绑定机构
扫描成功 请在APP上操作
打开万方数据APP,点击右上角"扫一扫",扫描二维码即可将您登录的个人账号与机构账号绑定,绑定后您可在APP上享有机构权限,如需更换机构账号,可到个人中心解绑。
欢迎的朋友
万方知识发现服务平台
获取范围
  • 1 / 100
  (已选择0条) 清除 结果分析
找到 4739 条结果
[硕士论文] 谢腾飞
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:牙髓根尖周病是一类主要因细菌感染引起的、发生于牙髓及根尖周围组织的炎症性疾病,发病率高,是口腔常见病、多发病,也是导致牙痛的主要原因之一。目前认为,根管治疗术是治疗该类疾病最根本、也是最有效的治疗方法。根管治疗术成功的影响因素很多,而根管遗漏通常是RCT(Root Canal Therapy,根管治疗术)失败的主要原因之一。恒牙根管系统的变异性和复杂性是导致根管遗漏的重要因素。在过去的几十年里,牙体牙髓专业取得了很多革命性突破:如DOM(Dental Operating Microscope,牙科手术显微镜)的推广、超声仪器在根管治疗中的使用、CBCT(Cone-Beam Computed Tomography,锥形束CT)的应用等。由于这些革命性的进步,根管治疗的长期成功率大大提高,根管治疗的结果更可预期[1]。本文通过报告几例变异根管的治疗过程,旨在探讨CBCT结合显微超声技术下的根管治疗及其操作要点,并对治疗疗效做出初步评价,积累临床经验。
[硕士论文] 吴筱昀
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  生活中发现,长期饮茶者其牙齿表面容易沉积色素。我们从中得到启发:茶叶中的某些物质在牙面有一定的附着能力。本课题在前期研究已证明:相比于绿茶、白茶和乌龙茶,红茶在年轻恒牙窝沟处的色素粘附量达到最大,并且随着红茶浓度的增加,窝沟处色素的粘附量也随之增加。本实验通过茶色素能在年轻恒牙窝沟中粘附而达到龋病的预防,进一步探讨茶色素作为龋病预防措施的可行性。
  方法:
  1.茶色素抑制变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)和粘性放线菌(Actinomyces viscosus,A.viscosus)生长产酸的体外实验:将S.mutans和A.viscosus分别接种于茶色素浓度为0.1875g/L、0.375g/L、0.75g/L、1.5g/L、3g/L、6g/L、12g/L、24g/L的BHI-茶色素混合液(实验组)、0.3125g/L的NaF溶液(阳性对照组)以及不含茶色素的BHI溶液(阴性对照组)中37℃厌氧(80%N2、10%CO2、10%H2)培养12h。将对照组和实验组培养12h的S.mutans和A.viscosus菌液通过稀释平板计数法计算菌落形成单位(Colony Forming Units,CFU),继续培养12h后测定实验组和对照组上清液的pH值。
  2.不同干燥时间下茶色素粘度的改变:通过65℃恒温干燥箱(茶色素烤焦温度>65℃)来改变其粘稠度。每干燥1d的茶色素溶液设定为1个实验组(有1d-19d即第1-第19个实验组),对照组为茶色素原溶液。利用NDJ-1S数字粘度计测定每组茶色素粘度,探究其粘度与干燥时间的关系。
  3.将消毒处理过的102颗离体牙随机分到不同粘稠度的茶色素组中,通过渗透实验,观察茶色素进入窝沟的深度,计算渗透率,并用扫描电镜(Environmental Scanning Electron Microscope ESEM)观察不同粘度的茶色素在窝沟中的粘附情况。
  结果:
  1.1)S.mutans组和A.viscosus组菌落计数值经方差分析,各组间数值差异有统计学意义;各实验组CFU值均小于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);S.mutans组中(0.1875g/L T、0.375g/L T、0.75g/L T)组CFU值大于(3g/L T、6g/L T、12g/L T、24g/L T)组,差异有统计学意义(P<0.05);A.viscosus组中(0.3125g/L NaF、0.1875g/L T、0.375g/L T、0.75g/L T)组CFU值大于(1.5g/L T、3g/LT、6g/LT、12g/LT、24g/LT)组,差异有统计学意义(P<0.05)。2)S.mutans和A.viscosus组中,两组培养基上清液的pH值随茶色素浓度的增加而升高(P<0.05)。S.mutans组中,培养基上清液pH值在茶色素浓度为6g/L时候达到最大;A.viscosus组中,培养基上清液pH值在茶色素浓度为3g/L时候达到最大,两组与对照组差异显著均有统计学意义(P<0.05)。
  2.随着干燥时间的增加,茶色素的粘度有增高趋势,当干燥时间为11d时,茶色素粘度达最大值,随后粘度下降并逐渐趋于稳定。Pearson相关性分析显示,时间和粘度的相关系数为0.692,(0.3<0.692<0.8),两者呈中度相关性,对应的显著性(P<0.05),差异显著,有统计学意义。
  3.干燥时间为4-7d的实验组渗透率与对照组差异不明显,无统计学意义(P>0.05);干燥时间为8-19d的实验组渗透率均高于对照组(P<0.05)。干燥时间为9d、10d、11d三个实验组渗透率与粘度呈正相关,组间差异有统计学意义(P<0.05)。
  结论:
  茶色素对S.mutans和A.viscosus生长和产酸均有抑制作用,当茶色素浓度为12g/L,粘度为1.86667mPa·s时,其在年轻恒牙窝沟中的渗透率较高,粘附效果较好。
[硕士论文] 蓝春华
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:构建体外人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)炎症模型,研究姜黄素对该模型hDPCs炎症相关细胞因子mRNA表达水平及成骨分化的影响.
  方法:1、CCK8法检测不同浓度大肠杆菌来源的LPS(Escherichia coli lipopolysaccharide,E.coli LPS)对hDPCs的细胞毒性作用.2、实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative polymerase chainreaction,Real-time PCR)检测不同浓度E.coliLPS刺激hDPCs3、6、12、24h后炎症相关因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及COX-2的mRNA表达水平,ELISA检测E.coli LPS刺激hDPCs其IL-6的蛋白表达水平,从而筛选构建体外hDPCs炎症环境最适宜的E.coli LPS浓度及相应刺激时间.3、CCK8法检测不同浓度姜黄素作用hDPCs24、48h后细胞活力值.4、Real-time PCR检测姜黄素对炎症环境下hDPCsIL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及COX-2的表达调控作用,并检测不同浓度姜黄素与LPS组合后,hDPCs NLRP3的mRNA表达水平.5、成骨诱导培养7、14天,通过碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色及ALP活性实验检测姜黄素对LPS刺激的hDPCs ALP活性表达水平.
  结果:1、CCK8实验可见1,5,10μg/ml E.coli LPS刺激组与对照组相比,hDPCs细胞活力值均无显著差异(p>0.05).2、1μg/ml E.coli LPS刺激hDPCs3h,可见IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及COX-2的mRNA表达水平上调(p<0.05).且IL-1β、TNF-α、IL-6及IL-8的mRNA表达量在第3h达到高峰.此外,ELISA结果亦可见1μg/ml E.coli LPS刺激组IL-6的蛋白表达含量增加(p<0.05).3、0.5,1,5μmol/L姜黄素组分别与对照组相比,48h内hDPCs活力值均无明显差异(p>0.05),10μmol/L姜黄素组hDPCs活力降低(p<0.05).4、Real-time PCR结果可见,与单独1μg/ml LPS刺激组相比,0.5μmol/L姜黄素+LPS刺激组hDPCs TNF-α表达下调(p<0.05);1μmol/L姜黄素+LPS刺激组hDPCs IL-1β、TNF-α及COX-2表达下调(p<0.05);5μmol/L姜黄素+LPS刺激组hDPCsIL-1β、TNF-α及IL-6表达下调(p<0.05);而0.5,1或5μmol/L姜黄素+LPS刺激组hDPCs IL-8的mRNA表达水平均未有显著改变(p>0.05).5、Real-time PCR结果可见,5μmol/L姜黄素+LPS刺激组hDPCsNLRP3基因表达下调(p<0.05).6、ALP染色及ALP活性实验可见,连续培养7天,单独LPS成骨诱导组与无LPS成骨诱导组相比,hDPCs ALP活性未见明显差异(p>0.05).0.5,1μmol/L姜黄素+LPS成骨诱导组与单独LPS成骨诱导组相比,hDPCs ALP活性均无显著差异(p>0.05);连续培养14天后,单独LPS成骨诱导组hDPCs ALP活性表达降低(p<0.05).1μmol/L姜黄素+LPS成骨诱导组与单独LPS成骨诱导组相比,hDPCs ALP活性表达上调(p<0.05).
  结论:通过1μg/ml E.coli LPS刺激hDPCs3h,可成功构建体外hDPCs炎症模型.0.5~5μmol/L姜黄素抑制炎症环境下hDPCs多种炎症细胞因子基因的表达,发挥一定抗炎作用.1μmol/L姜黄素可能通过抑制hDPCs炎症因子的表达从而改善其ALP活性表达水平,有利于其成骨或成牙本质向分化.
