伊蚊单独聚为一支,该结果说明扬州不同的白纹伊蚊种群之间存在一定水平的基因交流。
  除了广陵区种群以外,其他5个种群中不感染Wolbachia的白纹伊蚊线粒体COI基因的单倍型多样性数(Hd)、核苷酸多样性数(Pi)和核苷酸平均差异数(K)均比感染Wolbachia的要高。
  结论:
  1.扬州市白纹伊蚊种群体内感染Wolbachia表现出多样性,有Wolbachia双重感染现象。
  2.扬州6个白纹伊蚊种群的线粒体DNA COI基因有一定水平的交流。
  3.感染Wolbachia的白纹伊蚊种群的线粒体DNA COI基因核苷酸多样性和单倍型多样性均低于不感染Wolbachia的白纹伊蚊种群,Wolbachia对寄主的线粒体DNA的多样性具有一定的影响。
[硕士论文] 柴苗
森林保护学 浙江农林大学 2018(学位年度)
摘要:瘿蜂科隶属于膜翅目(Hymenoptera)瘿蜂总科(Cynipoidea),是该总科中唯一植食性常见农林类害虫。随着线粒体基因组序列在系统发育研究中的广泛应用,使得通过线粒体基因组探究物种在不同分类阶元的系统发育关系成为可能。截止目前为止,NCBI中已经积累了113种膜翅目昆虫全线粒体基因组,主要集中于茧蜂、蜜蜂、姬蜂和叶蜂等个体较大的蜂类。由于瘿蜂科昆虫个体非常小,大多数个体均小于3mm,体长范围位于1-10mm,因此瘿蜂总科仅有1种枝跗瘿蜂Ibalia leucospoides(NCBI登录号:KJ814197)获取了全线粒体基因组。瘿蜂科所属细蜂类内部系统发育关系不明确,瘿蜂科的进化地位也存在争议。
  本研究采用二代测序Illumina HiSeq平台,对膜翅目瘿蜂总科瘿蜂科纹瘿蜂属黄纹瘿蜂Andricus flavus和Andricus sp.nov.、客瘿蜂属Synergus castaneus和栗瘿蜂属Dryocosmus kuriphilus四种瘿蜂昆虫线粒体进行了线粒体基因组序列测定,并进行了组装、注释和分析。利用比较基因组学与生物信息学结合的方法分析瘿蜂科线粒体基因组的特征,对瘿蜂科线粒体基因排列顺序与祖先昆虫进行了对比和说明。计算Ka、Ks、Ka/Ks比较瘿蜂科昆虫基因在进化中是否受选择压力。通过下载NCBI数据库中已收录的膜翅目细腰亚目细蜂类12种昆虫的线粒体基因组,基于线粒体13个蛋白质编码基因数据集,采用最大似然法(Maximum Likelihood)和贝叶斯算法(Bayesian)对细蜂类构建系统发育关系,对系统树结果进行合理分析。主要研究结果如下:
  1、通过高通量测序技术测得Andricus flavus、Andricus sp.nov.、Synergus castaneus和Dryocosmus kuriphilus的线粒体基因组。黄纹瘿蜂共获得11个蛋白质编码基因,2个rRNA基因,12个tRNA基因;Andricus sp.nov.共获得12个蛋白质编码基因,2个rRNA基因,10个tRNA基因;Synergus castaneus共获得13个蛋白质编码基因,2个rRNA基因,21个tRNA基因;Dryocosmus kuriphilus共获得12个蛋白质编码基因,1个rRNA基因,16个tRNA基因。
  2、Andricus flavus、Andricus sp.nov.、Synergus castaneus和Dryocosmus kuriphilus基因组在碱基组成上均具有AT偏向性,A+T含量远高于G+C含量,通过计算AT和CG偏斜值发现,不同类型基因中碱基使用偏好性不同。此外,第三位密码子处A+T含量高于其他两个位点。所有蛋白质编码基因起始密码子均为ATN,包括ATA、ATT、ATC、ATG,ATT使用频率最高,以TAA或不完整的TA或T为终止密码子。大多数tRNA二级结构呈现典型的三叶草型,存在多处常见的G-U错配。使用次数最多的密码子为UUA(Leu1),密码子第三位为A或U的密码子相对同义密码子RSCU值均大于1。
  3、瘿蜂科线粒体基因排列顺序与祖先昆虫的排列顺序不同,多个基因发生了位置变化和方向变化,存在基因重排现象。
  4、通过计算四种瘿蜂蛋白质编码基因的Ka、Ks、Ka/Ks值,发现瘿蜂科昆虫在进化中受到纯化作用。
  5、采用12种细蜂类昆虫和本实验测得的四种瘿蜂昆虫线粒体基因的13个蛋白质编码基因核苷酸序列为数据集,用最大似然法和贝叶斯法分别构建系统发育树,综合分析可知:细蜂类在总科水平分类关系不明确,科内分类关系稳定。
[硕士论文] 蔡睿
自然地理学 延边大学 2018(学位年度)
摘要:本研究以延吉市为例,沿城市生境梯度设置一条样带,从人为干扰较小的天然林绿地,沿生境梯度一直到人为干扰最强烈的城市中心金达莱公园绿地和文化宫公园绿地,共选取4个研究断面,6种生境类型,进行蝴蝶采样调查。其中,断面1选择延吉市生态核心的帽儿山天然次生林绿地1种生境类型;断面2选择帽儿山天然林与农耕荒野过渡区1种生境类型;断面3选择城市内部残留布尔哈通河上游天然荒草地生境和延吉市开发区荒草地2种生境类型;断面4选择城市建成区工人文化宫人工草地和金达莱公园人工次生林绿地2种生境类型进行调查研究。
  统计结果分析表明:获得蝴蝶总数为891只,隶属于3科25种,菜粉蝶(P.rapae)、豆粉蝶(C.fieldii)、蓝灰蝶(E.argiades)为研究区域的优势种,是最适应城市化环境的蝴蝶。其中菜粉蝶、蓝灰蝶是四个断面蝴蝶群落的共有种,其对生境的要求相对宽松、生态幅较宽,同时菜粉蝶和蓝灰蝶还是每年最早出现的蝴蝶。4个断面蝴蝶群落多样性指数为:断面1>断面2>断面断面3>断面4,断面1和断面2是一年中出现蝴蝶最早的两个断面,多样性指数一般在7、8月份出现极大值。随着生境质量的下降,蝴蝶群落多样性指数基本呈降低趋势。断面1除蝴蝶多样性指数最高外,还拥有四个断面中最多的物种数量;断面4多样性指数最低且无特有种分布。
  研究结果表明:天然林绿地蝴蝶多样性指数最高,是城市化环境下重点保护的生境类型绿地。同时,城市内部的金达莱公园绿地、文化宫公园绿地维持了一定的蝴蝶多样性,也应纳入城市生境保护的范围。城市化进程中导致的生境破碎化、环境污染和道路修建等都对城市中的蝴蝶数量和种类产生不利影响,对城市蝴蝶多样性保护迫在眉睫,保护的关键在于对蝴蝶生境的保护和建设,可根据蝴蝶的取食、访花、体温调节和领域行为等习性对生境的需求,针对性地进行生境网络建设和生境再造。
[硕士论文] 刘馨桧
昆虫与害虫防治 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:亮斑扁角水虻(Hermetia illucens)因幼虫可以高效转化有机废弃物,且幼虫和预蛹的蛋白质和脂类含量高,是一种重要的昆虫资源。生产实践中促进成虫大量繁殖的技术尚未解决,阻碍了亮斑扁角水虻产业化发展的进程。因此本文研究了不同人工光源对其生殖的影响,检测了雌雄成虫身体各部位的反射光谱,测定了这些部位被涂布后对生殖的影响,鉴定了感光的视蛋白基因,以揭示视觉系统对亮斑扁角水虻生殖的调控作用,并为亮斑扁角水虻大量繁殖用人工光源的研发奠定基础。主要结果如下:
  1.不同光源对亮斑扁角水虻生殖的影响
  六种光源(375nm、420nm、465nm、505nm、600nm、645nm)处理下,除645nm光源外雌虫的产卵率都超过了60%,但不同光源间没有显著差异,645nm光源下雌虫产卵率显著低于其他处理组,所有处理中最高的卵孵化率也仅11%。
  2.雌雄成虫身体各部分的反射光谱不同
  雄虫的胸部背面、雌虫腹部腹面的前段和中段与对应的异性个体的相对反射率相差较大;且涂布后,雌虫产卵率和卵孵化率均有差异,涂布雌虫腹部腹面影响最大。复眼被涂布后,产卵率和卵孵化率均显著低于对照,且雄虫复眼被涂布后影响最大。
  3.新光源对亮斑扁角水虻生殖的影响
  发明了一种可以促进亮斑扁角水虻交配产卵的新光源,在室内仅提供该光源时,亮斑扁角水虻的雌虫产卵率可达80%,卵孵化率最高可达96.31%。
  4.视蛋白基因的鉴定
  从转录组数据库鉴定出7个视蛋白基因,4个为长波长视蛋白,1个为蓝色光敏感视蛋白,2个为紫外光敏感视蛋白。选取3个视蛋白基因进行了RNAi实验,但干扰效果较差。
  本研究明确了亮斑扁角水虻雌雄成虫身体各部位的反射光谱,结合不同光源对其生殖的影响,发明了一种可促进其成虫交配活动的新光源。研究结果对亮斑扁角水虻生产中成虫大量繁殖技术的解决具有重要意义。
[硕士论文] 林子琦
生态学 安徽大学 2018(学位年度)
摘要:锹甲属(Lucanus Scopoli,1763)作为鞘翅目(Coleoptera)锹甲科(Lucanidae)的模式属,是锹甲科中极具代表性的一支。目前世界范围内已知约110种(含亚种),绝大多数分布在东洋界,仅有少数种分布于新北界和古北界。该属锹甲具有显著的雌雄二型和雄性多型现象,雄性的上颚尤其发达,自达尔文时代就是研究物种的形成与分化、性选择机制及表型演化的良好素材。正是由于该属的形态复杂,基于形态学数据的亚属、种团、亚种的系统发育关系、物种界定问题较为突出,还缺少从分子系统学角度来探讨和解决这些问题。本研究选取锹甲属的62个代表种(含亚种)及代表疑难种团(斑股锹甲种团L.maculifemoratus complex)的44个个体作为研究对象,以3个线粒体基因(COI、16SrDNA、Cytb)和3个核基因(Wingless、ITS2、EF-1α)为分子标记,对位点,碱基含量等进行了统计,基于分子系统学的方法和技术重建了该属的系统发育,估测了属的分化时间,相关结论如下:
