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[博士论文] 姚国
临床医学(儿科学) 山东大学 2017(学位年度)
摘要:研究目的:
  妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)通常被公认为是一个严重危害胎儿的妊娠并发症。GDM是孕期首次发生的糖代谢异常。最近的研究表明,巨大儿在妊娠期糖尿病引起的不良妊娠结局中有一个明显的上升趋势。在巨大儿的围产期,伴随着更多的窒息、产伤、低血糖、死亡等风险。此外,许多研究表明,GDM诱导产生的巨大儿在后期生长发育过程中有患糖尿病、肥胖和动脉粥样硬化等其他代谢紊乱的风险。研究发现,GDM患者在孕前存在诱导妊娠期糖尿病发生的高危因素,如孕前体重指数、年龄、孕次等,但是这些高危因素与GDM诱导巨大儿发生的关系,目前尚不清楚。因此,通过对巨大儿发生与孕前危险因素的关系进行研究,有助于在孕前对高危因素进行早期预防和控制。
  妊娠期糖尿病存在孕期的高血糖、高血脂及胰岛素抵抗等代谢异常,这些代谢异常状态,可以导致经由胎盘进入胎儿血液循环中的糖脂代谢发生异常,进一步引起胎儿宫内能量代谢过剩,以脂肪形式存在胎儿体内,导致胎儿体重明显增加,以致出现巨大儿。目前研究显示,在孕期,早期检测及早期控制血糖可控制GDM诱导的巨大儿发生。有趣的是,即使将GDM孕期血糖控制在正常血糖范围,巨大儿的发生率仍未明显下降,这提示GDM诱导发生巨大儿,不仅和母体血糖有关,还存在其他更重要的因素。
  GDM孕妇分娩的巨大儿具有围产期高风险及在后期生长发育过程中心脑血管疾病的高发风险等特点。脐血作为胎儿提供血液供应的场所,脐血脂糖代谢在一定程度上严重影响了胎儿发育过程,脐血血脂、血糖代谢异常,是GDM产儿围产期及后期合并症的发病基础。因此研究胎儿宫内的异常代谢状态至关重要,目前由于操作受限,孕期胎儿代谢情况,主要通过产科超声进行评估。羊水指数、脐带血流指标等关键指示性指标,是临床进行胎儿生长发育评估和评价的重要指标。脐血糖脂代谢指标的变化与巨大儿发生的关系的研究,可以为探明巨大儿发生的机制及巨大儿远期并发症的研究提供一个新的切入点。
  除了母体代谢因素外,胎盘组织是连接母体与胎儿宫内环境的桥梁,起到转运营养物质的作用。胎盘组织蛋白表达的高低,直接影响了营养物质的跨胎盘转运。因此对于胎盘组织部位蛋白的研究,可以为GDM诱导巨大儿发生的机制提供一个新的研究平台。研究发现,在妊娠期糖尿病胎盘组织中,介导糖脂代谢信号转导通路的关键蛋白-腺苷酸活化的蛋白激酶(Adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)表达发生了显著地变化。且在以往的研究中提出,AMPK激活后可介导下游糖代谢和脂代谢。但对于AMPK介导的信号通路是否在GDM诱导的巨大儿发生过程中的起到关键信号通路作用目前尚不清楚。
  本实验目的在于探讨GDM诱导产生巨大儿的糖脂代谢相关危险因素,并通过研究胎盘组织部位AMPK介导的糖脂代谢信号转导通路的变化,对GDM诱导巨大儿的高危因素和具体机制进行更进一步研究,可以为减少巨大儿的产生和妊娠糖尿病母亲婴儿相关并发症提供帮助。
  研究方法:
  本研究依据GDM和巨大儿的诊断标准分将孕妇分为GDM组和正常糖耐量组,将新生儿分为GDM巨大儿组(GDMM),GDM正常出生体重儿组(GDMN)和正常糖耐量正常出生体重儿组(CON)。孕妇在孕晚期做超声检查,检测羊水指数、双顶径、股骨长、脐带血流指标等指标来估测胎儿宫内发育情况和新生儿出生体重。在孕妇阴道分娩或剖宫产时收集两组产妇顺产或剖宫产脐动脉血,用湿化学方法测定脐血中血脂指标、血糖指标。同时进行胎盘组织的收集,实验中为了减少RNA和蛋白质的降解,要求在胎儿娩出后立即剪取约1cm3胎盘组织取胎儿面的胎盘组织,用冷水快速冲洗组织,然后放入标记的冷冻管保存在80℃,以进一步提取蛋白质和总RNA。