[硕士论文] 黄志超
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:运用根管治疗术、活髓切断术、根尖外科手术对牙髓根尖周病进行治疗,观察其临床疗效。
  方法:选择2016年9月~2018年3月在福建医科大学附属协和医院口腔内科就诊患者,对其进行临床相关检查,作出临床诊断,根据患者病情制定合适的治疗方案。选取其中4个典型病例进行展示,其中一例行活髓切断术;两例行根管治疗术;一例行根尖外科手术。治疗完成后,对患者进行定期随访以评估临床疗效。
  结果:4例典型病例中,1例上颌第一磨牙6根管;1例上颌第二磨牙融合根4根管;1例下颌第一磨牙牙髓炎行活髓切断术;1例上颌侧切牙根尖周囊肿行根尖手术。所有病例均顺利完成治疗,病例短期追踪随访,疗效满意。
  结论:根管治疗术、活髓切断术、根尖外科手术能够有效治疗牙髓根尖周病,达到保存活髓或保存患牙的目的。适当的使用CBCT和配合显微镜能提高其治疗水平。
[硕士论文] 李群
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  观察骨膜蛋白(Periostin、PN或OSF-2)在口腔白斑和鳞状细胞癌患者组织及血清中的表达,分析其在口腔鳞癌发生发展过程中的作用,为监测口腔癌前病变白斑及鳞状细胞癌的发生、发展及预后等提供参考指标。
  方法:
  第一部分:(1)选择门诊和住院患者,收集40例口腔白斑和45例口腔鳞癌组织的石蜡切片,并以30例口腔正常黏膜作为对照,进行骨膜蛋白免疫组织化学染色(IHC)从蛋白的水平对骨膜蛋白的表达部位以及表达量进行检测,同时分析其表达与临床病理因素的相关性;(2)收集25例口腔白斑和45例口腔鳞癌新鲜组织,以30例口腔正常黏膜作为对照,进行实时荧光定量-聚合酶链式反应(Q-PCR),观察骨膜蛋白mRNA水平的表达。
  第二部分:(1)选择门诊和住院患者,收集25例口腔白斑和45例口腔鳞癌患者血清,并以30例健康人群作为对照,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中骨膜蛋白的浓度;(2)对口腔鳞癌患者中骨膜蛋白的表达与患者的年龄、性别、TNM分期、分化程度、浸润深度以及淋巴结有无转移进行相关性分析。
  结果:
  第一部分:(1)骨膜蛋白免疫组织化学染色显示,正常口腔黏膜、单纯增生白斑、异常增生白斑和口腔鳞癌组组织骨膜蛋白阳性细胞面积指数和积分光密度值(integrated optical density,IOD)分别为(2.51±1.30/15.41±1.63)、(2.70±1.26/15.66±1.17)、(14.23±0.42/33.13±1.07)、(33.47±1.77/51.29±2.67),口腔正常黏膜组、单纯增生白斑组、异常增生白斑组和口腔鳞状细胞癌组中骨膜蛋白的阳性细胞面积指数和IOD值逐步升高,除单纯增生白斑组与正常口腔黏膜组无统计学意义外,其余各组间均有统计学意义(P<0.05)。在口腔鳞癌组织中骨膜蛋白的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期以及有无淋巴结转移有关(P<0.05)。(2)三组组织中均有骨膜蛋白mRNA的表达,正常口腔黏膜、异常增生白斑和口腔鳞癌组组织骨膜蛋白mRNA分别为0.326074±0.412194、0.751156±0.250896、1.37044±0.500052,与正常口腔黏膜组织相比,口腔白斑、口腔鳞癌组织中骨膜蛋白mRNA升高,表达水平亦有统计学差异(P<0.05);(3)免疫组化实验方法和荧光定量PCR方法对骨膜蛋白检测结果一致性较好(Kappa=0.932>0.81)。
  第二部分:(1)通过酶联免疫吸附试验测得健康人群血清中骨膜蛋白的浓度为20.64±5.3ng/ml、异常白斑患者血清中骨膜蛋白的浓度为54.23±3.8ng/ml,口腔鳞癌患者血清中骨膜蛋白的浓度为81.06±10.1ng/ml。口腔白斑和鳞癌患者血清中骨膜蛋白的表达水平显著高于健康人群(P<0.05);(2)将鳞癌患者的基本临床信息与血清中骨膜蛋白的表达水平进行相关性分析,发现鳞癌患者肿瘤的TNM分期、侵袭浸润深度以及有无淋巴结转移等因素影响着血清中骨膜蛋白的表达(P<0.05)。
  结论:
  1.mRNA基因和蛋白水平均证明骨膜蛋白从正常口腔黏膜发展为口腔白斑最后恶变成鳞癌的过程中表达逐渐增强,提示骨膜蛋白参与口腔黏膜癌变的发生发展。
  2.通过对免疫组化法与荧光定量PCR法相关性进行分析发现两者具有一致性,可以采用免疫组化这种相对简便且低廉的方法对骨膜蛋白基因的表达变化进行初步检测。
  3.血清中骨膜蛋白的表达水平可作为监测口腔黏膜白斑向口腔鳞状细胞癌发展的参考指标,同时也可为口腔鳞癌侵袭以及预后提供判断依据。
[硕士论文] 诸葛继娜
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  研究赤藓糖醇对牙周致病菌牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、伴放线聚集杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans,Aa)和粘性放线菌(Actinomyces viscosus,Av)生长及粘附功能方面的影响;同时探索不同浓度赤藓糖醇作用后的致病菌对牙周膜细胞炎症相关细胞因子mRNA表达水平的影响.
  方法:
  1.将Pg、Aa、Av三种致病菌接种于2、4、8、16、32、64、128g/L的赤藓糖醇-BHI液、及不含赤藓糖醇的BHI液中,37℃厌氧(80%N2、10%CO2、10%H2)培养一定时间,液体清亮无浑浊、沉淀生长的最低赤藓糖醇浓度为最低抑菌浓度.
  2.将实验溶液按赤藓糖醇质量浓度递增的顺序从左至右依次加到96孔板,接种Pg、Aa和Av,37℃厌氧(80%N2、10%CO2、10%H2)条件下培养一定时间,去上清,生物膜用甲醇固定后经结晶紫染色,乙酸置换生物膜中的结晶紫,酶标仪测置换液的OD值.
  3.将Pg、Aa、Av分别接种于MIC、1/2、1/4、1/8MIC这4个赤藓糖醇质量浓度的培养基以及不含赤藓糖醇的培养基,37℃厌氧(80%N2、10%CO2、10%H2)培养至对数期.将各浓度组的每种细菌分别离心并清洗后加入细胞DMEM培养基重悬,与培养至第4代的人牙周膜细胞共培养24h,设不含细菌的空白对照组,去上清,裂解细胞提取总RNA,逆转录,实时荧光定量PCR测IL-1β,IL-6,TNF-α的mRNA相对表达量.
  结果:
  1.以下为赤藓糖醇对三种细菌的最低抑菌浓度:
  牙龈卟啉单胞菌:64g/L
  伴放线聚集杆菌:128g/L
  粘性放线菌:128g/L
  2.赤藓糖醇对Pg、Aa、Av粘附功能影响的分析
  赤藓糖醇可影响Pg的粘附功能,且粘附能力与赤藓糖醇质量浓度有关.当赤藓糖醇质量浓度较低时(≤4g/L),各浓度组与对照组之间OD值相似;随着赤藓糖醇质量浓度的增加(≥8g/L),Pg OD值有所降低,且质量浓度越高的实验组,OD值越低;当质量浓度达到128g/L时,肉眼观察无生物膜形成,此时即使增加赤藓糖醇浓度也不会有更强抑制能力.
  赤藓糖醇对Aa、Av的作用效果与Pg相类似,但需要更高浓度的赤藓糖醇才能产生抑制效果.赤藓糖醇质量浓度为0g/L、2g/L、4g/L和8g/L这四个浓度时,细菌Aa、Av OD值无明显差别;随着赤藓糖醇质量浓度升高达16g/L以及更高时,细菌所产生的粘附功能有不同程度下降,128g/L时赤藓糖醇对Aa、Av抑制能力最强.综上所述,赤藓糖醇可抑制Aa、Av的粘附功能,且抑制效果呈浓度依赖性.
  3.经赤藓糖醇作用后的Pg、Aa、Av对牙周膜细胞IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA相对表达量影响的分析
  Pg组基因表达情况.不同浓度赤藓糖醇条件下培养的细菌,刺激牙周膜细胞产生IL-1β、IL-6、TNF-α的能力不同.当赤藓糖醇浓度为8g/L时,炎症因子量与不加赤藓糖醇的对照组无明显差别;浓度升高达到16g/L时IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA相对表达量才有所降低,且浓度越高,炎症因子mRNA相对表达量越低;但是,所有实验组炎症因子量始终高于未加细菌的空白对照组.
  Aa组基因表达情况.16g/L的赤藓糖醇浓度未对细菌的致炎性起明显作用,32g/L浓度下培养的Aa致病性开始受影响,诱导产生IL-1β的mRNA表达量下降,且浓度越高,抑制作用越强;64g/L浓度下TNF-α的基因相对表达量开始有显著降低,浓度越高,TNF-α量越低;128g/L赤藓糖醇浓度下Aa刺激牙周膜细胞产生IL-6的mRNA表达量开始下调,且程度较大;所有实验组炎症介质mRNA相对表达量均高于未加细菌的空白对照组.