  (1)通过总DNA提取、PCR扩增及测序后,所获得的基因数据有:COI基因序列123条、16S rDNA基因序列131条、Cytb基因序列84条,Wingless基因序列111条、EF-1α基因序列100条,ITS基因序列101条。
  (2)属水平的的系统发育分析显示:三个亚属Lucanus(Lucanus)Scopoli、Lucanus(Pseudolucanus)Hope&Westwood,Lucanus(Eolucanus)Kurosowa及凸锹甲属Noesolucanus Araya形成了一个单系。其中,L.(Lucanus)、L.(Eolucanus)、Noesolucanus的代表种分别聚为一支,各自呈显著的单系性;L.(Eolucanus)与Noesolucanus是姐妹群关系;L.(Pseudolucanus)则不是单系,其模式种L.P.)capreolus及另外5个代表种与L.(Lucanus)亚属的种呈镶嵌分布。但因该亚属的样本量有限,建议仍将其作为一个有效亚属,其分类地位还需进一步研究;而L.(Lucanus)、L.(Eolucanus)二者间的遗传距离均接近于属间的平均遗传距离,进一步支持了它们的单系性,且支持将它们提升到独立属的分类地位。
  (3)利用ABGD,GMYC和PTP3种方法对疑难种团斑股锹甲(L.maculifemoratus complex)中涉及的4个物种的44个个体进行了物种界定。其中,ABGD方法存在物种的严重过分,几乎每个地理种群都界定为一个种;PTP仅在L.m.boileaui的地理种群中存在轻度过分现象;而GMYC的界定结果则对不同地理种群进行了合理的划分。4个物种两两之间的遗传距离为0.068-0.163,低于锹甲属内种间的平均遗传距离,无法达到种的水平。
  综合3种方法及遗传距离的比较,建议它们之间为亚种关系,分别是:斑股锹甲指名亚种L.maculifemoratus maculifemoratus、斑股锹甲华北亚种L.maculifemoratus dybowskyi、斑股锹甲台湾亚种L.maculifemoratus taiwanus和斑股锹甲西南亚种L.maculifemoratus boileaui。此外,在日本分布的1个亚种L.m.adachii与指名亚种L.m.maculifemoratus的遗传距离仅有0.020,且二者在外部形态和生殖器的解剖结构上也极为相似,也没有显著的地理隔离,可以将L.m.adachii视为指名亚种L.m.maculifemoratus的异名。
  (4)基于Beast分析的分化时间显示((Lucanus+Eolucanus)+Pseudolucanus)+Noseolucanus与其他锹甲发生分歧的时间约在始新世早期(46.66Mya,95%置信区间:36.81~63.1Mya)。其中,Noseolucanus和Pseudolucanus首先分化出来,位于树的根部,较为原始。Eolucanus约在渐新世早期(36.34Mya)分化出来,并在33.08Mya(95%置信区间:16.44~39.45Mya)形成独立的一支。狭义的Lucanus在约35.75Mya(95%置信区间:33.76~37.68Mya)形成,而斑股锹甲种团的分化时间约为15.09Mya(95%置信区间:7.22~23.8Mya)。
[硕士论文] 李梦雅
昆虫与害虫防治 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:亮斑扁角水虻Hermetia illucens是重要的腐食性昆虫之一,被广泛应用于分解禽畜粪便。兽用抗生素的过量使用,使禽畜粪便中残留有大量的抗生素。其中磺胺类抗生素是使用最广泛的抗生素之一,在禽畜粪便中暴露水平也最高。本研究旨在探讨磺胺类抗生素对亮斑扁角水虻的生发发育及生理的影响,以期为利用昆虫转化畜禽粪便并降低其抗生素污染提供科学依据。主要结果如下:
  1磺胺类抗生素对亮斑扁角水虻生长发育的影响
  磺胺浓度为100、1000μg/kg浓度时,幼虫的历期、存活率、预蛹重,蛹的历期、化蛹率、羽化率和蛹重均没有显著影响,但10000μg/kg时,幼虫的历期变长、存活率降低,预蛹重和蛹重增加,化蛹率降低,但蛹的历期和羽化率未受到显著影响。低龄幼虫体重受磺胺影响显著,并且浓度越高,体重越轻;随着幼虫日龄的增加,磺胺对体重的影响逐渐降低,至11日时不再有显著影响。
  2磺胺类抗生素对亮斑扁角水虻抗氧化酶酶活力的影响
  磺胺浓度为1000、10000μg/kg时,幼虫总抗氧化能力随日龄的增加而上升,到11日龄后与对照差异不显著。7日龄幼虫的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶的酶活力均受到显著影响,并且浓度越高抑制作用越强,到9日龄与11日龄时,与对照差异不显著。
  3亮斑扁角水虻的肠道pH及磺胺类抗性基因sulⅠsulⅡ、dfrA1的影响
  幼虫中肠呈现明显的酸性区段和碱性区段,可能与肠道消化吸收密切相关。不同浓度磺胺对幼虫各个发育阶段的肠道整体pH范围无影响,但会使肠道发育延迟,并且浓度越高延迟越久。磺胺浓度为100、1000μg/kg时,各日龄幼虫肠道的AGRs表达水平未受到显著影响;10000μg/kg时,不同日龄幼虫肠道的AGRs的表达水平呈现不同的特点,7日龄时sulⅠ、sulⅡ的表达增加,11日龄时AGRs的表达均降低。
  综上所述,亮斑扁角水虻幼虫能耐受一定浓度的磺胺类抗生素,且日龄越高的幼虫耐受力越强,抗氧化酶系及磺胺类抗性基因在亮斑扁角水虻响应抗生素胁迫中发挥了作用。
[硕士论文] 任维宾
昆虫生态学 中国林业科学研究院 2018(学位年度)
摘要:瘿蚜是能够刺激植物组织增生并形成虫瘿的一类蚜虫,是致瘿昆虫的重要类群。瘿蚜大部分是农林害虫,但也有一些种类对寄主植物没有明显为害,如五倍子蚜虫。沃尔巴克氏体Wolbachia是昆虫体内普遍存在的一种重要的次级共生菌,其主要功能是调节宿主的生殖,包括诱导杀雄、雌性化、细胞质不亲和和孤雌生殖等,除此之外,还能增强宿主抗性、调控宿主的其它生命活动并影响其物种形成与进化。前人对蚜虫Wolbachia的研究主要集中在自由生活的蚜虫中,对于生活于封闭环境的瘿蚜研究较少,因此,研究瘿蚜Wolbachia的种类及系统发育关系,有助于深入理解Wolbachia在不同宿主间的分布及其亲缘关系,为进一步研究其功能及其与宿主的协同进化等提供参考。
  本研究选取Wolbachia的16S rRNA、groEL、 gltA等9个基因引物序列,对五倍子蚜、杨树瘿蚜和黄连木瘿蚜等9种瘿蚜共14个种群的Wolbachia感染情况进行检测,进一步对感染的Wolbachia进行特定基因测序,联合其他蚜虫的Wolbachia相同基因序列构建系统发育树,分析瘿蚜与其他蚜虫感染Wolbachia的株系差异和亲缘关系。主要结果如下:
  1、Wolbachia在瘿蚜中的感染率较低
  通过特定基因检测发现,9种瘿蚜的14个种群中,共有3种瘿蚜各1个种群感染了Wolbachia,分别为:肚倍蚜(Kaburagia rhusicola)昆明种群、角倍蚜(Schlechtendaliachinensis)峨眉种群和滇叶瘿绵蚜(Pemphigusyunnanensis)昆明种群,Wolbachia在这3种瘿蚜中的感染率分别为:66.7%、11.1%和11.1%。表明与其他昆虫相比,Wolbachia在上述9种瘿蚜中的感染并不普遍,感染率较低。
  2、瘿蚜Wolbachia特定基因的测序
  选择感染Wolbachia的瘿蚜种群,对特定基因进行扩增和测序,在六个基因中获得了相应的基因序列,其中肚倍蚜(K.rhusicola)昆明种群、角倍蚜(S.chinensis)峨眉种群和滇叶瘿绵蚜(P.yunnanensis)昆明种群的16S rRNA基因片段序列长度分别为1077bp、1061bp、1054bp(采用16S281F/1372R引物)和440bp、440bp、442bp(采用WspecF/WspecR),gatB和fbpA基因的片段长度分别为:497bp、492bp、497bp和476bp、479bp、480bp。另外,在滇叶瘿绵蚜(P.yunnanensis)昆明种群还分别获得了coxA、hcpA和ftsZ的基因片段长度,分别为:488bp、509bp和518bp。通过NCBI-Blast比对,2种五倍子蚜的特定基因序列与其他自由生活的蚜虫相似度较低,而滇叶瘿绵蚜的特定基因序列与其他自由生活的蚜虫、粉虱等相似度很高,暗示这2类瘿蚜感染的Wolbachia可能具有不同的起源。
  3、五倍子蚜与杨树瘿蚜感染的Wolbachia分别属于不同的株系
  利用Wolbachia的16S rRNA基因序列和多位点序列分型MLST(multilocus sequencetyping)方法,联合NCBI中已有的Wolbachia各超群代表株系进行同源性比对并构建系统发育树。结果表明,滇叶瘿绵蚜(P.yunnanensis)昆明种群感染的Wolbachia与其他自由生活蚜虫中的感染的B超群株系且亲缘关系很近,并同属于B超群。而肚倍蚜(Krhusicola)昆明种群和角倍蚜(S.chinensis)峨眉种群感染的Wolbachia与自由生活蚜虫中的感染的Wolbachia亲缘关系较远,推测其属于O超群。暗示五倍子蚜感染的Wolbachia与滇叶瘿绵蚜和其他自由生长的蚜虫感染的Wolbachia可能具有不同的起源。