Western blotting检测差异表达的腺苷酸活化蛋白激酶(Adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)信号通路相关蛋白的表达,包括磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated-AMPKα(Thr172),p-AMPKα(Thr172))、AMPKα、乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase,ACC)、磷酸化的乙酰辅酶A羧化酶(phosphorylated-Acetyl-CoA carboxylase(Ser79),p-ACC(Ser79))、葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter1,GLUT1)在三组胎盘组织之间的差异性表达。胎盘组织ACC、GLUT1和AMPKα的mRNA水平用实时荧光定量PCR检测。
  临床数据和胎盘组织相关蛋白质和mRNA相对表达结果输出和分析用GraphPad Prism5.0分析软件进行定量。计量资料以“均数±标准差”表示,GDM与NGT组两组间的临床数据的比较采用单样本t检验,三组间的胎盘mRNA和蛋白表达比较用单因素方差分析(one-way ANOVA),组间两两比较采用SNK法。变量间相关性分析用Pearson相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。
  研究结果:
  1.孕妇一般特征
  (1)孕期基本特征:在孕中期,空腹血糖(FBG)GDM组水平比NGT组高1.06mmol/l,而血糖在孕晚期无统计学差异(P>0.05)。此外,GDM组与NGT组相比,孕妇的年龄、血压、产次均无统计学差异(P>0.05)。除此之外,GDM组存在糖尿病家族史4例,而NGT组中无糖尿病家族史。其中孕中期血糖与新生儿出生体重(NBW)呈正相关关系(P<0.05),孕晚期空腹血糖与NBW无明显相关性(P>0.05)。
  (2)孕前体重指数(Body mass index,BMI)和孕期增重:在孕期增重和孕前体重指数GDM组均明显高于NGT组(P<0.05)。且相关分析发现,NBW与孕妇孕前体重指数(BMI)和孕妇孕期增重均存在正的相关关系(P<0.05)。
  2.新生儿特点
  GDM组的新生儿出生体重(NBW)显著高于NGT组(P<0.05)。GDM组巨大儿发生率明显高于NGT组。同样,GDM组分娩的新生儿NBL平均值也明显升高(P<0.05);两组新生儿在胎龄、性别比例、胎盘重量、脐带长度等方面差异无统计学意义(P>0.05)。
  3.脐血糖脂代谢
  (1)脐血糖代谢:NGT组和GDM组两组胎儿脐血血糖无统计学差异(p>0.05)。且相关分析发现,脐血血糖与孕妇孕晚期血糖及新生儿出生体重均无明显的线性相关关系(p>0.05)。
  (2)脐血脂质代谢:GDM组较NGT组脐血HDL-C降低11.4%,ApoB/ApoA比值升高16%,两组间比较有显著性差异(P<0.05)。而两组间其他指标TC、TG、LDL-C、LP、ApoA和ApoB比较差异均无统计学意义(P>0.05)。
  4.胎儿孕晚期超声
  GDM组比NGT组羊水指数(AFI)高2.7,增加29.6%,差异有统计学意义(P<0.05)。其他指标:检查孕周(GA)、胎儿双顶径(BPD)、股骨长(FL)、S/D、RI和PI指标,两组间比较无统计学差异(P>0.05)。且相关分析发现,AFI与母体孕晚期血糖、新生儿出生体重均呈正相关关系(P<0.05)。
  5.胎盘组织蛋白表达