  Av组基因表达情况.加入赤藓糖醇的实验组中,赤藓糖醇质量浓度在32g/L时已经开始抑制IL-6的mRNA表达量,64g/L时对IL-1β的基因表达量有明显抑制作用,128g/L时才开始对TNF-α的mRNA表达量起作用,且以上均有一个共同趋势,即随赤藓糖醇质量浓度升高,炎症介质mRNA相对表达量不断下降,所有实验组炎症因子mRNA表达量均高于未加细菌的空白对照组.
  结论:
  赤藓糖醇对Pg、Aa和Av的生长及粘附能力均有抑制作用,且在一定范围内,赤藓糖醇质量浓度越高抑制效果越明显;赤藓糖醇还可以通过某种方式对致病菌毒力因子起抑制作用,进而降低细菌的牙周致炎性,减少牙周膜细胞IL-1β,IL-6,TNF-α的mRNA相对表达量.
[硕士论文] 吴丽璇
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  比较不同冲洗液(蒸馏水/EDTA)协同PIPS(Photon induced photoacoustic streaming,光子诱导光声流效应)对根管壁玷污层的去除效果和牙本质显微硬度的影响,并探究不同根管表面微环境对人SCAP(Stem cells of apical papilla,根尖牙乳头干细胞)黏附形态和增殖的影响。
  方法:
  选取144个第三恒磨牙单根管牙根进行标准化预备及固定,将其随机分为6组,每组n=24:(1)NaClO组;(2)NaClO+EDTA组;(3)NaClO+PIPS(dH2O)组;(4)NaClO+PIPS(EDTA)组;(5)NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组;(6)NaClO+EDTA+PIPS(EDTA)组。实验均采用1.5%NaClO和17%EDTA进行根管冲洗,处理后的每组样本再随机分为四部分(每部分6个样本),分别进行以下实验研究:(1)扫描电镜观察根管表面清洁效果;(2)显微硬度计检测根管壁牙本质显微硬度;(3)SCAP与Ⅰ型鼠尾胶原支架混合植入根管培养7d,扫描电镜观察根管表面的细胞形态;(4)化学发光法检测根管内SCAP活细胞数量。
  结果:
  (1)根管表面清洁效果:NaClO组和NaClO+PIPS(dH2O)组牙本质表面覆盖厚而不均质玷污层,未见牙本质小管口开放;NaClO+EDTA组、NaClO+PIPS(EDTA)组和NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组牙本质表面部分覆盖玷污层,较多牙本质小管口开放;NaClO+EDTA+PIPS(EDTA)组牙本质表面未见玷污层覆盖,全部牙本质小管口开放。根管表面清洁度评分:NaClO+PIPS(dH2O)组与NaClO对照组清洁度评分相近,NaClO+PIPS(EDTA)组分数显著低于对照组和NaClO+PIPS(dH2O)组(p<0.05)。NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组与NaClO+EDTA对照组评分接近,NaClO+EDTA+PIPS(EDTA)组评分最低,与NaClO+EDTA对照组和NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组相比,结果均有统计学差异。
  (2)根管壁牙本质显微硬度检测结果:NaClO+PIPS(EDTA)组与NaClO组和NaClO+PIPS(dH2O)组相比,显微硬度值无显著性差异。NaClO+EDTA+PIPS(EDTA)组与NaClO+EDTA组和NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组显微硬度值也无显著差异。
  (3)扫描电镜观察细胞形态:NaClO组和NaClO+PIPS(dH2O)组根管壁表面完全被玷污层覆盖,贴壁生长的细胞呈长梭形,边缘呈钝角状或瘤状。其余各组根管表面清洁度越高,细胞越舒展,呈多边形且有更多细胞质突起。
  (4)细胞活力检测结果:NaClO+PIPS(dH2O)组与NaClO组活细胞数量无明显差别,而NaClO+PIPS(EDTA)组活细胞数量显著高于NaClO组和NaClO+PIPS(dH2O)组(p<0.05)。NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组与NaClO+EDTA组活细胞数量无统计学差异,而NaClO+EDTA+PIPS(EDTA)组活细胞数量最多且显著高于NaClO+EDTA组。
  结论:
  PIPS活化EDTA荡洗40s能有效去除根管玷污层,且对牙本质显微硬度无明显影响,其形成的根管表面微环境还能显著促进SCAP黏附和增殖。
[硕士论文] 吴玉铭
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:体外培养大鼠骨髓基质细胞(rat bone marrow stromal cells,rBMSCs),构建携带人牙骨质蛋白(cementum-protein,CEMP)1基因的慢病毒载体并转染rBMSCs,探讨CEMP1基因修饰对rBMSCs生物学行为的影响。
  方法:1.全骨髓贴壁法体外分离培养rBMSCs,通过成骨和成脂分化能力以及细胞表面标志物检测对rBMSCs进行鉴定;2.构建含人CEMP1基因的重组慢病毒过表达载体,通过RT-PCR及基因测序对重组载体进行鉴定;3.通过荧光显微镜观察转染后细胞荧光表达,流式细胞术检测转染效率,RT-PCR、Real-time PCR、免疫细胞化学和Western Blot检测转染后细胞CEMP1基因和蛋白的表达情况;4.通过检测转染后rBMSCs的成牙骨质相关基因表达,探讨CEMP1基因修饰对rBMSCs的影响。
  结果:1.成功分离培养rBMSCs;流式细胞术显示细胞高表达CD29和CD90;2.rBMSCs成骨诱导21d,茜素红染色可见红染的矿化结节;成脂诱导21d,油红O染色可见红染的空泡样脂滴;3.RT-PCR及基因测序证实成功构建携带人CEMP1基因的慢病毒表达载体;4.转染后rBMSCs在荧光显微镜下可见大量绿色荧光表达,流式细胞术检测结果证实具有较高表达率;5.经RT-PCR、Real-time PCR、免疫细胞化学及Western Blot检测,被转染的细胞高表达CEMP1基因和蛋白;6.Real-time PCR检测结果显示LV-CEMP1-EGFP组细胞BSP、OPN表达较LV-EGFP组和未转染组明显增高,差异具有统计学意义。
  结论:成功构建携带人CEMP1基因的慢病毒载体并转染BMSCs,CEMP1基因可促进rBMSCs成牙骨质相关基因的表达。
[硕士论文] 孙观文
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  研究不同浓度CGF(Concentrated Growth Factors,浓缩生长因子)、PRF(Plate Rich Fibrin,富血小板纤维蛋白)提取液对hDPSCs(human Dental Pulp Stem Cells,人牙髓干细胞)增殖的影响;获得最佳促增殖浓度,探讨该浓度提取液对牙髓干细胞迁移、成牙本质分化及相关因子表达的影响.
  方法:
  (1)组织块结合酶消化法获得牙髓细胞,单克隆法从中获得hDPSCs,采用免疫组化染色检测波形丝蛋白和角蛋白的表达,流式细胞术检测hDPSCs表面特异性标志物,成骨及成脂分化诱导鉴定其细胞干性.(2)反复冻融法制备CGF、PRF凝胶提取液,酶联免疫吸附法检测各提取液中TGF-β1和PDGF-AA的浓度;分别使用对照组:10%FBS组,实验组:10%、20%、30%、40%CGF和PRF提取液组与hDPSCs共培养,CCK-8法检测细胞活性,获得最佳促hDPSCs增殖浓度.(3)细胞划痕实验比较10%FBS、20%CGF、20%PRF对hDPSCs迁移的影响.(4)茜素红染色、ALP染色和ALP活性试剂盒分别检测10%FBS、20%CGF、20%PRF对hDPSCs成骨诱导分化的影响.(5)qRT-PCR检测10%FBS、20%CGF、20%PRF对hDPSCs成牙本质诱导分化过程中相关特异性基因表达的影响.
  结果:
  (1)本实验条件下使用酶消化法结合单克隆法从新鲜离体牙中获得具有间充质干细胞特性的hDPSCs;
  (2)100%CGF、100%PRF提取液中,TGF-β1和PDGF-AA的含量无统计学差异,10%、20%、30%、40%CGF和PRF提取液促进hDPSCs增殖能力不同,20%CGF组和20%PRF组促进hDPSCs增殖能力最强(P<0.05),20%CGF组促进hDPSCs增殖能力比20%PRF组强(P<0.05);
  (3)与对照组相比,20%CGF和20%PRF均抑制hDPSCs迁移能力(P<0.05),20%PRF组抑制hDPSCs迁移能力最强(P<0.05);
  (4)茜素红染色和ALP染色结果显示在促进hDPSCs成骨分化能力由强到弱依次为20%PRF组、20%CGF组、10%FBS组,ALP活性检测显示20%PRF组和20%CGF组促进hDPSCs成骨分化能力相对于对照组强(P<0.05),20%PRF组优于20%CGF组(P<0.05);
  (5)qRT-PCR检测结果显示:第3天时,20%CGF组DSPP表达量最高(P<0.05);20%PRF组BMP-2和TGF-β1表达量最高(P<0.05),各组之间DMP-1表达量无统计学差异;第7天时,20%PRF组高表达TGF-β1和DMP-1(P<0.05),各组之间DSPP、BMP-2表达量无统计学差异;第14天时,20%CGF组和20%PRF组DSPP、BMP-2、TGF-β1、DMP-1表达量与对照组相比,具有统计学差异,其中20%CGF组DSPP、BMP-2表达量最高(P<0.05),20%PRF组中TGF-β1、DMP-1表达量最高(P<0.05).