  4、本研究在2种五倍子蚜检测到的Wolbachia感染并初步确定其属于O超群,且肚倍蚜系首次检测到Wolbachia感染。表明蚜虫感染的Wolbachia株系除了前人已经发现的A、B、M和N4个超群外,还存在着其他超群。
[硕士论文] 吴家园
昆虫与害虫防治 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:黑水虻Hermetia illucens是一种重要的昆虫资源,其幼虫在有机废弃物处理方面的应用已越来越受到人们的关注。实际生产中由于幼虫历期长,为避免食物发霉或板结,常采取多次补充食物的方式,补充不及时幼虫易饥饿;另外,长途运输过程中未提供食物幼虫也易饥饿。目前,饥饿对黑水虻的影响尚未见报道。本研究主要探讨了黑水虻幼虫在饥饿条件下的生理响应,以期为黑水虻的产业化发展提供基础资料。主要研究结果如下:
  1.不同大小幼虫的耐饥力
  正常取食时,幼虫在4-5日龄时体重日增长率最高;7-9日龄体重增长量最大;13日龄体重最大;14日龄出现预蛹,预蛹的头部形态可以作为主要的辨别依据。半数死亡时间(LT50)和日龄及体重呈正相关。
  2.饥饿幼虫恢复取食后的生物学特点
  7日龄幼虫经过不同时长饥饿处理后再喂食,从第7d起,所有处理都出现预蛹。饥饿30d的处理达到50%预蛹的时间比各处理晚1d。饥饿幼虫复食后的预蛹率均显著高于对照。饥饿10-30d显著提高了预蛹重,其中饥饿15d的预蛹重最大。幼虫饥饿经历对成虫产卵量无显著影响。饥饿10d对卵的孵化率无显著影响;幼虫饥饿经历30d、40d显著降低了其成虫所产卵的孵化率。
  3.饥饿对幼虫生理的影响
  幼虫饥饿初期主要消耗脂肪,后期主要消耗蛋白。保护酶的总抗氧化能力和过氧化物酶在饥饿中的变化趋势很相近,超氧化物歧化酶活性在饥饿5d后就处于一个下降的趋势,过氧化氢酶活性变化较剧烈。
  4.饥饿不同时长的幼虫及其复食后预蛹的数字基因表达谱共获得38782个基因。饥饿5、15、30d的幼虫和饥饿0d相比分别获得6879、8975、10190个差异表达基因。其对应的复食后的预蛹,分别获得3271、3178、1534个差异表达基因。
  综上所述,本研究明确了不同大小幼虫都具有较强耐饥力,发现饥饿幼虫复食后预蛹产量得到显著增加,可为黑水虻生产提供借鉴;对黑水虻幼虫饥饿的生理变化的探索及差异基因表达谱的研究可为进一步研究黑水虻的耐饥力提供数据支持。
[硕士论文] 孙丹
昆虫与害虫防治 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:昆虫体内保幼激素(JH)对成虫生殖和滞育具有重要的调控作用,JH缺乏则会引发成虫的生殖滞育。昆虫体内JH含量受JH合成和JH降解共同调节。有证据表明JH合成途径介导的JH合成受阻,是导致成虫体内JH缺乏进而引发生殖滞育的重要原因。然而JH降解途径介导的JH降解加剧是否是导致成虫体内JH缺乏,从而引发生殖滞育的原因之一,尚不明确。JH降解途径中,主要有3类酶参与并完成降解JH的过程,分别为:保幼激素酯酶(JHE)、保幼激素环氧水解酶(JHEH)和保幼激素二醇激酶(JHDK)。前期研究表明,Kr-h1作为响应JH信号的指示基因,在大猿叶虫Colaphellus bowringi滞育准备期表达持续较低,暗示注定滞育成虫中JH信号缺乏。本研究以大猿叶虫为材料,研究JH降解酶基因在滞育准备中的功能,主要结果如下:
  1.大猿叶虫JH降解酶基因克隆及序列分析
  在大猿叶虫中克隆获得3个JHE(JHEJ,JHE2,JHE3)、1个JHEH及1个JHDK的cDNA序列。序列比对及进化树分析表明,JHEs、JHEH及JHDK均含有相应的JH降解酶可降解JH的保守活性基序,暗示这3种酶可能参与大猿叶虫中JH的降解。
  2.JH信号对大猿叶虫JH降解酶基因的表达调控
  JH降解酶基因在注定滞育与注定非滞育成虫中的表达模式分析结果表明,JHEs在注定滞育成虫中表达水平更低,JHEH和JHDK则在注定滞育成虫中表达水平更高,这暗示在JH信号缺乏的注定滞育成虫中,主要由JHEH和JHDK介导JH的降解,而非JHEs。干扰JH受体Met(Methoprene-tolerant)及外源施加JH类似物实验结果表明,JH信号会诱导JHEs的表达水平上调,抑制JHEH及JHDK的转录。因此推测,JH信号与JH降解酶基因的表达存在反馈调控,JH信号可能是注定滞育和注定非滞育成虫体内JHE,JHEH和JHDK表达差异产生的原因之一。
  3.JH降解酶基因在大猿叶虫滞育准备中的功能
  在注定滞育成虫中,干扰JHEH或JHDK后,Kr-h1表达水平上调,脂质积累及抗逆基因表达降低;同时,干扰JHEH后Vg1表达水平上调。无论干扰JHEH或JHDK均未能逆转注定生殖滞育成虫的滞育表型。
  综上所述,在大猿叶虫中,JHEH和JHDK介导的JH降解途径促进生殖滞育准备,但不决定滞育发生,结果为揭示昆虫生殖滞育发生的分子调控机制提供了线索。
[硕士论文] 蒋宇
生态学 安徽大学 2018(学位年度)
摘要:昆虫肠道微生物在宿主的营养供给、消化吸收、生长发育、免疫防御等方面都起着重要作用,并有助于拓宽其生态位。锹甲科昆虫(Lucanidae)因其显著的雌雄二型(Sexual dimorphyism)和雄性三型(Male trimorphism)及性选择行为而成为鞘翅目(Coleoptera)中比较独特的一支,也是昆虫纲(Insecta)中备受关注的热点类群。多数锹甲的成虫以树汁或腐烂的果实为食,幼虫则通过分解朽木或腐殖质获取营养。因此,它们在森林生态系统的碳循环中占据独特的生态位,在生物质能源的分解利用中也具有重要价值。但目前基于高通量测序有关这类昆虫肠道微生物的研究较少。
  本研究选取锹甲科昆虫中的典型代表物种华美奥锹甲(Odontolabis fallaciosa)为研究对象,首次对其成虫中后肠微生物细菌群落的16S rDNA V3-V4区进行了高通量测序,研究了该物种不同性别之间、不同颚型雄性间的肠道微生物多样性,分析其肠道微生物组成和差异,并探讨它们在华美奥锹甲能量需求中所起的作用,以期为进一步研究锹甲肠道微生物的功能及其在表型演化中的作用提供理论参考。相关研究结果如下:
  (1)测序结果共获得3255个OTUs,注释到的主要分类阶元隶属于42个门、118个纲、361个科、585个属。
  (2)华美奥锹甲肠道细菌群落中门类水平上丰度最高的主是变形菌门Proteobaeteria、拟杆菌门Bacteroidetes、厚壁菌门Firmicutes、柔膜菌门Tenericutes、梭杆菌门Fusobacteria、Euryarchaeota和硝化螺旋菌门Nitrospirae。丰度大于1%的优势属有15个,分别隶属于变形菌门,拟杆菌门和厚壁菌门。具体包括:不动杆菌属Acinetobacter、Dysgonomonas属、巴尔通氏体属Bartonella、金黄杆菌属Chryseobacterium、肠球菌属Enterococcus、卟啉单胞菌属Porphyromonas、喜热菌属Caloramator、苍白杆菌属Ochrobactrum、摩根菌属Morganella、沙雷氏菌属Serratia、Telmatospirillum属、黄质菌属Flavobacterium、克雷白氏杆菌属Klebsiella、丛毛单胞菌属Comamonas、脱硫弧菌属Desulfovibrio。
  (3)在不同性别(雌雄二型)的2个分组中,细菌群落的相对丰度有差异:大颚型雄性、雌性、中颚型雄性的优势门类数量较多,而小颚型雄性最少。厚壁菌门在大颚型雄性、雌性肠道中含量较高,厚壁菌门对于食物营养吸收有重要作用,可能对大颚型雄性、雌性的营养利用产生有益影响。属类水平上,雌性的优势属数量最多,其次是大颚型雄性,小颚型雄性中最少。在不同颚型的雄性(雄性三型)3个分组中,细菌群落的相对丰度也有差异:中颚型的优势门类数量高于大颚型、中颚型,属类水平上,大颚型雄性的优势属数量高于中颚型和小颚型。
  (4)多样性分析显示:α多样性指数中,雌性的测定物种指数(Observed species)和香农指数(Shannon)均与大颚型、中颚型、小颚型雄性存在显著差异;β多样性中,PCA分析结果显示雌性个体样本之间的距离较近,说明群落组成更稳定;相似性检验(ANO SIM)发现雌性的肠道细菌群落组成与三个颚型雄性间都有显著差异,大颚型与中颚型雄性之间的差异显著。
  (5)PICRUST代谢功能预测结果显示,所有样本潜在功能基因组成是相似的,但影响食物降解和营养吸收的碳水化合物代谢和氨基酸代谢功能基因在雌性和雄性中的丰度最高。
  这些结果显示在华美奥锹甲成虫的肠道微生物中:雌性的肠道微生物群落组成和丰度与雄性有显著差异;大颚型、中颚型雄性之间也有差异。这样的差异可能与不同性别、不同颚型雄性的营养需求存在关联,也为进一步探讨锹甲肠道微生物的功能及其在表型演化中可能起到的作用提供一定的理论参考。
[硕士论文] 薛圣杰
生物学 浙江理工大学 2018(学位年度)