  (1)胎盘组织蛋白表达:GDM诱导的巨大儿胎盘组织中GLUT1和ACC蛋白高表达(P<0.05),而p-AMPKα(Thr172)和p-ACC(Ser79)低表达(P<0.05),AMPKα蛋白表达在三组之间无统计学差异(P>0.05)。且胎盘组织各蛋白与NBW进行相关分析发现,在GDM诱导的巨大儿胎盘组织中,GLUT1、ACC蛋白表达与NBW正相关,p-ACC(Ser79)和p-AMPK(Thr172)与NBW负相关(P<0.05)。但新生儿出生体重与AMPKα无明显相关关系(P>0.05),ACC蛋白表达仅在GDMM组胎盘组织中发现与新生儿出生体重存在正相关关系(P<0.05),而在GDMN组中不存在此关系(P>0.05)。蛋白间相关分析显示:p-AMPK蛋白表达与p-ACC蛋白表达正相关(P<0.05),而与GLUT1蛋白表达无明显相关性(P>0.05)。
  (2)胎盘组织蛋白mRNA表达:GDM诱导的巨大儿胎盘组织GLUT1mRNA高表达,AMPKα和ACC的mRNA低表达(P<0.05)。且相关分析发现,GDM诱导的巨大儿胎盘组织中GLUT1mRNA表达与NBW呈正相关,AMPKα和ACC mRNA与NBW呈负相关(P<0.05)。
  研究结论:
  1.孕前肥胖、超重及孕期增重过高均为GDM诱导巨大儿发生的高危因素。除了孕期血糖外,孕前控制体重,孕期控制增重可以减少巨大儿发生。
  2.胎盘组织GLUT1蛋白表达升高,可增加糖转运过多进入胎儿循环中,引起GDM诱导巨大儿的发生。
  3.胎盘组织中p-ACC蛋白表达降低和ACC蛋白表达升高,可导致脂肪酸含量过量,引起GDM诱导产生巨大儿。
  4.AMPK介导的信号转导通路在GDM诱导产生巨大儿过程中,主要影响脂代谢,而非糖代谢。
  5.妊娠期糖尿病诱导产生的巨大儿在宫内生长发育过程中存在HDL-C,ApoB/ApoA等脂代谢异常,且巨大儿后期生长发育过程中具有发生糖脂代谢异常的高风险。
[硕士论文] 马健
儿科学(新生儿) 山东大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  新生儿窒息指的是因为围生期(分娩前、分娩过程、分娩后)的各种原因导致的新生儿娩出后不能进行正常呼吸,引起缺氧并进一步产生全身多系统的损伤,是围产期新生儿不能存活或者遗留严重后遗症的主要原因之一。窒息的根本原因是机体的组织缺氧,窒息的时间越长,缺氧程度越重,造成的机体各系统、器官损害越严重。窒息的新生儿娩出后不能进行有效的呼吸,肺泡张开受阻,影响肺液吸收,不能形成有效的气体交换,引起缺氧。窒息时血氧饱合度降低,氧合差,无氧酵解增加、乳酸堆积,故可致患儿肺内小动脉持续收缩,动脉导管继续开放,血液经动脉导管分流到主动脉,使缺氧加重。Apgar评分是传统意义上国际上认可的评故新生儿窒息最便捷、实用的手段。但Apgar评分可受早产、某些先天畸形、产妇分娩前用药等原因影响,因此Apgar评分在判断新生儿窒息程度及估计预后方面存在一定局限,因此,近年来国内外的许多专家学者提出对生后窒息的新生儿进行动脉血气测定以为临床诊断与处理提供参考依据。临床中存在窒息的新生儿血气分析指标中PH偏低,乳酸值高,碱剩余绝对值增大,随着窒息的加重,缺氧加重,血气分析各项指标异常更加显著。本研究通过回顾性分析本院窒息新生儿的动脉血气分析各项指标,研究窒息新生儿的血气分析中乳酸、PH测定与Apgar评分、新生儿窒息程度的相关性,及对新生儿窒息的诊断、临床处理、预后判断的积极意义。
  方法:
  (一)研究对象
  选取2014年3月到2014年11月入住枣庄市妇幼保健院分娩的单胎足月窒息新生儿60例,均为生后1小时内入院。诊断标准依据《实用新生儿学》(第4版,邵肖梅等主编)。根据1分钟评分分为:重度窒息组11例(0-3分),轻度窒息组49例(4-7分)。另外再选取30例正常新生儿作为对照组进行对比分析(Apgar评分为8-10分)。对照组病例排除有胎儿宫内窘迫病史者。所有病例均排除先天性畸形、感染性疾病、遗传代谢性疾病等。其中包括49例男性新生儿,41例女性新生儿。各组患儿性别、出生体重、生产方式等均没有显著的统计学差异(P>0.05)。
  (二)研究方法
  1.新生儿外周动脉血标本采集及检测手段:所有新生儿均在出生后1小时内用肝素处理过的注射器抽取右手桡动脉血1ml,排气后立即密封,并于5分钟内进行检测。用全自动血气分析仪检测外周血PH、Lac、PaO2、PaCO2值。