  结论:
  (1)本实验条件下成功获得具有良好增殖和分化能力的hDPSCs;
  (2)10%、20%、30%、40%CGF和PRF提取液促进hDPSCs增殖,20%CGF组促hDPSCs增殖能力更强;
  (3)20%CGF和20%PRF均抑制hDPSCs迁移能力,20%PRF组抑制hDPSCs迁移能力更强;
  (4)20%CGF和20%PRF均促进hDPSCs成骨分化能力,20%PRF组促进hDPSCs成骨分化能力比20%CGF组强;
  (5)20%CGF、20%PRF提取液均能促进hDPSCs成牙本质分化,20%CGF组促进DSPP、BMP-2基因表达;20%PRF组促进TGF-β1、DMP-1基因表达.
[硕士论文] 黄艳华
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:髓室底穿孔是由于牙髓治疗时操作不当、病理性吸收等造成的髓腔和牙周组织的贯通,其中相当大的一部分比例是由于牙髓治疗时操作不当造成,严重的可能要拔除患牙,给患者口腔健康及生理功能带来不良影响。治疗时除了要熟悉掌握牙齿的解剖形态,还要小心谨慎,规范操作,防止意外的髓室底穿孔。如果发生髓室底穿孔,要正确评估患牙。根尖未闭合的牙齿,根管治疗时,常因根尖孔粗大,采用常规的根管充填不能很好的封闭根尖区,导致治疗的失败。MajoranaA等的研究报道称17.24%的外伤牙即使完善根管治疗,也可能出现牙根外吸收。无机三氧化矿物聚合(MTAmineral trioxide aggregate)具有的生物相容性优良、封闭效果好,边缘渗漏少、在潮湿的工作环境中也可以正常固化,广泛应用于临床上髓室底穿孔、根管侧穿的修补,根尖屏障等,MTA的强碱性还能中和牙根外吸收酸性环境,产生对牙根外吸收细胞不利的环境。本文主要就MTA材料在髓室底穿孔及根尖屏障术中的应用展开阐述,重点观察根管内充填MTA后牙根外吸收的变化,并对各病例的病因以及树脂嵌体修复、瓷嵌体修复、树脂分层修复、根管治疗等治疗的相关问题进行讨论。病例一为医源性髓室底穿孔患者,应用MTA进行髓室底穿孔的修补,常规根管治疗,全冠修复恢复患牙的美观和功能,对36采用尽量保存牙体组织的瓷嵌体修复;病例二为牙外伤导致牙髓坏死和根尖周组织炎症,根尖发育停止,根尖未完全闭合,伴牙根中部发生外吸收的年轻恒牙,通过使用MTA进行根尖屏障,通过锥束形CT(CBCT cone beam CT)观察到根尖阴影明显缩小,牙根外吸收停止;病例三是36、46龋病导致的慢性牙髓炎,采用常规的根管治疗术(RCTroot canal therapy)后行36的树脂分层充填修复和46的树脂嵌体修复;病例四是44龋病导致的急性牙髓炎,外院治疗无法缓解疼痛,通过拍摄X线及显微镜配合发现44牙根管为近远中向的1-2型根管,对遗漏的远中根管予以治疗后症状消失,根管治疗后树脂分层充填修复。
[硕士论文] 朴世上
中西医结合临床 延边大学 2018(学位年度)
摘要:目的:通过灌胃清肺泻肝汤治疗2型糖尿病胰岛素抵抗小鼠,来测定小鼠的体重、空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数的变化。最后通过上述结果来探讨清肺泻肝汤对2型糖尿病胰岛素抵抗小鼠的保护作用。
  方法:把60只小白鼠饲养21天后,随机选择10只作为正常的标准,50只给它们吃高脂肪高糖量的食物,并在它们的腹腔打入链脲佐菌素诱导T2DM,造模成功后,随机分为清肺泻肝汤高、中、低剂量组,消渴丸组、糖尿病模型组,每组10只,每组给予对应药物治疗28天。观察并且测量小白鼠的体重、空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素水平。
  结果:高脂高糖饮食喂养的小白鼠体重显著地上升,造模型之后小白鼠之体重显著减少,灌胃以后体重减少不太显著。与糖尿病模型组比较,清肺组能够降低空腹血糖,有统计学意义(P<0.05);与糖尿病模型组比较,清肺组能够降低胰岛素抵抗指数,有统计学意义(P<0.05);与糖尿病模型组比较,清肺组能够降低甘油三酯,有统计学意义(P<0.05);与糖尿病模型组比较,清肺组能够降低低密度脂蛋白,有统计学意义(P<0.05)。
  结论:经过研究分析发现清肺泻肝汤具有降血糖及降血脂等作用,也可改善胰岛素抵抗指数,可缓解胰岛素抵抗。清肺组与消渴丸组比较降血糖、降血脂、降低胰岛素抵抗指数等作用相当,表明清肺泻肝汤对降低链脲佐菌素诱导2型糖尿病模型小鼠对降低血糖和血脂有一定的治疗效果。并能有效改善胰岛素之抵抗。
[硕士论文] 夏凤娟
口腔医学 南方医科大学 2018(学位年度)
摘要:牙周病作为早产低出生体重儿一种潜在的、独立的危险因素,已引起国内外学者的广泛关注。Meta分析结果显示对患有牙周病的孕妇在妊娠中期进行牙周治疗包括龈上洁治、龈下刮治、牙周翻瓣术和根面平整等可提高孕妇的牙周健康指数,减轻牙周症状,但是这些孕期进行的牙周治疗并不能降低早产低体重儿的出生率。
  本研究分为两部分,分别从医生和病患的角度调查他们对牙周病早产低出生体重儿关系的认知情况。
  目的:
  调查评估医患双方对牙周病与早产低出生体重儿关系的知识、态度、行为(Knowledge,attitude and practice,KAP),了解其认知情况,为孕妇进一步口腔健康宣教计划的制定提出针对性依据,为制定新的医疗政策提供理论依据。
  方法:
  对广东、安徽、江苏、山东、上海5个省市地区三甲医院从事妇产科学专业的临床医师以问卷的形式进行调查。采用面对面或发送E-mail的形式发放调查问卷,随后对问卷进行指标聚类分析,得到问卷的克朗巴赫系数。为了探讨影响妇产科医师临床实践的因素,以妇产科医师是否经常会建议患者在孕前进行预防性牙周检查及治疗为因变量,分别以性别、年龄、文化程度、医师职称等为自变量,进行Logistic回归分析。
  对于南方医科大学珠江医院妇产科门诊孕检的孕妇进行问卷调查,采用现场调查的形式发放调查问卷,随后对问卷进行统计学分析,为了探讨影响孕妇口腔保健行为的因素,以是否在孕期进行口腔检查和治疗为因变量,以年龄、妊娠周数等作为自变量,分别进行Logistic回归分析。
  结果:
  关于妇产科医师的调查问卷总克朗巴赫系数:0.724,代表问卷的信度较高。Logistic回归分析显示,越认同“妊娠期进行牙周治疗并不会降低新生儿早产出生率”这一观点的妇产科医师越倾向于“建议患者在孕前进行预防性牙周检查及治疗”。
  关于孕妇的调查,Logistic回归分析显示,相较于学历低者,学历较高的孕妇会更倾向于在孕期进行口腔检查和治疗;越临近分娩时期进行口腔保健者就越重视口腔检查和治疗。
  结论:
  妇产科医师尚未对牙周病与早产低出生体重儿的关系给予足够的重视;绝大多数孕妇不了解牙周病与早产低出生体重儿的关系,不够重视口腔健康;科学的认知可以引导产生正确的行为。
[博士论文] 赵莉
口腔临床医学 山东大学 2018(学位年度)
摘要:牙周炎是口腔的主要疾病之一,人群中发病率高,严重影响人们的生活质量。强调“牙周疾病重在预防”的今天,牙周炎发病机制的相关研究显得尤为重要。牙周病的主要致病因素是细菌及其代谢产物,这些致病因素破坏牙周支持组织的同时,亦能激发宿主的免疫调节应答,宿主自身的免疫应答对于牙周炎症进程同样发挥重要作用。
  亲环素A(Cyclophilin A,CyPA)又称为环胞索A结合蛋白,是免疫抑制药物环孢素A(CsA)主要的胞质结合蛋白。亲环素A在蛋白质折叠,胞内运输和T细胞激活等生物学活动中均发挥重要的作用。最新研究表明,胞外亲环素A对白细胞、单核细胞和淋巴细胞等均有趋化作用,针对亲环素A趋化作用的研究成为新的研究热点。亲环素A在炎症牙龈组织中的表达与健康牙龈组织相比显著升高,定位于炎性浸润细胞和浸润牙龈结缔组织,与炎症牙龈中MMP-1,MMP-2和MMP-9的表达密切相关。亲环素A亦可通过诱导趋化中性粒细胞,调节TNF-a/IL-8的分泌参与牙周组织的炎症反应。CD68是单核细胞谱系(如单核吞噬细胞、破骨细胞)、循环巨噬细胞和组织巨噬细胞(如Kupffer细胞、小胶质细胞)中细胞高度特异性表达的一种蛋白质。牙周组织中CD68+炎性细胞的表达水平,很大程度上决定牙槽骨破坏的水平,影响牙周炎的预后。日前,对于亲环素A和CD68+炎性细胞之间存在何种关系,这种关系在牙周炎症过程中发挥何种作用,相关研究仍然比较匮乏。