摘要:自噬(Autophagy)是真核生物中用于物质周转的一个高度保守的过程,以应答外界胁迫条件,保障生命体生存。在该过程中,一些需要被降解的蛋白或细胞器会被具有双层膜结构的自噬小体包裹并运输至溶酶体。这一过程需要许多自噬相关蛋白(Autophagy-related protein,Atg)的参与。Atg8蛋白(Autophagy-related8protein)作为两种泛素样蛋白之一参与了细胞自噬过程,它可与脂质磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylathanolamine,PE)结合,随后转移至自噬膜上,并且Atg8的蛋白修饰会影响其行为,这些分子机制在哺乳动物中已经被研究地较为透彻,但其在昆虫细胞中的自噬调控机制报道很少,尤其是蛋白的翻译后修饰的调控作用。家蚕作为鳞翅目的模式生物,其完全变态发育的过程受到营养及蜕皮激素等因子影响,而这些因子又能参与自噬的调控,因此,深入研究家蚕Atg8蛋白对细胞自噬及凋亡的调控机制具有重要意义。
  我们前期的家蚕蛋白乙酰化修饰组学分析结果显示,Atg8的K13位点可发生乙酰化修饰,由于蛋白的乙酰化修饰是对蛋白功能起调控作用的最主要翻译后修饰之一,在生命体中具有十分重要的作用,因此,在本研究中,为了深入了解家蚕Atg8蛋白乙酰化修饰对细胞自噬过程和细胞凋亡的分子调控机制,我们利用原核表达系统大量表达了家蚕Atg8蛋白并制备了多克隆抗体,并利用定点突变技术深入研究了该蛋白乙酰化修饰对细胞自噬和细胞凋亡调控的分子机制。首先,提取家蚕细胞总RNA,利用RT-PCR技术克隆了atg8基因,构建原核表达载体pET28a-atg8,诱导表达目的蛋白并进行纯化,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。然后利用EBSS(Earle's Balanced Salt Solution)刺激家蚕BmN细胞以建立细胞的自噬模型,研究饥饿时间对家蚕Atg8蛋白表达水平的影响。结果显示:细胞自噬在诱导后极短时间内即可发生,并且Atg8-PE/Atg8的比例在饥饿2-4h后达到顶峰。然后利用重叠PCR技术分别构建了模拟乙酰化和去乙酰化的突变体,并插入瞬时表达载体pIEX-1中,转染家蚕BmN细胞进行过表达,Western blot检测结果显示:Atg8乙酰化修饰抑制了细胞自噬的发生。进一步利用荧光蛋白mCherry作为标记,以pIEX-1作为载体,在家蚕细胞中进行融合表达,观察Atg8发生修饰前后细胞自噬的水平差异,结果显示:Atg8乙酰化后的细胞自噬水平较低,而去乙酰化的Atg8自噬水平升高。最后,利用DNA片段化检测试剂和细胞流式细胞术分析家蚕Atg8蛋白乙酰化修饰对细胞凋亡的影响,结果显示:发生了乙酰化修饰的Atg8蛋白,其所在的细胞凋亡比率更高。
  综上所述可知,家蚕自噬相关蛋白Atg8的K13乙酰化修饰对细胞自噬的发生具有抑制作用,并且去乙酰化会一定程度的抑制细胞凋亡的发生。本结果将为深入研究家蚕细胞自噬调控的分子机制奠定基础。
[硕士论文] 汪前
生态学 安徽大学 2018(学位年度)
摘要:奥锹甲属(Odontolabis Hope)隶属于鞘翅目(Coleoptera)锹甲科(Lucanidae)奥锹甲族(Odontolabini)。该属目前已知约50种(包含亚种),均分布于东洋界。该属锹甲不仅具有外部形态差异显著的雌雄二型、雄性多型,且存在不同的色斑型,特别是雄性上颚特征常截然不同。这些因性二型、雄性颚型变化及不同色斑型所导致的同种内的表型差异,给基于经典形态的物种鉴定和分类带来诸多困扰。且属内不同种间的雌性外部形态、雌雄外生殖器的解剖特征也很相似,进一步加剧了该属分类研究的混乱局面,多个疑难种团的物种界定有待解决。目前还缺少利用分子系统学研究相关的方法和技术来探索该属的分类学问题。
  本研究选取了三个线粒体基因(COI、16S rDNA和Cytb)以及两个核基因(Wingless、CAD)为目的基因,通过多基因联合标记,利用RAxML云端网站或者raxmlGUI1.5b1本地软件、MrBayes等软件,采用最大似然法、贝叶斯法等方法重建了东洋界奥锹甲属18个代表种的系统发育关系;同时也对中华奥锹甲种团不同地理种群的62个个体(Odontolabis sinensis complex包括鞘翅窄圆红斑的中华奥锹甲O.sinensis、鞘翅宽三角形黄斑的华美奥锹甲O.fallaciosa及鞘翅具有二者间过渡斑型的个体)进行了系统发育关系分析;并利用ABGD、GMYC以及PTP方法对中华奥锹甲种团进行了物种界定分析。为了解该属线粒体基因的进化,本研究也对该属代表种的线粒体全基因组进行高通量测序及分析。主要研究结果如下:
  (1)共获得基因序列480条,其中:COI序列112条、16S rDNA序列79条、Cytb序列68条、Wingless序列118条、CAD序列103条。
  (2)奥锹甲属的系统发育重建显示:奥锹甲属Odontolabis和新锹甲属Neolucanus呈姐妹群关系,支持了前期的相关研究结论;二者是奥锹甲族的重要成员;奥锹甲属是一个单系,其代表种的拓扑结构反映了它们的遗传分化与其地理分布的关系密切,即分布于东南亚各个岛屿的部分代表种形成了独立的“岛屿支系”,而跨“大陆-岛屿”间断分布的部分代表种则聚成了一支。少数样本未能获得有效的16S rDNA、CAD基因序列,进行系统发育分析时它们的拓扑结构位置都表现不理想。这可能是由于这两个基因序列都较长、缺失了较多遗传信息所致。
  (3)中华奥锹甲种团的系统发育关系及物种界定:系统发育分析表明在种团内部分成了三支:华东南的一支(含O.sinensis、O.fallaciosa及二者间过渡斑型个体,含来自安徽、广西、广东、贵州雷公山、浙江、湖南、四川、福建的个体);而西藏的种群(鉴定为O.fallaciosa tf1)聚为一支;滇西南的种群(鉴定为O.fallaciosa tf2)也始终聚为一支。通过ABGD、GMYC以及PTP方法进行物种界定,均与系统发育分析具有一致性,没有过分现象。华东南的一支界定为同一个种,其地理种群间的遗传距离是0.001~0.027,也进一步支持了这些鞘翅色斑不同的个体均为一个种,即它们都是O.sinensis的不同色斑型。而西藏、滇西南的种群因样本量较少,初步考虑与分布在印度的O.cuvera关系密切。
  (4)通过高通量测序技术,首次获得了华美奥锹甲O.fallaciosa的线粒体全基因组序列,并向GenBank提交了数据。其线粒体全基因组的结构组成和密码子使用情况均符合典型昆虫的线粒体结构特点,其是一个封闭的双链圆环结构,由13个蛋白质编码基因(cox1-3,ND1-6,ATP6、ATP8、ND4L和Cytb),22个tRNA基因,2个rRNA基因(rrnS(12S)和rrnL(16S))和一个控制区组成,蛋白质编码基因的起始密码子除cox1为AAC外其余均是ATN。利用12个蛋白质编码基因(PCGs)的系统发育树则表明O.fallaciosa和盾锹甲属的Aegus angustus具有共同祖先。
[硕士论文] 林爱丽
农业昆虫与害虫防治 河南农业大学 2018(学位年度)
摘要:隐翅虫科Staphylinidae是鞘翅目Coleoptera物种多样性最高的一个科,现记载约61,000种。目前,隐翅虫科的研究主要集中在基于形态特征、核基因和部分线粒体基因的系统发生研究。近年来,线粒体DNA(mtDNA)因其点突变率高、母系遗传、结构简单、无内含子、结构组成保守等优势特性已广泛应用于昆虫分子系统学研究中。本研究基于线粒体基因组数据对隐翅虫科进行系统发生分析,为明确隐翅虫科的系统发生关系提供科学数据并从线粒体基因组角度去验证基于形态学特征及其他分子数据的系统发生研究结果。
  本研究通过二代测序的方法获得了9种隐翅虫的近全长线粒体基因组序列,包括隐翅虫亚科Staphylininae代表性种类7种、简隐翅虫亚科Osoriinae1种和毒隐翅虫亚科Paederinae1种。本研究利用生物信息学及比较基因组学等方法对已测得的9种隐翅虫及GenBank中已公布的90种隐翅虫的线粒体基因组数据进行比较分析,并基于37个线粒体基因的联合序列矩阵利用最大似然法和贝叶斯法重建了隐翅虫科高阶元的系统发生关系。主要研究结果如下:
  (1)目前获得的近全长隐翅虫线粒体基因组不具有基因缺失和基因重排现象。
  (2)隐翅虫科线粒体基因组大多呈明显的AT偏斜和CG偏斜。
  (3)基因重叠与特定基因有关:atp6-atp8和nad4-nad4L两对基因间出现稳定的重叠区域,即7bp的ATGATAG或ATGATAA。
  (4)基因间隔主要分布在两个区域,tRNA-Arg与tRNA-Asn间隔区的长度主要为50~228bp;tRNA-Ser2和nad1之间的基因间隔区约为20bp,此间隔区域被认为是线粒体基因组转录过程中作为转录终止的信号位点。
  (5)nad1和cox1基因具有较为特殊的起始密码子,分别是TTG和AAT;且部分种类的nad4、nad5、cox2和cox3基因使用不完全的终止密码子T。
  (6)氨基酸密码子使用偏好性与核苷酸序列GC含量及第三位点GC含量存在明显的负相关性,尤其与密码子第三位点GC含量相关性极为显著。
  (7)仅tRNA-Ser1缺少DHU臂、无法形成三叶草型结构,且RNA-Ser1的反密码子由GCT变为TCT。
  (8)蛋白质编码基因的核苷酸替代率与GC含量呈明显的负相关。atp8基因的进化速率最快;cox1基因最为保守。
  (9)基于核苷酸序列与氨基酸序列及密码子第一、第二位点序列构建的系统发生分析存在一定的差异,但所有的分析都不支持以下四个亚科级群的单系性:四眼隐翅虫亚科级群Omaliine Group、尖腹隐翅虫亚科级群Tachyporine Group、异形隐翅虫亚科级群Oxyteline Group和隐翅虫亚科级群Staphylinine Group。突眼隐翅虫亚科Steninae、异形隐翅虫亚科Oxytelinae和出尾蕈甲亚科Scaphidiinae被恢复为单系群,而尖腹隐翅虫亚科Tachyporinae和四眼隐翅虫亚科Omaliinae均为非单系群。这些系统发生分析结果验证了先前基于形态学特征的系统发生研究结果。基于37个基因的核苷酸序列构建的系统发生关系也支持隐翅虫亚科Staphylininae和前角隐翅虫亚科Aleocharinae的单系性,这与基于形态学特征和其他分子数据的研究结果也是一致的。氨基酸序列构建系统发生树存在差异的可能原因是:氨基酸序列过于保守,没有足够的系统发生信息解决近期分歧物种间的系统关系。基于仅包含第一和第二位点的核苷酸序列构建的系统发生树存在差异的原因是:密码子第三位点也包含研究对象的系统遗传信号,因此不应该被删除。
  (10)毒隐翅虫亚科Paederinae与哈隐翅虫亚科Habrocerinae聚为一支,与隐翅虫亚科Staphylininae构成姐妹群,从而否定了毒隐翅虫亚科Paederinae与隐翅虫亚科Staphylininae的姐妹群关系,另外本研究中蚁甲亚科Pselaphinae为并系群,不同于部分研究结果中蚁甲亚科Pselaphinae为单系群,以上结果有待基于更多取样和分子标记数据的分析、探究。
[硕士论文] 高亚杰
动物学 浙江师范大学 2018(学位年度)
摘要:浙江省地理环境复杂,水资源分丰富,居全国第四,有着丰富的动植物资源。历史上浙江省未系统做过水生昆虫资源调查,蜉蝣目昆虫也只是被一些学者零星的报道过。为了了解浙江省蜉蝣目昆虫多样性状况,自2016年至2017年在浙江省多个地区进行了广泛的蜉蝣目稚虫标本采集和资源调查,获得了较全面的稚虫标本。本文第一章概述了浙江省的自然地理和蜉蝣目昆虫的概述,回顾了浙江省蜉蝣的历史和现状。本文第二章对蜉蝣的一般形态做了简要的描述,并对蜉蝣的采集工具、采集方法、保本保存、观察等方面做了概述,同时在全面整理和总结历史文献的基础上,对采集自我国浙江省的13300多号标本进行了初步的分类鉴定工作,提供了详细的浙江省蜉蝣名录,以及各科蜉蝣种类在浙江八大水系和两个独立水系的分布和采集情况。本文第三章提供了浙江省蜉蝣目稚虫科检索表,并对本次调查采集到的12科25属46种蜉蝣稚虫解剖鉴定,并进行了详细的描记。。
  浙江省蜉蝣目昆虫总计13科34属62种(含新描述的8个新种),其中包括浙江省新纪录科1科新纪录种19种,包括四节蜉科的8新种,分别为安吉四节蜉Baetis anjiensis sp.nov.,五洩四节蜉Baetis wuxiensis sp.nov.,天目山四节蜉Baetis tianmushanensis sp.nov.,庆元四节蜉Baetis qingyuanensis sp.nov.,溪口四节蜉Baetis xikouensis sp.nov.,狭门四节蜉Baetis xiamenensis sp.nov.,舟山四节蜉Baetis zhoushanensis sp.nov.,琼台四节蜉Baetis qiongtaiensis sp.nov.。
  本研究中的所有标本均保存于浙江师范大学野生动物生物技术与保护利用浙江省重点实验室。
[博士论文] 李杨
农业昆虫与害虫防治 浙江大学 2017(学位年度)
摘要:茧蜂亚科Braconinae隶属于膜翅目Hymenoptera细腰亚目Apocrita寄生部Parasitica茧蜂科Braconidae,目前世界已知188属3000余种,世界性分布,主要分布于热带及亚热带区域(Quicke,1987)。该亚科是鳞翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目以及其它不完全变态昆虫的容性外寄生蜂,是农林害虫的重要寄生天敌。本文对中国茧蜂亚科的分类进行了研究和整理,包括总论和各论两个部分。
  总论部分回顾了茧蜂亚科的研究历史,简述了该亚科的分类沿革与分类系统。各论部分主要根据的Yu et al.(2016)的分类系统,从国内外一些标本馆馆藏的我国茧蜂亚科标本中,鉴定出该亚科163种,加上我国已有报道但本研究未见标本的.122种,共记述了285种,其中有5新属(含本研究己发表新属)、8新记录属(含本研究已发表新记录属)、76新种(包含本研究已发表新种)、19新记录种(含本研究已发表新记录种)、10新异名和1新组合(已发表)。各属级分类单元均列有文献印证、特征简述、寄主和分布等信息;编制了分属及分种检索表;对本文研究的大部分种做了详细的描述,并附有特征图,对部分种类进行了修订。
  新属(含本研究已发表新属):长室茧蜂属Longicellibracon gen.nov.;斑翅茧蜂属Maculibracon Li,van Achterberg et Chen,2017;三角茧蜂属Trigonobracon gen.nov.;肖三刺茧蜂属Trispinarioides gen.nov.;类簇毛茧蜂属Vipionides gen.nov.。
  新记录属(含本研究已发表新记录属):巨眼茧蜂属Ischnobracon Baltazar,1963;凸脸茧蜂属Chaoilta Cameron,1899;缘柄茧蜂属Craspedolcus Enderlein,1920;中脊茧蜂属Cyanopterus Haliday,1835;假囊腹茧蜂属Pseudospinaria Enderlein,1905;副簇毛茧蜂属Vipiomorpha Tobias,1962;折尾茧蜂属Zaglyptogastra Ashmead,1900;嘎玛茧蜂属Gammabracon Quicke,1984;念珠茧蜂属Monilobracon Quicke,1984。
  新种(含本研究已发表新种):蝶形叉茧蜂,新种Furcadesha papilionaceus sp.nov.;短尾弯肘茧蜂,新种Campyloneurus brachyurus sp.nov.;毛面弯肘茧蜂,新种Campyloneuruslasiofacialis sp.nov.;纵纹弯肘茧蜂,新种Campyloneurus longitudinalis sp.nov.;黑腹弯肘茧蜂,新种Campyloneurus nigeriventris sp.nov.;混纹弯肘茧蜂,新种Campyloneuruspromiscuus sp.nov.;方头弯肘茧蜂,新种Campyloneurus quadratceps sp.nov.;粗柄弯肘茧蜂Campyloneurus trachypus sp.nov.;长脉深沟茧蜂,新种Iphiaulax longinervis sp.nov.;长背深沟茧蜂,新种Iphiaulax longitergum sp.nov.;小斑深沟茧蜂,新种Iphiaulax micromacularissp.nov.;粗室深沟茧蜂,新种Iphiaulax robustcularis sp.nov.;皱颜深沟茧蜂,新种Iphiaulaxrugifacialis sp.nov.;多斑深沟茧蜂,新种Iphiaulax stigmosus sp.nov.;刻背深沟茧蜂,新种Iphiaulax tergipunctuatus sp.nov.;滴形巨眼茧蜂,新种Ischnobracon guttatus sp.nov.;强脊刻柄茧蜂,新种Atanycolus carinatus sp.nov.;长颊刻柄茧蜂,新种Atanycolus longiusculus sp.nov.;斑翅刻柄茧蜂,新种Atanycolus maculipennis sp.nov.;密毛刻柄茧蜂,新种Atanycolussetosus sp.nov.;曲缝茧蜂,新种Bracon(Bracon)curvatus sp.nov.;密纹茧蜂,新种Bracon(Bracon)multistriata sp.nov.;黑斑茧蜂Bracon(Bracon)nigromaculata sp.nov.;浅沟光茧蜂,新种Bracon(Glabrobracon)indistinctus sp.nov.;细管光茧蜂,新种Bracon(Glabrobracon)leptosiphus sp.nov.;纵条光茧蜂,新种Bracon(Glabrobracon)longistriata sp.nov.;大腹光茧蜂,新种Bracon(Glabrobracon)megaventris sp.nov.;短脊宽口茧蜂,新种Bracon(Lucobracon)brevicarina sp.nov.;扁胸宽口茧蜂,新种Bracon(Lucobracon)compressus sp.nov.;象甲宽口茧蜂,新种Bracon(Lucobracon)curculionensis sp.nov.;黄褐宽口茧蜂,新种Bracon(Lucobracon)flavitestacea