  动物实验部分,建立大鼠下颌第一磨牙结扎诱导的牙周炎实验模型,观察牙周炎自然病程中亲环素A的组织学定位和表达变化,探讨亲环素A在牙周炎病程中的作用;观察牙周炎病程中CD68+炎性细胞的表达;对比观察亲环素A和CD68+炎性细胞的组织学定位。为进一步证实亲环素A和CD68+炎性细胞间的密切关系,给予外源性的亲环素A重组蛋白,对比观察结扎诱导的牙周炎病程中CD68+炎性细胞的表达变化。结果表明:伴随牙周炎症的加重,亲环素A表达逐渐增加。阳性表达位于炎性浸润区的单核细胞和多核细胞,以及牙槽骨边缘的多核细胞。CD68+炎性细胞亦分布在浸润区的单核细胞和多核细胞,以及牙槽骨边缘的多核细胞。TRAP染色证实牙槽骨边缘的多核细胞为破骨细胞。给予外源性的亲环素A,炎性浸润区CD68+炎性细胞表达增加,牙槽骨边缘的破骨细胞增加,Miro-CT显示牙槽骨吸收增加。亲环素A可通过趋化CD68+炎性细胞,参与牙周炎性浸润和牙槽骨吸收。
  临床研究部分,收集翻瓣手术或冠延长术获取的人牙周炎牙龈组织,收集埋伏牙拔除术切除的正常牙龈组织,观察牙周炎症条件下亲环素A的表达,观察CD3+、CD4+、CD22+和CD68+炎性细胞的表达,进一步探讨亲环素A及相关炎性细胞在人牙周炎病理进程中的作用。亲环素A在人牙周炎组织中表达较正常牙龈显著增加;CD3+、CD4+、CD22+和CD68+炎性浸润细胞均可在炎症性牙龈组织中观察到;免疫荧光双染结果进一步证实亲环素A同CD68+炎症细胞间关系密切。
  本研究证实了亲环素A参与大鼠和人牙周炎症进程,亲环素A可通过上调CD68+炎性细胞,参与牙周炎性浸润和牙槽骨吸收。本研究一方面可以进一步丰富牙周炎发病机制的理论研究;另一方面,为将来研发亲环素A拮抗剂阻断亲环素A的作用,控制牙周炎性浸润和牙槽骨吸收提供新的治疗思路,有着积极的临床应用价值。
[博士论文] 于淼
口腔临床医学 山东大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  本研究旨在观察间接共培养条件下成骨细胞对PDLSCs成骨分化作用的影响;在进一步明确TNF-α对PDLSCs成骨向分化影响的基础上,探讨PGRN逆转TNF-α对PDLSCs成骨分化的抑制作用及PGRN对PDLSCs成骨向分化的直接促进作用,为深入理解牙周再生机制和完善牙周组织工程策略提供实验依据,为临床上牙周炎的治疗提供了新的方法和思路。
  方法:
  1.PDLSCs的分离培养与鉴定
  1.1PDLSCs的分离培养
  收集临床因正畸需要而拔除的健康前磨牙或由于阻生而拔除的无龋病且牙周健康的第三磨牙,刮取根中1/3的牙周膜,采用组织块及酶消化法分离培养PDLSCs,有限稀释克隆法纯化PDLSCs,取活性良好的细胞用于后续实验。
  1.2PDLSCs的多向分化
  在体外以10-8mol/L地塞米松,10mmol/Lβ-甘油磷酸钠,50mg/L维生素C诱导PDLSCs向成骨细胞分化,28d后,茜素红染色法检测矿化结节的形成;以1μM地塞米松,10μg/ml胰岛素,0.5mM IBMX,0.2mM吲哚美辛分别诱导PDLSCs向脂肪细胞分化,21d后,油红O(OilRed O)染色检测脂肪滴的形成。
  2.成骨细胞对PDLSCs成骨分化的影响及机制
  利用Transwell系统,将PDLSCs置于其下室,不同比例的成骨前体细胞(MC3T3-E1)及其对照细胞牙龈成纤维细胞(Human gingival fibroblasts,HGFs)置于上室,成骨诱导培养基下共培养。检测PDLSCs的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase activity,ALP)活性及碱性磷酸酶(ALP)、runt相关转录因子-2(runt-related transcription factor-2,Runx2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的mRNA及蛋白的表达水平;牙骨质附着蛋白(cementum attachment protein,CAP)、牙骨质蛋白-23(cementum protein23,CP-23)mRNA表达水平;观察矿化结节的形成情况,以此说明成骨细胞对PDLSCs成骨分化和矿化的影响。
  用ELISA评价HGFs与MC3T3-E1细胞分泌的BMP-2,以此反映成骨细胞促进PDLSCs成骨分化和矿化的机制。
  3.TNF-α对PDLSCs成骨分化作用的影响
  将10ng/mlTNF-α作用于PDLSCs,分别于7、14d检测PDLSCs的ALP活性,于7、14、21d检测成骨指标ALP、Runx2、OPN的mRNA及蛋白的表达水平。
  4.PGRN对正常和炎性环境下PDLSCs成骨分化作用的影响
  检测不同浓度PGRN对PDLSCs的增殖(cell-counting kit-8,CCK8)、ALP活性、成骨分化相关标志物mRNA表达水平的影响,筛选出PGRN促进成骨分化的最佳浓度;然后,将实验分为四组:A组:对照组:单独培养PDLSCs;B组:10ng/ml TNF-α;C组:25ng/ml PGRN;D组:10ng/mlTNF-α+25ng/ml PGRN。检测培养不同时间点PDLSCs的ALP活性;ALP、Runx2和OPN的mRNA及蛋白水平的表达;同时,于21d进行矿化结节茜素红染色和钙含量测定。
  结果:
  1.PDLSCs的分离培养及鉴定
  成功分离培养出状态良好的PDLSCs。PDLSCs成骨诱导4w后用茜素红染色,镜下观察可清楚地看到大小不同的红色钙结节形成;PDLSCs成脂诱导2w后,油红O染色可见清晰红染的脂肪小滴形成。
  2.MC3T3-E1细胞促进PDLSCs的成骨分化
  在7、14d时,PDLSCs与MC3T3-E1细胞各共培养组(OB共培养组)的ALP活性显著高于对照组及与HGFs共培养组(p<0.05),其中,7d时的P1M2组和14d时的P1M1、P1M2组ALP活性表达最高。在3、7和14d时,MC3T3-E1细胞培养液中分泌的BMP-2呈时间依赖性显著高于HGFs分泌的BMP-2(p<0.05)。
  在多数的OB共培养组中,ALP、Runx2、OPN的mRNA表达水平明显上调,其中,7、21d的P1M2组及14d的P1M1组的ALP mRNA表达水平最高(p<0.05);P1M2组的Runx2mRNA表达水平最高;P1M2、P2M1组的OPN mRNA表达水平高于各实验组(p<0.05)。CAP mRNA表达在7、14d的P1M1、P1M2组,21d除了P1M4的所有OB共培养组显著增强(p<0.05);在多数的OB共培养组中,CP-23mRNA表达水平明显上调,其中,P1M2组的表达最高。7d时,PDLSCs与MC3T3-E1细胞共培养组的ALP、Runx2、OPN的mRNA表达水平显著高于与HGFs共培养组(p<0.05)。ALP的蛋白表达高峰出现在7、14d的P1M2组及21d的P1M1、P1M2组(p<0.05);Runx2的蛋白表达高峰出现在7d的P1M2、P2M1组和21d的P1M1组(p<0.05);OPN的蛋白表达高峰均在三个时间点的P1M2组(p<0.05)。7d时,PDLSCs与MC3T3-E1细胞共培养组的ALP、Runx2、OPN的蛋白表达及矿化结节的形成均显著高于与HGFs共培养组(p<0.05)。
  3.TNF-α抑制PDLSCs的成骨分化
  TNF-α浓度为10ng/ml,在7、14d时,ALP活性显著低于对照组;ALP、Runx2、OPN的mRNA及蛋白的表达水平显著低于对照组(p<0.05)。
  4.PGRN促进PDLSCs的成骨分化
  4.1适当浓度的PGRN促进PDLSCs的增殖及成骨分化
  培养24h后,与对照组相比,PGRN浓度为25,50ng/ml时,PDLSCs的增殖作用明显(p<0.05);48和72h,PGRN浓度为5,25ng/ml时,PDLSCs的增殖作用显著高于对照组,且在25ng/ml时促增殖作用最大(p<0.05)。7、14d时,相比于对照组,PGRN浓度为5,25ng/ml时,ALP活性明显增强(p<0.05),最高组均出现在25ng/ml;但浓度为100ng/ml组的增殖和ALP活性明显低于对照组(p<0.05)。3和7d时,PGRN浓度在5,25,50ng/ml时,ALP、Runx2mRNA表达水平显著高于对照组(p<0.05),且浓度为25ng/ml时,两者mRNA表达水平最高(p<0.05);浓度为100ng/ml组的ALP、Runx2mRNA表达水平明显低于对照组(p<0.05)。
  4.2PGRN增强了正常和炎性环境下PDLSCs的成骨分化
  7、14d时,相比于对照组,10ng/mlTNF-α组明显抑制了PDLSCs中的ALP活性(p<0.05),而25ng/ml PGRN组的ALP活性明显增强,10ng/mlTNF-α+25ng/ml PGRN组与对照组相比,无统计学意义(p>0.05)。
  7、14、21d时,与对照组相比,10ng/mlTNF-α组的ALP、Runx2、OPN的mRNA和蛋白表达水平明显下调,25ng/ml PGRN组的ALP、Runx2、OPN的mRNA和蛋白表达水平明显上调(p<0.05);7、14d时,10ng/ml TNF-α+25ng/ml PGRN组的Runx2mRNA表达水平高于对照组,且差异显著(p<0.05);7d时,10ng/ml TNF-α+25ng/ml PGRN组的Runx2蛋白表达水平显著高于对照组(p<0.05);在三个时间点中,25ng/mlPGRN组的各mRNA和蛋白表达水平最高,10ng/ml TNF-α+25ng/mlPGRN组次之。
  PDLSCs经成骨诱导21d后,10ng/mlTNF-α组抑制了PDLSCs的矿化,而25ng/ml PGRN组促进了PDLSCs的矿化(p<0.05),10ng/mlTNF-α+25ng/ml PGRN组与对照组相比无统计学意义(p>0.05)。
  结论:
  1.PDLSCs的成骨分化和矿化受到成骨细胞的正向影响:成骨细胞增强了PDLSCs的成骨/成牙骨质分化和矿化的能力,成骨细胞与PDLSCs的最佳比例在2∶1到1∶1范围内时,PDLSCs的成骨分化能力最强;成骨细胞增强PDLSCs的成骨/成牙骨质分化和矿化的机制与其旁分泌的BMP-2有关。
  2.PDLSCs的成骨分化和矿化受到诸如TNF-α炎性因子的负性影响:TNF-α浓度为10ng/ml时,对PDLSCs的成骨分化起抑制作用;
  3.PGRN能直接促进PDLSCs的增殖和成骨分化及矿化,且能逆转TNF-α对PDLSCs成骨分化的抑制作用:PGRN浓度在5,25,50ng/ml时,能促进PDLSCs的增殖和分化,且最佳浓度为25ng/ml。
[硕士论文] 吴佳梦
口腔临床医学 山东大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  Nel-like分子-1(NELL-1)是一种新型生长因子,可诱导成骨细胞的分化和骨再生。近期有研究表明,NELL-1蛋白可协同增加骨形成蛋白-2(BMP2)的骨形成及骨诱导作用,并抑制由BMP2蛋白导致的炎症及肿胀等不良反应。牙齿和颅骨均来源于神经嵴,两者的蛋白表达谱也具有许多相类似的地方。我们课题组以前的研究结果表明,Nell-1蛋白可以在成牙本质细胞的分化及牙本质的形成中发挥重要作用,本课题的研究目的旨在检测NELL-1蛋白与BMP2蛋白在修复牙髓损伤时是否也具有协同作用,同时,本研究还讨论了NELL-1和BMP2联合应用对牙髓损伤修复和再生的影响。
  材料和方法:
  1、选取Wistar大鼠健康、无龋坏的上颌第一磨牙建立牙髓损伤模型。将暴露的牙髓用400ng/ml、500ng/ml、600ng/ml、700ng/ml的NELL-1蛋白(无菌胶原海绵为载体)进行盖髓。2周后通过苏木精-伊红(HE)染色检测修复性牙本质形成的效果,确定NELL-1蛋白的最低有效作用浓度。
  2、选取60只Wistar大鼠的上颌第一磨牙构建牙髓损伤模型。随机分为5组分别进行盖髓:(1)对照组:空白胶原海绵组;(2)Dycal组;(3)700ng/ml BMP2蛋白+胶原海绵组;(4)700ng/ml NELL-1蛋白+胶原海绵组;(5)700ng/ml NELL-1+700ng/ml BMP2组。1周、2周和4周后,将大鼠处死。
  3、利用HE染色观察各组修复性牙本质的形成,免疫组化染色观察修复性牙本质相关特异性蛋白牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达。
  4、通过qRT-PCR以及免疫组化染色检测牙髓炎性因子白细胞介素6(IL6)和白细胞介素8(IL8)在mRNA和蛋白质水平的表达。
  结果:
  1、与其他浓度相比,700ng/ml的NELL-1蛋白是诱导大鼠牙髓修复性牙本质形成的最低有效作用浓度。
  2、HE染色结果显示NELL-1与BMP2蛋白联合应用的大鼠牙髓具有更早和更明显的管状修复性牙本质形成。在1周时,NELL-1与BMP2蛋白联合盖髓的标本开始形成短而不规则的管状修复性牙本质;2周时,NELL-1与BMP2蛋白联合盖髓的标本所形成的修复性牙本质内含有丰富的牙本质小管,与周围自然的牙本质相类似;4周时,NELL-1与BMP2蛋白联合盖髓的标本在穿髓孔下方表现出更明显的牙本质桥形成。
  3、免疫组化染色显示NELL-1+BMP2组的DSPP表达强于对照组(p<0.01)、Dycal组(1和4周时p<0.01,2周时p<0.05)和BMP2组(1周时p<0.01,4周时p<0.05)。
  4、与其他组相比,NELL-1与BMP2蛋白联合应用在大鼠牙髓中表现出较轻的炎性细胞反应。免疫组化染色发现,NELL-1+BMP2组能够抑制IL6和IL8的阳性表达。qRT-PCR实验也得到了相同的结果,与其它组相比,NELL-1+BMP2组在各时间点IL6和IL8表达水平均有显著下调(p<0.01)。
  结论:
  1、成功建立大鼠牙髓损伤模型,首次发现联合应用NELL-1与BMP2蛋白进行盖髓能更早形成更明显的管状修复性牙本质,且NELL-1+BMP2组的牙本质形成特异性蛋白DSPP阳性表达更强,提示NELL-1和BMP2蛋白联合应用对牙髓损伤有更好的修复作用。
  2、NELL-1与BMP2蛋白联合应用能够抑制大鼠牙髓中炎症因子IL6和IL8在mRNA及蛋白质水平的表达,提示NELL-1与BMP2蛋白联合应用可以抑制早期牙髓炎的发展。
[硕士论文] 张静
口腔医学 山东大学 2018(学位年度)
摘要:目的:本研究通过锥形束CT(cone-beam computed tomography,CBCT)技术对山东地区人下颌后牙C形牙根及根管解剖形态进行精确分析,同时比较不同后牙C形根管的发生率,为临床根管治疗提供更精确的影像学依据,从而有助于提高C形根管治疗的成功率。
  方法:选择山东地区350位患者共2603颗下颌后牙的CBCT影像资料,记录患者的姓名、性别、年龄及牙位,并分别进行分组,同时记录以下信息:1.下颌后牙牙位;2.CEJ到牙本骨质界的距离,即根管长度;3.记录根颈1/3、根中1/3以及根尖1/3C形根的分型,进而计算C形根的发生率,观察根管形态,不同分组间采用相应的统计学方法进行统计分析,其中年龄组间采用Fisher确切概率法检验,性别组及牙位组间运用卡方检验。