sp.nov.;方斑宽口茧蜂,新种Bracon(Lucobracon)quadratus sp.nov.;侧沟东方茧蜂Bracon(Orientobracon)laticanaliculatus Li,He et Chen,2016;斑顶东方茧蜂Bracon(Orientobracon)maculaverticalis Li,He et Chen,2016;三角东方茧蜂,新种Bracon(Orientobracon)triquetrus sp.nov.;卷蛾刻点茧蜂Bracon(Punctobracon)rhyacioniphilous Li,He et Chen,2016;暗脉刻纹茧蜂Bracon(Sculptobracon)obsoletus Li,He etChen,2016;宽沟颚钩茧蜂,新种Bracon(Uncobracon)eurysulcata sp.nov.;龙王山颚钩茧蜂,新种Bracon(Uncobracon)longwangshanensis sp.nov.;短头凸脸茧蜂,新种Chaoiltabrevicephalus sp.nov.;斑胸缘柄茧蜂,新种Craspedolcus maculithorax sp.nov.;黑腹缘柄茧蜂,新种Craspedolcus nigrabdominalis sp.nov.;光沟缘柄茧蜂Craspedolcus politus Li,vanAchterberg et Chen,2017;亮颜长室中脊茧蜂,新种Cyanopterus(Ipobracon)lucidus sp.nov.;长柄长室中脊茧蜂,新种Cyanopterus(Ipobracon)productus sp.nov.;横头长室中脊茧蜂,新种Cyanopterus(Ipobracon) transversus sp.nov.;双斑埃茧蜂,新种Ectemnoplax bimaculatussp.nov.;黄白印度茧蜂,新种Indabracon alboflavidus sp.nov.;异色印度茧蜂,新种Indabracondiscolor sp.nov.;黑背印度茧蜂,新种Indabracon nigronotatus sp.nov.;半圆印度茧蜂,新种Indabracon semicircularis sp.nov.;吉林长室茧蜂,新种Longicellibracon jilinensis sp.nov.;何氏斑翅茧蜂Maculibracon hei Li,van Achterberg et Chen,2017;黄脉斑翅茧蜂Maculibraconluteonervis Li,van Achterberg et Chen,2017;黄褐纹腹茧蜂,新种Shelfordia fulva sp.nov.;暗翅纹腹茧蜂,新种Shelfordia obscuripennis sp.nov.;长室窄茧蜂,新种Stenobracon(Stenobracon)longiusculus sp.nov.;光亮三角茧蜂,新种Trigonobracon nitidus sp.nov.;丽纹肖三刺茧蜂,新种Trispinarioides pulcherrimus sp.nov.;W斑肖三刺茧蜂,新种Trispinarioides w-macula sp.nov.;缺区簇毛茧蜂,新种Vipio abnormalis sp.nov.;腹沟副簇毛茧蜂,新种Vipiomorpha sulcatus sp.nov.;云南副簇毛茧蜂,新种Vipiomorphayunnanensissp.nov.;短刺类簇毛茧蜂,新种Vipionides brevispiniformis sp.nov.;褐纹类簇毛茧蜂,新种Vipionides fuscimaculatus sp.nov.;尖角马尾茧蜂Euurobracon acuminatus Li,He et Chen,2016;变色马尾茧蜂Euurobracon disparalis Li,He et Chen,2016;黄翅马尾茧蜂Euurobraconxuthus Li,He et Chen,2016;细长折尾茧蜂,新种Zaglyptogastra elongitus sp.nov.;三色折尾茧蜂,新种Zaglyptogastra tricolor sp.nov.;双色长尾茧蜂,新种Glyptomorpha(Glyptomorpha)bicolor sp.nov.;同色嘎玛茧蜂,新种Gammabracon uniformis sp.nov.;汪氏嘎玛茧蜂,新种Gammabracon wangi sp.nov.;纵条念珠茧蜂,新种Monilobracon longitudinalissp.nov.;白缘念珠茧蜂,新种Monilobracon marginatus sp.nov.。
  新记录种(含本研究已发表新记录种):科氏弯肘茧蜂Campyloneurus kirbyi(Cameron,1905);韩氏巨眼茧蜂Ischnobracon hannongbuai Quicke et Butcher,2010;V斑巨眼茧蜂Ischnobracon v-macula(Cameron,1899);三脊双脊茧蜂Bicarinibracon tricarinatus(Cameron,1897);瘿蚊茧蜂Bracon(Bracon) asphondyliae(Watanabe,1940);杨扇舟蛾刻纹茧蜂Bracon(Sculptobracon)yakui Watanabe,1937;三色颚钩茧蜂Bracon(Uncobracon)tricoloratus Tobias,2000;喜马拉雅凸脸茧蜂Chaoilta himalayensis(Cameron,1899);团翅缘柄茧蜂Craspedolcusfraternus Enderlein,1920;三色长室中脊茧蜂Cyanopterus(Ipobracon)tricolor(Ivanov,1896);日本短室中脊茧蜂Cyanopterus(Paravipio) jakuticus(Tobias,1973);黑柔茧蜂Habrobraconexcisus Tobias,1957;棕黄柔茧蜂Habrobracon nygmiae Telenga,1936;维克柔茧蜂Habrobracon viktorovi Tobias,1961;西姆拉斑翅茧蜂Maculibracon simlaensis(Cameron,1899);长尾纹腹茧蜂Shelfordia longicaudata van Achterberg,1993;长腹拱腹茧蜂Testudobraconlongicaudis Maet(o),1991;异形副簇毛茧蜂Vipiomorphaypsilon Tobias,1962;腹沟马尾茧蜂Euurobracon triplagiata(Cameron,1961)。
  新异名:环江奇翅茧蜂Aphrastobracon huanjianginensis Wang,Chen et He,2003和光奇翅茧蜂Aphrastobracon politus Wang,Chen et He,2003为黑胫副奇翅茧蜂Megalommum tibiale(Ashmead,1906)的次异名;黄胸盾茧蜂Aspidobracon flavithorax Wang,Chen et He,2007和龙岩盾茧蜂Aspidobracon longyanensis Wang,Chen et He,2007为诺氏盾茧蜂Aspidobraconnoyesi van Achterberg,1984的次异名;黄体斧茧蜂Dolabraulax flavus Wang,Chen,Wu et He,2010和短脉斧茧蜂Dolabraulax brevivena Wang,Chen,Wu et He,2010为鸡公山斧茧蜂Dolabraulaxjigongshanus Wang,Chen,Wu et He,2010的次异名;黄褐拱腹茧蜂Testudobraconflavus Wang,Chen et He,2003、广西拱腹茧蜂Testudobraconguangxinensis Wang,Chen et He,2003和大腹拱腹茧蜂Testudobracon grandiventralis Wang,Chen et He,2003为小拱腹茧蜂Testudobracon pleuralis(Ashmead,1906)的次异名;中华三刺茧蜂Tripinaria chinensis Wang,Chen et He,2003为斑腹三刺茧蜂Trispinaria maculata van Achterberg,1991的次异名。
  新组合(已发表):斑翅深沟茧蜂Iphiaulaxzebripterae(Wang et Chen,2008)。
[博士论文] 刘强
遗传学 东北林业大学 2017(学位年度)
摘要:果蝇与哺乳动物不同,其只具备先天形成的免疫系统。肠道免疫作为果蝇天然免疫系统的重要组成部分已成为研究的重要课题。果蝇肠道免疫分为三个方面:首先,病原体刺激肠道后会引起肠道内活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)产生;其次,当ROS无法有效清除病原体时,肠道会启动免疫缺陷信号转导途径(Imd pathway)分泌抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs);最后,肠道干细胞(intestinal stem cells,ISCs)不断增殖和分化以维持肠道内稳态。目前,果蝇肠道干细胞的增殖与分化信号转导途径研究的较为透彻,但锌指蛋白在果蝇肠道内稳态中的功能仍不十分清楚。
  锌指结构域(zinc-finger domain)是普遍存在于DNA结合蛋白中的结构基元,其形成的结构像手指。大部分锌指蛋白是基因表达的调控者。CG12744基因含有一个C2H2类型的锌指结构域,其在果蝇基因组的定位为:2R:5762786...5763747。研究发现CG12744基因的产物具有结合金属离子及核酸分子的功能和抗真菌作用。此前研究发现锌指蛋白Charlatan(Chn)维持果蝇肠道内稳态,但CG12744基因在果蝇肠道免疫中的功能仍不清楚。因此,猜测该基因可能在调控肠道干细胞增殖与分化过程中发挥一定功能。
  本研究主要以野生型果蝇w1118(WT)和CG12744基因低表达突变体果蝇为实验材料,利用革兰氏阴性菌Erwinia carotovora carotovora15(Ecc15)刺激果蝇肠道,主要通过免疫染色方法对果蝇生存率,肠道干细胞增殖与分化活性,肠道分泌肽的表达和脂肪合成等方面进行了研究,所得到的研究结论如下:
  1.生存率
  CG12744低表达突变体果蝇在喂食Ecc15后具有更高敏感性,该基因促使果蝇对Ecc15感染具有一定抗性,能够维持果蝇正常生存。
  2.前体细胞数量
  Ecc15感染肠道后,CG12744在前体细胞表达控制enteroblast(EB)细胞数量。与对照组比较,esgts Gal4>CG12744RNAi果蝇EB细胞数量减少60%,但肠道干细胞数量无显著差异。无病原体感染时EB细胞数量无明显差异。CG12744对铜细胞区域内的前体细胞数量无影响。
  3.分化
  (1)肠道细胞分化结果表明esgtsGal4>CG12744RNAi果蝇感染Ecc15后,enterocyte(EC)细胞分化存在明显缺陷。与对照组比较,EC细胞数量减少70%。
  (2)CG12744基因与Notch信号无直接关系,但控制EC细胞内osa基因表达进而控制其分化。
  (3)Ecc15感染后,与对照组比较esgtsGal4>CG12744RNAi果蝇肠道JNK信号活性显著降低。
  (4)喂食Ecc15后,CG12744在EB细胞表达控制enteroendocrine cell(EE)数量。与对照组比较,Su(H)Gal4>CG12744RNAi果蝇EE数量增加了200%。
  4.表皮结构
  肠道形态分析显示CG12744在EC细胞表达维持了肠道细胞的形态和完整性。与对照组比较,NP1Gal4>CG12744RNAi果蝇在病原体感染后肠道细胞形态发生异常,肠道细胞排列混乱,前体细胞细胞膜armadillo活性减弱,细胞核明显增大。
  5.干细胞活性
  感染条件下,CG12744在EE表达控制肠道干细胞增殖活性。与对照组比较,voilaGal4>CG12744RNAi果蝇肠道干细胞增殖活性明显增强。
  6.脂肪合成
  Su(H)Gal4>CG12744RNAi果蝇EE数量的增多引起肠道速激肽(tachykinin,TK)水平升高,进而导致肠道脂肪合成能力下降。
  总而言之,当果蝇肠道遭受病原体Ecc15感染后,CG12744基因影响EB细胞数量和EC细胞及EE分化,维持肠道细胞形态的完整性;同时该基因对肠道速激肽的分泌和脂肪的合成具有一定功能。本研究为揭示果蝇以及哺乳动物肠道干细胞增殖与分化机制提供了必要的科学理论依据。
[博士论文] 潘志祥
生态学;分子生态学 南京师范大学 2017(学位年度)
摘要:日本蚱Tetrix japonica,隶属于昆虫纲Insecta直翅目Orthoptera蚱科Tetrigidae,是一种东亚广布的小型侏儒蚱,主要生活在溪边、路边和农田等有一定人为干扰的环境。日本蚱分布很广,但有关它的研究却不多,特别是其种群间的形态变异、种群结构及种群历史等鲜有报道。本论文采集了中国32个地理种群的日本蚱共739个个体(428个雌性和311个雄性),采用传统形态测量学、几何形态测量学、分子生物学和统计学相结合的方法对日本蚱的形态变异、形态与环境因子之间的关系、遗传多样性、种群历史及谱系生物地理学等方面进行了较为系统的研究,结果如下:
  在传统形态测量学研究中,测量了日本蚱体长(BL)、前胸背板长(PL)、前胸背板宽(PW)、后足腿节长(HFL)、前翅长(FW1)、前翅可见部分长(FW2)、前翅可见部分宽(FW3)和后翅长(HWL)共8个形态特征的线性特征值,同时,从DIVA-GIS中提取了每个种群的18个生物气候因子,对其进行描述性统计、相关分析、主成分分析、聚类分析、回归分析以及两两种群间的形态结构欧氏距离与地理距离之间的Mantel test。结果显示:1)日本蚱存在明显的性二型现象,雌性个体明显大于雄性;2)8个线性形态特征值两两之间均存在显著的正相关,且在32个地理种群之间存在显著差异;雌性变异最大的特征是FW2,达到10.14%,而雄性变异最大的则是HWL,达11.71%;雌性和雄性变异最小的特征均为HFL,分别为6.96%和7.05%;3)雌雄两性的8个线性特征值均提取了3个主成分(MPC),分别代表体长大小(MPC1)、前翅大小(MPC2)和后翅大小(MPC3),3个主成分累加解释雌雄总体方差的82.151%和85.148%;18个生物气候因子提取4个主成分(CPC),分别代表最低气温(CPC1)、最少降水量(CPC2)、最高气气温(CPC3)和最大降水量主成分(CPC4),解释总体方差的96.126%;4)线性形态特征主成分AHC聚类结果显示,雌雄日本蚱均聚为4类,未按分布形成明显的种群地理结构,其中ZJDC种群在两性中均为单独一类;5)日本蚱形态特征主成分与生物气候因子主成分之间的回归分析显示,雌性日本蚱身体大小与最低气温和最少降水量呈负相关,而雄性个体大小仅与最少降水量呈负相关,前翅大小仅与最大降水量呈正相关;6)雌雄的BL、PL和PW与纬度呈正相关,因此,体长和前胸背板大小随纬度的升高而增大,其身体大小符合贝格曼法则;7)Mantel test分析结果显示,雌性日本蚱的形态特征变异的欧氏距离与地理距离之间存在显著正相关(p<0.001),相关系数较小,而雄性则无显著相关(p=0.496)。
  在几何形态测量学研究中,分别提取了日本蚱前胸背板背面(DP)、前胸背板侧片(LP)、前翅(FW)、后翅(Hw)和后足腿节(HF)这5个形态结构的46,16,55,21,45个标志点或者半标志点信息,采用XTSTAT2015、SPSS、MorphJ和PAST软件对数据进行聚类分析、形变分析和形态与生物气候因子的回归分析。结果显示:1)传统形态测量学和几何形态测量学揭示了一致的日本蚱种群结构;2)总体来看,基于5个形态特征的聚类结果均揭示日本蚱地理种群的混杂现象,种群未按地理分布形成明显的空间格局;3)浙江大陈岛种群(ZJDC)的前胸背板形态特化明显;基于前胸背板形态的聚类分析中,该种群均能单独聚为一类;4)形变分析显示,前胸背板(包括DP和LP)在种群之间分化明显,而FW、HW和HF分化不明显;5)前胸背板平均几何形态主成分与生物气候因子主成分的回归分析显示,雌性日本蚱的PC1_DP与CPC2存在显著的正相关,PC2LP与CPC1和CPC2之间存在显著正相关;雄性的前胸背板主成分与生物气候因子主成分之间没有显著相关性;6)Mantel test结果显示,除前翅以外,雌雄日本蚱种群间的形态分化欧氏距离与地理距离之间均存在显著正相关。
  在分子生物学分析中,共获得日本蚱mtDNA COI序列(676bp)496条,ITS序列(483bp)463条和EF-1α序列(889bp)402条,并对序列进行了遗传多样性分析、中性检验、系统发生与种群历史分析,结果显示:1)日本蚱具有较高的遗传多样性,COI,ITS和EF-1α的总体平均单倍型多样性(Hd)、核苷酸多样性(π)和序列多样性(k)分别为0.9858,0.03和20.303;0.9797,0.039和17.456;0.9892,0.01和9.649;2)中性检验与歧点分析显示,COI的曲线明显呈光滑的单峰,总的Tajima's D和Fu'sFs为显著负值(-1.77和-34.14),SSD和Raggedness为显著的较小值(0.001和0.001),因此,COI序列支持日本蚱种群经历过快速扩张的历史;ITS和EF-1α序列也支持种群在历史上经历快速扩张的可能性很大;3)基于COI序列的种群历史动态分析结果显示,日本蚱在0.18Ma(95%CI:0.155-0.207Ma)开始种群快速扩张,到0.05Ma(95%CI:0.053-0.072Ma)种群大小趋于稳定,即在古乡冰期的MIS6阶段开始了种群快速扩张;4)AMOVA分析结果显示,COI和ITS序列61%遗传变异来自种群内部,而EF-1α序列种群间变异略大于种群内;5)日本蚱COI,ITS和EF-1α三个基因在不同种群之间的最小和最大种群遗传分化系数(FST)分别为0.0001(ZJZJ/GXLS)和0.803(ZJDC/AHGNJ),0.0041(GSTS/JXJGS)和0.891(HLJ/SCDJY),0.031(SXHP/SXTB)和0.942(HBBD/HNAH),Mantel test显示种群间遗传分化和基因流与地理距离之间无显著相关;6)单倍型系统发生(NJ,ML和Bayesian)与网络图显示,日本蚱单倍型没有按地理分布形成明显的空间格局;同一种群的单倍型散布在不同的分支中,即使有小的分支其节点的支持度也很低;7)日本蚱中国种群的最近共祖时间(TMRCA)为3.65Ma(95%CI:1.91-6.29Ma)。