  结果:1.C形根管发生率350位患者中,共691颗下颌第一前磨牙,其中具有C形根管的共18颗,发生率为2.60%(18/691);第二前磨牙共659颗,未发现C形根管,发生率为0%(0/659);第一磨牙共621颗,只有1颗出现C形根管,发生率是0.16%(1/621);第二磨牙共632颗,有200颗存在C形根管,发生率为31.65%(200/632)
  2.C形牙根形态18颗下颌第一前磨牙C形牙根中,半数以上伴有近舌侧(ML)沟(10颗,55.56%),其余伴近中(M)沟(5颗,27.77%)和舌侧(L)沟(3颗,16.67%);1颗下颌第一磨牙C形牙根伴舌侧(L)深纵沟;200颗下颌第二磨牙C形牙根,全部是融合根,绝大多数伴舌侧(L)深纵沟(194颗,97%),极少数伴颊侧(M)沟(6颗,3%)
  3.CBCT横断面C形根管分型下颌第一前磨牙18颗C形根管中,根管口和根颈1/3处,均是C4型根管(100%);在根中1/3以C3a型为主(44.44%);在根尖1/3出现最多的是C4型(7颗,38.88%)。下颌第一磨牙1颗C形根管中,根管口和根颈1/3呈C1型,根中1/3呈C2型,根尖1/3呈C3a型。下颌第二磨牙200颗C型根管中,根管口处出现频率最高的是C1型根管(141颗,70.5%);根颈1/3,C1型根管数目较根管口处略降低,但仍然是出现频率最高的(108颗,54%);根中1/3以C2型为主(121颗,60.5%);根尖1/3,C3a型出现最多(65颗,32.5%)。
  4.C形根管形态变化下颌第一前磨牙18颗C形根管的分型从根管口到根颈1/3均未发生改变,从根颈1/3到根尖1/3均发生了不同程度的变化;下颌第二磨牙200颗C形根管形态在整个根管长度中大部分发生了变化(177颗,88.5%),其中在根颈1/3处开始变化的最多(88颗,44%),有41颗(20.5%)在根管口位置即开始出现变化,有48颗(24%)在根中1/3发生变化,极少部分(23颗,11.5%)在整个根管长度中C型根管分型未发生改变。
  5.各分组间差异由于下颌第二前磨牙和第一磨牙出现C形根管的数目较少,无法进行统计学分析,因此只对下颌第一前磨牙和第二磨牙进行统计分析,在牙位和性别分组中,两者均表现为差异无统计学意义(P>0.05)。年龄分组中,第一前磨牙表现差异无统计学意义(P>0.05);第二磨牙中,20-30岁和≤20岁年龄段更容易出现C形根管(P<0.001)。
  结论:山东地区人下颌后牙C形牙根及根管常发生在第二磨牙,其次是第一前磨牙,极少发生在第二前磨牙和第一磨牙,同时C形根解剖结构复杂,根管形态多变,而CBCT可以较好地展现这种形态变化,为临床牙髓病的诊断和治疗提供影像学依据。
[硕士论文] 高玫惠
口腔医学 大连医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:选择10例牙髓疾病及根尖周病患者,通过一次性根管治疗,搭配超声冲洗,观察其疗效为临床治疗提供一定的依据。
  方法:研究对象选取2015年8月至2017年12月间,共10例患有牙髓炎及根尖周炎的病例进行一次性根管治疗。髓腔开扩,安装橡皮障,测量根管工作长度,拍摄插针片。ProTaperS1、S2初步扩大根尖1/3,K3预备根管中下段,用2.5%次氯酸钠溶液搭配超声冲洗,17%EDTA终末冲洗。隔湿,干燥,热牙胶充填,去除橡皮障,拍摄根充片,X线示恰充。水门汀垫底,树脂充填。调,抛光。嘱患者在术后六个月、术后一年复诊。
  结果:术后六个月和术后一年后患者随访,恢复状况良好,X线片显示根尖原有病变已明显变小,趋向愈合,治疗结果成功。
  结论:一次性根管治疗搭配超声冲洗治疗牙髓疾病及根尖周疾病,可有效控制感染,促进病变组织愈合。一次法根管治疗减少了患者就诊次数及就诊压力,易被患者接受,临床值得推广。
[硕士论文] 吴妍慧
口腔医学 郑州大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  本研究旨在通过临床资料研究年轻恒牙酸蚀症的分布情况,并测定上下颌年轻恒牙分别被可口可乐和Gluma磷酸酸蚀剂酸蚀前后的显微硬度的变化、扫描电镜观察微观表面形貌,以探讨上下颌年轻恒牙酸蚀易感性差异的可能原因,并在此基础上进一步探讨上下颌年轻恒牙釉质的最佳酸蚀时间。
  方法:
  收集20例口腔美容科年轻恒牙酸蚀症患者,分析其酸蚀症牙位分布情况;收集口腔颌面外科门诊160颗因正畸减数拔除的新鲜上下颌年轻恒前磨牙,用于制备颊面中1/3-颈1/3的5mm×5mm的釉质标本块。釉质块除观察区外其余各面涂布两层耐酸指甲油,并用甲基丙烯酸甲酯包埋四周,磨平底面。上下颌牙齿分别分为可乐酸蚀组,磷酸酸蚀组和空白对照组,单颌各有9组,每组各8颗釉质块。可乐酸蚀组按时间梯度分为5min组,15min组,30min组,60min组;磷酸酸蚀组按时间梯度分为15s组,30s组,45s组,60s组;空白对照组样本则置于去离子水中进行对照。检测各组样本酸蚀前后显微硬度变化值,并用扫描电子显微镜(SEM)观察其釉质酸蚀后微观变化。
  结果:
  1.上下颌牙齿酸蚀的好发牙位并不相同,分别有69.64%的上颌牙齿和47.86%的下颌牙齿出现了牙齿酸蚀,上下颌间有统计学差异(P<0.05)。
  2.与空白对照组相比,不同酸蚀时间后,上下颌牙齿显微硬度随酸蚀时间延长逐渐降低,可乐组釉质显微硬度变化与酸蚀时间大致呈简单线性关系。
  3.显微硬度结果显示:可乐酸蚀组:除5min酸蚀组外,其他3组间上下颌牙齿均有统计学差异(P<0.05)。磷酸酸蚀组:除15s酸蚀组外,其余3组上下颌牙齿显微硬度变化均有统计学差异(P<0.05)。
  4.SEM结果显示:随酸蚀时间延长,釉质表面脱矿程度加重,釉质由初始的鱼鳞状及蜂窝状逐渐转变为大小不等较深的弹坑样凹陷,随酸蚀时间延长,呈现明显过度酸蚀样改变,凹陷深度变浅。高倍镜下可见排列规则的釉柱晶体变得圆钝,并逐渐丧失了形态。但无论是可乐组还是磷酸组,扫描电镜显示,在一定时间内上颌牙齿受酸蚀程度稍重于下颌牙齿。
  5.可乐组超过30min或磷酸组超过45s时,上下颌牙齿均出现不可逆性破坏,但上颌牙齿脱矿程度更重。磷酸组上颌牙齿酸蚀30s和下颌牙齿酸蚀45s时,SEM显示釉柱凹陷较深,排列较规则,结构最为清晰,酸蚀程度适中。
  结论:
  1.上颌年轻恒牙釉质酸蚀易感性略高于下颌。
  2.30s和45s可能分别是上下颌年轻恒牙釉质的最佳酸蚀时间。
  3.短时间内可乐累计饮用时间最好少于30min,以免造成牙齿不可逆破坏。
[硕士论文] 黄翔雨
口腔临床医学 南方医科大学 2018(学位年度)
摘要:牙周炎是口腔常见的一种疾病,也是造成牙齿缺失的第一大原因,主要是由牙周致病菌繁殖及代谢释放毒素引起的牙周软组织的炎症及骨组织降解破坏,并刺激机体进一步产生免疫应答促进组织破坏的疾病。
  脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革兰阴性菌细胞壁的主要成分,也是诱发炎症的主要因素,其与牙周病的发生发展关系现已相对明确。然而近年来有体内、体外研究表明LPS会刺激巨噬细胞中高迁移率族蛋白1(High Mobility Group Box-1,HMGB1)的合成、转位及释放,提示HMGB1可作为LPS的下游因子,在LPS引起的相关病变中继发性地影响疾病进程。那么,HMGB1是否参与牙周炎的进展以及它在其中发挥的作用是什么?尚有很多需要探索的地方。
  本研究旨在探究LPS及其下游因子HMGB1如何通过影响巨噬细胞的极化分型及破骨前体细胞的极化相关基因的表达情况,从而影响牙周炎性疾病的发生发展进程,以期为牙周炎的治疗提供新的思路。
  第一章 牙周炎患者龈沟液中HMGB1、IL-6、TNF-α的表达情况
  目的:
  以往大量文献已明确LPS与牙周炎的关系。最近体外研究表明高迁移率族蛋白HMGB1可在LPS的刺激下由巨噬细胞产生,在炎症中可作为致炎因子,也可促进破骨分化及骨吸收活性,提示了LPS与HMGB1之间的联系。但是HMGB1是否在牙周炎中起作用?