  综上所述,日本蚱体长存在明显的性二型现象,雌性个体大于雄性;个体大小分布符合贝格曼法则;种群间的形态分化主要发生在前胸背板,岛屿种群(ZJDC)分化明显;最低气温和最少降水量对日本蚱的形态有显著影响;传统形态测量学、几何形态测量学和分子序列均支持日本蚱中国种群无明显的地理种群结构,同时,3个基因均支持日本蚱的多地快速扩张;COI序列分析揭示日本蚱在0.18Ma(95%CI:0.155-0.207Ma)开始种群快速扩张;中国日本蚱的最近共祖时间为3.65Ma(95%CI:1.91-6.29Ma);结合日本蚱的生物学特性,推测被动扩散对日本蚱的种群结构影响较大。
[硕士论文] 李玉娟
免疫学 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:将黑腹果蝇肠道中的醋酸杆菌分离出,并研究醋酸杆菌对果蝇宿主的促生长发育的作用。
  方法:利用醋酸杆菌选择性培养基分离果蝇肠道醋酸杆菌;通过革兰氏染色和16S rRNA基因比对鉴定菌种;观察东方醋酸杆菌12小时内利用4种碳源情况,检测该菌株体外发酵特性;涂板计数不同生长周期果蝇肠道的菌落数,检测该菌的定植情况;将果蝇随机分为混合菌、无菌、单株菌果蝇三个组别,通过计数蛹和成虫出现的平均时间,检测该菌对果蝇发育作用;通过观察果蝇产卵后0天至蛹形成时的体表面积变化,检测果蝇的生长速率;解剖以上三种组别的果蝇成虫解剖肠道后,用PH3染色方法计数肠细胞分裂增殖数。提取以上三种组别的果蝇RNA,做RT- PCR,检测该菌对果蝇体内激素的影响。
  结果:⑴该菌株经鉴定为东方醋酸杆菌,属于醋酸杆菌属,革兰氏阴性杆菌。⑵东方醋酸杆菌12 h生长OD值高达1.25,pH降低至3.8。⑶东方醋酸杆菌在果蝇不同的生长阶段的肠道定植数量达104、105。世代传递结果发现东方醋酸杆菌可在子代果蝇肠道定植数量达103。⑷东方醋酸杆菌组在2%酵母丰富培养基条件下,蛹和成虫羽化时间分别为6.2 d和10.1 d和CR组比较无统计学意义(P>0.05);与GF(7.8 d和12.1 d)相比差别有统计学意义(P<0.05),在营养条件匮乏情况下,东方醋酸杆菌组果蝇蛹和成虫羽化时间分别为9 d和13.3 d,和CR果蝇相比无统计学意义(P>0.05);与GF组(7.8 d和22 d)相比差别有统计学意义(P<0.001),东方醋酸杆菌组显著地缩短果蝇发育历期,甚至可以代替CR组的作用。东方醋酸杆菌组较无菌组比明显增加果蝇的生长速率,并且与CR组结果类似。⑸PH3染色实验发现东方醋酸杆菌组较无菌组促进果蝇肠道细胞分裂增殖,尤其在最长的中肠间差异有统计学意义(P<0.001),并增加肠道细胞分裂增殖数量,数量甚至高于CR组,与CR组比较有统计学意义(P<0.05)。⑹东方醋酸杆菌组较GF组使果蝇促前胸腺激素分泌的时间较早,分泌的量较高,两组分泌量的高峰值比较有统计学意义(P<0.01),与CR组比较其表达时间类似。⑺东方醋酸杆菌组较GF组的胰岛素水平表达时间早、表达量高差异有统计学意义(P<0.001),并且与CR组结果类似(P>0.05)。
  结论:从果蝇肠道分离出一株东方醋酸杆菌,东方醋酸杆菌是果蝇一种益生菌、共生菌。东方醋酸杆菌在组织学水平增加果蝇的生长速率和缩短发育历期并在细胞学水平促进肠细胞分裂增殖,同时在体内激素水平也可激活胰岛素信号通路,维持机体稳定的血糖水平及促进果蝇关键生理期(幼虫期至蛹期)蜕变,从而促进果蝇生长发育。
[硕士论文] 王清春
农业昆虫与害虫防治 山东农业大学 2017(学位年度)
摘要:本论文以浮萍为主要原料,制备黄粉虫人工饲料,建立浮萍-黄粉虫生物链关系。通过研究黄粉虫取食浮萍的各种最适生物学条件、幼虫肠道细菌组成变化以及虫体资源成分的变化,为利用黄粉虫转化处理浮萍提供科学依据,开拓浮萍利用新途径,探索富营养有机污水治理的生物系统技术。主要研究结果如下:
  1、黄粉虫人工饲料的研究。人工饲料配方设计,通过比较不同比例的浮萍饲料对黄粉虫幼虫的影响,结果:―50%浮萍:50%麦麸‖饲喂的黄粉虫幼虫的饲料利用率、生物量增长率、饲料转化率都高于其他处理组,幼虫的死亡率最低,为最佳浮萍基人工饲料。
  2、不同含水量的人工饲料对黄粉虫幼虫的影响。通过比较不同含水量的浮萍饲料对黄粉虫幼虫的影响,可知当浮萍基人工饲料的含水量保持为18%时,幼虫的生物量增长率、饲料利用率均最高,幼虫死亡率最低,是浮萍基人工饲料的最佳湿度范围。
  3、人工饲料条件下不同密度的黄粉虫幼虫生长情况比较。通过比较在不同虫体密度下黄粉虫取食浮萍饲料的情况,可知:当虫体密度为0.56头/cm3-1.12头/cm3时,幼虫的生物量增长率最高,保持在39.90%-39.73%范围内。伴随群体密度的增加,幼虫生物量增长率逐渐下降,当幼虫密度为3.36头/cm3时,幼虫的生物量增长率降至4.25%。同时,幼虫的饲料利用率也表现出和生物量增率大体相同的趋势,所以,本试验认为虫体最佳密度为1.12头/cm3。
  4、通过研究用浮萍代替豆饼作为黄粉虫成虫的饲料蛋白源,可知:相比于豆饼,用浮萍作为黄粉虫成虫的饲料蛋白源,可使黄粉虫成虫的平均寿命延长5d,单雌产卵量增加124粒,产卵天数延长约7d。
  5、通过比较取食浮萍饲料和纯麦麸饲料的黄粉虫幼虫虫体资源成分组成及含量可知:取食浮萍饲料的幼虫虫体中:蛋白质含量为61.7%、粗脂肪含量9.7%、粗纤维含量为10.8%、含灰9.3%;取食纯麦麸饲料的黄粉虫幼虫体中:蛋白质占52.6%、粗脂肪占29.9%、粗纤维占4.6%、灰分占3.5%。此外,两种饲料饲喂的幼虫体内的氨基酸种类都较为丰富,均有17种。必需氨基酸和非必需氨基酸的比值(EAA/NEAA),分别是浮萍组69.21%纯麦麸组69.25%,都大于标准60%;必需氨基酸与总氨基酸的比值,分别是浮萍饲料组32.32%、纯麦麸组40.90%,均在40%左右。
  6、黄粉虫肠道细菌的研究。分别比较取食浮萍饲料和纯麦麸饲料的黄粉虫幼虫肠道可培养细菌的种类和数量,可得知:以纯麦麸为饲料的黄粉虫幼虫肠道菌群种类相对单一,优势菌为芽孢杆菌属和短波单胞菌属,而取食浮萍饲料的幼虫肠道细菌种类有所增加,不仅包括芽孢杆菌属、短波单胞属,同时含有沙雷氏菌属、金黄杆菌属、埃希氏杆菌属。为今后进一步研究黄粉虫利用浮萍的内在机制提供参考。
[硕士论文] 王宁
昆虫生态学 沈阳师范大学 2017(学位年度)
摘要:本论文以大豆上茄粗额蚜为研究对象,在不同密度和不同时间条件下茄粗额蚜对大豆叶片危害性的影响,在不同品种大豆上取食行为EPG的分析,不同温度、光周期(L:D)和不同品种大豆对茄粗额蚜生长发育和繁殖的影响等进行研究,为该蚜虫的发生规律和防治提供了理论依据。主要研究结果如下:
  1.茄粗额蚜在不同密度(1、3、5头/叶)和不同时间(第1、3、5天)条件下,其受害叶面积(黄斑)随虫口密度和时间的增加而增大;被害叶片的叶绿素含量随时间的增加而减少,健康叶片则增加;被害叶片的丙二醛含量,随时间增加而增加,健康叶片无显著变化。
  2.在丹豆14,辽豆27和铁丰29三个大豆品种上对茄粗额蚜取食行为的EPG分析表明,连续6小时的监测,蚜虫取食可产生7种波形,即np,A,B,C, Pd,E,F波。蚜虫在辽豆27需要花费更多时间来寻找合适的取食位点。口针刺入辽豆27筛管时需要分泌大量的唾液,才能保证口针的畅通刺吸。在丹豆14韧皮部取食时间最长。口针刺探辽豆27阻力最大。三个品种中丹豆14更有利于蚜虫在筛管中吸取光合产物,而辽豆27则取食不利,表现具有一定的抗蚜性。
  3.温度对茄粗额蚜生长发育和繁殖影响显著。室内变温条件下,日平均温度为26.2℃,平均湿度为52.4%,茄粗额蚜完成一个世代历期为6.88天,产仔总量38.90头,平均寿命为18.67天。不同恒温对茄粗额蚜1~4龄和世代历期均有极显著影响,温度越高发育速率越快,发育历期缩短,15℃世代发育历期最长,27℃最短;寿命随着温度升高缩短,15℃寿命最长,27℃最短;繁殖量随温度升高先增加后减少,21℃繁殖量最大。
  组建了不同恒温茄粗额蚜繁殖生命表,分析表明该蚜虫21℃时净增值率最大;平均世代历期和种群加倍时间随温度的升高而缩短,27℃种群加倍时间最短。内禀增长率和周限增长率随温度的升高而增大。
  4.光周期对茄粗额蚜的发育历期、发育速率、寿命、产仔期和产仔数量有一定影响。不同光周期对世代历期影响不同,14h:10h和10h:14h发育历期较长,8h:16h和16h:8h较短;对单雌产仔总量影响显著,16h:8h时最大,12h:12h最小;对蚜虫寿命影响明显,14h:10h时寿命最长。光周期为12h:12h不适其生长发育和繁殖。
  5.不同品种对茄粗额蚜的发育历期影响有一定差异,对寿命、产仔期和产仔数量影响显著。用丹豆14饲养单雌产仔总量最大,辽豆27最小;丹豆14饲养寿命最长,辽豆27饲养最短;表明丹豆14饲养对茄粗额蚜生长发育更有利。
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