  本实验通过临床收集牙周炎病人龈沟液样本进行成分检测,探究牙周炎患者牙周组织渗出物的特征。检测龈沟液中HMGB1蛋白表达量,从临床方面探究HMGB1与牙周疾病的关系。同时检测龈沟液中与巨噬细胞、破骨前体细胞M1型极化相关的细胞因子TNF-α、IL-6的蛋白表达量,从蛋白质层面探究M1型极化与牙周炎症的关系。
  方法:
  1.于2017年南方医科大学口腔医院牙周科的就诊患者中,根据慢性牙周炎诊断标准选取慢性牙周炎患者10例作为实验组,中度、重度者各5例。同时于牙体牙髓科选取牙周健康者10例作为对照组。
  2.进行全身情况的问诊以及系统性牙周检查。
  3.用层析滤纸轻插入待测牙颊侧龈沟内约1mm,停留30s。
  结果:
  1.龈沟液样本中HMGB1蛋白表达量:
  在牙周健康的对照组龈沟液样本中,HMGB1平均蛋白表达量6.76ng/ml。在慢性牙周炎的实验组龈沟液样本中,HMGB1蛋白表达量15.71ng/ml。
  中度牙周炎组龈沟样品中,HMGB1蛋白平均表达量为12.97ng/ml。重度牙周炎龈沟液中HMGB1平均表达量为18.44ng/ml。
  2.龈沟液样本中IL-6蛋白表达量:
  在牙周健康的对照组龈沟液样本中,IL-6平均蛋白表达量0.11ng/ml。在慢性牙周炎的实验组龈沟液样本中,IL-6蛋白表达量1.40ng/ml
  中度牙周炎组龈沟样品中,IL-6蛋白平均表达量为0.78ng/ml。重度牙周炎龈沟液中IL-6平均表达量为2.02ng/ml
  结论:
  1.龈沟液样本中HMGB1蛋白表达量:慢性牙周炎组的HMGB1表达量明显高于正常对照组(P<0.01)。重度牙周炎组龈沟液中HMGB1的平均蛋白表达量明显高于中度牙周炎组(P<0.01)。
  2.龈沟液样本中IL-6蛋白表达量:慢性牙周炎组的IL-6表达量明显高于正常对照组(P<0.01)。重度牙周炎组龈沟液中IL-6的平均蛋白表达量高于中度牙周炎组(P>0.05)。
  第二章 细菌脂多糖对小鼠巨噬细胞系RAW264.7及RAW264.7破骨前体细胞极化分型相关基因表达的影响
  目的:
  LPS是革兰阴性菌细胞壁的主要成分,也是诱发牙周炎症的主要成分。牙周炎病理机制中,巨噬细胞及破骨前体细胞作为主要的效应细胞参与到牙周病的病理过程中,由于其在牙周炎中发挥重要的作用,其不同分型对疾病走向有重要影响。
  有关LPS和牙周炎关系的研究很多,但其对巨噬细胞,特别是对破骨前体细胞作用的研究尚不多,对此展开研究有助于加深对牙周炎的病理机制的理解。本实验旨在通过研究LPS对巨噬细胞的极化分型及对破骨前体细胞的相关极化基因表达情况的影响,探讨其在牙周炎性疾病中的作用机制。
  方法:
  1.小鼠巨噬细胞系RAW264.7培养于含有10%胎牛血清、100U/m1青霉素和100μg/ml链霉素的DMEM高糖培养基中。置于37℃,5%二氧化碳培养箱中贴壁生长。每2~3d更换培养液。
  2.用含有100ng/ml核因子κB受体活化因子配体(Receptor Activator for Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL)、1%巨噬细胞集落刺激因子(macrophages colony stimulating factor,MCSF)的完全培养基诱导3d,使巨噬细胞分化成为RAW264.7破骨前体细胞,镜下观察形态。
  结果:
  LPS(Pg)对小鼠巨噬细胞系RAW264.7M1/M2极化分型相关基因的影响:
  LPS(Pg)干预实验组M1的相关指标明显上调,M2的相关指标无明显变化。
  M1相关指标:NOS2基因表达较对照组上调19.34倍(P<0.01);IL-6基因表达较对照组上调61.78倍(P<0.01);TNF-α基因表达较对照组上调2.12倍(P<0.01)。
  M2相关指标:ARG-1基因表达下调为对照组的67%(P>0.05);RELM-α基因表达下调为对照组的42%(P>0.05)。
  结论:
  外源性的LPS(Pg)刺激使RAW264.7巨噬细胞系及RAW264.7破骨前体细胞M1极化分型相关基因表达增加,促进炎症破坏的进展。
  第三章 高迁移率族蛋白1对小鼠巨噬细胞系RAW264.7及RAW264.7破骨前体细胞极化分型相关基因表达的影响
  目的:
  在第一章研究中提示HMGB1参与到牙周炎进程中,在第二章研究中发现LPS可促进巨噬细胞M1方向的极化及破骨前体细胞M1相关极化基因的表达。
  近年来有研究表明LPS能诱导巨噬细胞内HMGB1的合成、转位及释放。说明HMGB1可作为LPS的下游因子,在LPS引起的相关病变中继发性地影响疾病进程。那么,在LPS导致牙周炎骨破坏的过程中,HMGB1是否参与其中?是否会对巨噬细胞及破骨前体细胞产生类似LPS的作用?本实验旨在进一步探究在这一信号通路中HMGB1如何通过影响巨噬细胞的极化分型及破骨前体细胞的相关极化基因表达水平来影响牙周疾病的进程。
  方法:
  1.小鼠巨噬细胞系RAW264.7培养于含有10%胎牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的DMEM高糖培养基中。置于37℃,5%二氧化碳培养箱中贴壁生长。每2~3d更换培养液。
  2.用含有100ng/mlRANKL、1%MCSF的完全培养基诱导3d,使巨噬细胞分化成为RAW264.7破骨前体细胞,镜下观察形态。
  3.待RAW264.7巨噬细胞及破骨前体细胞生长至80%时,用HMGB11μg/ml刺激18h,阴性对照以DMEM培养基培养。
  结果:
  1.HMGB1刺激下RAW264.7巨噬细胞M1/M2相关极化基因表达情况:
  HMGB1刺激过后的破骨细胞前体细胞,M1及M2的相关指标表达均上调。
  M1相关指标:NOS2基因表达较对照组上调4.02倍(P<0.01);IL-6基因表达较对照组上调2.50倍(P>0.05);TNF-α基因表达较对照组上调1.29倍(P<0.01)。
  M2相关指标:ARG-1基因表达较对照组上调1.25倍(P>0.05);RELM-α基因表达较对照组上调13.61倍(P<0.01)。
  2.HMGB1刺激下RAW264.7破骨前体细胞M1/M2相关极化基因表达情况:
  HMGB1刺激过后的巨噬细胞,M1相关指标无明显变化,M2的相关指标表达明显上调。
  M1相关指标:NOS2基因表达下调为对照组的80%(P<0.05);IL-6基因表达较对照组上调1.22倍(P>0.05);TNF-α基因表达较对照组上调1.04倍(P>0.05);IL-1基因表达下调为对照组的81%(P>0.05);CXCL-11至基因表达下调为对照组的94%(P>0.05)。
  M2相关指标:ARG-1基因表达较对照组上调2.42倍(P<0.05);RELM-α基因表达较对照组上调3.52倍(P<0.01)。MRC-1基因表达较对照组上调7.28倍(P<0.01)。
  结论:
  HMGB1的刺激下,RAW264.7巨噬细胞向M1和M2两个方向的极化都显著增加。而在破骨前体细胞阶段,HMGB1的刺激对M1极化分型相关基因的表达水平没有明显作用,而对M2极化分型相关基因的表达有明显的促进效应,可起到负反馈调节作用,促进组织修复。
[硕士论文] 周以欣
口腔医学 广西医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:分析口腔扁平苔藓(Oral Lichen Planus,OLP)患者疾病状态与焦虑、抑郁及人格维度的相关性,为疾病的临床防治提供一定理论基础。
  方法:纳入2017年2月至2018年3月在广西医科大学牙周黏膜科就诊的80例OLP患者,包括OLP糜烂型口腔扁平苔藓(Erosive Oral Lichen Planus,E-OLP)44例和非糜烂型扁平苔藓(Non-Erosive Oral Lichen Planus,NE-OLP)36例,另纳入49例健康志愿者作为对照组。患者组与对照组均采集病史、口腔检查,患者组记录患者疼痛度视觉类比标尺值(VAS)评分和REU评分系统。采用焦虑自评量表(Self—Rating Anxiety Scale,SAS)、抑郁自评量表(Self—Rating Depression Scale,SDS)及艾森克人格问卷(Eysenck Personality Questionnaire,EPQ)对扁平苔藓患者进行心理评测,结合患者疾病状态,应用SPSS22.0统计学软件对所得数据分析。
  结果:本研究纳入的研究对象在年龄和性别上均无差异。E-OLP患者的REU评分值与VAS值均高于NE-OLP组(P<0.01)。OLP组SAS分值高于对照组,差异有统计学意义。E-OLP组、NE-OLP组与对照组SAS分值和SDS分值均有差异,两两比较,E-OLP组SAS分值高于对照组,差异有统计学意义(P=0.005),E-OLP组的SDS分值高于对照组差异有统计学意义(P=0.010)。OLP患者抑郁阳性率(41%)高于对照组(20%),其中E-OLP焦虑阳性率(39%)和抑郁阳性率(50%)均高于健康对照组(20%)。通过逻辑回归分析,OLP患者主观抑郁阳性与外向倾分值、神经质分值呈正相关,E-OLP患者主观焦虑阳性与N值也呈正相关。病程大于等于1年的OLP患者抑郁阳性率高于对照组,其中病程大于等于1年的E-OLP患者焦虑阳性率和抑郁阳性率高于对照组。OLP患者主观抑郁阳性与病程正相关(r=0.314,P=0.005),OLP组胆汁质构成比最高(23%),对照组多血质构成比最高(20%)。
  结论:1.长病程可能与OLP患者主观抑郁阳性率有关,其中E-OLP患者更明显,主观焦虑阳性率亦高于健康对照人群。这可能由于病损部位疼痛不适,病损面积大引起,在临床上对于病程大于或等于1年的患者,可以适当给予心理疏导或耐心聆听。
  2.OLP患者中主观抑郁阳性与神经质、外向倾有关,E-OLP患者主观焦虑阳性与神经质有关,临床上可以正确引导患者应对疾病或困难的消极态度。
  (已选择0条) 清除
公   告

北京万方数据股份有限公司在天猫、京东开具唯一官方授权的直营店铺:

1、天猫--万方数据教育专营店

2、京东--万方数据官方旗舰店

敬请广大用户关注、支持!查看详情

手机版

万方数据知识服务平台 扫码关注微信公众号

万方选题

学术圈
实名学术社交
订阅
收藏
快速查看收藏过的文献
客服
服务
回到
顶部