  2.Apgar评分:参考《实用新生儿学》(第4版)邵肖梅等主编。新生儿出生后1分钟和5分钟常规进行Apgar评分。当5分钟评分<7分时,每隔5分钟评分1次,评分至20分钟。
  3.新生儿窒息分度:重度窒息:生后1分钟的Apgar评分≤3分,或者生后5分钟的Apgar评分≤5分,两者符合1条;轻度窒息:生后1分钟的Apgar评分>3分,但≤7分,或者虽然1分钟评分>7分,但5分钟Apgar评分≤7分,>3分。
  4.HIE诊断标准:参阅《实用新生儿学》(第4版)邵肖梅等主编。(1)病史:有明确的异常产科病理情况可以引起胎儿的宫内缺氧,有确切的胎儿宫内窘迫的证据;或者合并羊水三度污染,或分娩过程中有确切窒息史;(2)体格检查:出生后很快呈现神经系统异常表现,并症状存在超过24小时。(3)影像学检查支持。
  (三)统计学方法
  使用SPSS17.0统计学软件对所统计数据进行分析。均数士标准差代表资料中的计量数据,选用非参数秩和检验进行各个分类组之间的比较;选择卡方检验对计数资料进行分析,差异具有统计学意义。
  结果:
  1.本研究新生儿中,根据秩和检验结果,重度窒息组、轻度窒息组及对照组比较,pH、PaCO2、Lac之间存在差异,差异有显著统计学意义(P<0.05);重度窒息组、轻度窒息组及对照组相比,PH值降低,Lac升高。PaCO2在重度窒息组、轻度窒息组及对照组之间差异有统计学意义(P<0.05)。
  2.本研究60例窒息新生儿中,合并HIE者5例,其中放弃后死亡2例,死亡均为重度窒息者。
  3.轻度窒息组PH≤7.0者占6例(12.2%),PH大于7.0者43例(87.8%),重度窒息组PH≤7有6例(54.5%),大于7者有5例(45.5%),两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。
[硕士论文] 袁菲菲
儿科学 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:胎龄小于37周出生的新生儿称为早产儿,呼吸停止时间>20秒,伴有心率减慢<100次/分或出现青紫、血氧饱和度降低和肌张力低下,称为呼吸暂停。早产儿呼吸暂停是目前新生儿重症监护中面临的主要临床问题之一,若不能妥善治疗将引起一系列非常严重的并发症。甲基黄嘌呤类药物是治疗呼吸暂停最常用的药物,包括枸橼酸咖啡因和氨茶碱两种。国内自2013年引入枸橼酸咖啡因,之前一直沿用氨茶碱,目前还没有足够证据支持枸橼酸咖啡因治疗效果。本文的目的就是以meta分析的方式比较枸橼酸咖啡因与氨茶碱治疗早产儿呼吸暂停的临床疗效。
  方法:对PubMed、Embase、Cochrane registry of controlled clinical trials、Sinomed、CNKI、WanFang Data以及CQVIP等数据库进行系统检索自数据库建立至2016年3月31日的所有对比枸橼酸咖啡因与氨茶碱治疗早产儿呼吸暂停临床效果的RCTs研究。文章语言设置为中文与英文。采用改良Jadad量表评价文献质量并提取数据进行meta分析。
  结果:meta分析共纳入26篇相关研究的文章,早产儿呼吸暂停采用枸橼酸咖啡因进行治疗1-3天的有效率明显高于氨茶碱(86.33% vs64.92%,RR=1.33,P<0.00001),采用治疗1-3天呼吸暂停次数进行比较两者并无显著差异(MD=-0.01,P=0.83)。氨茶碱治疗的早产儿呼吸暂停不良反应发生率明显高于枸橼酸咖啡因治疗的患儿(36.75% vs11.30%,RR=0.32,P<0.00001),尤其是心动过速(RR=0.20,P<0.00001)、喂养不耐受(RR=0.34,P<0.00001)、烦躁激惹(RR=0.35,P=0.0001)、高血糖(RR=0.24,P<0.0001)及血压升高(RR=0.16,P=0.03)的发生率明显高于枸橼酸咖啡因治疗组患儿。
  结论:目前研究结果表明,枸橼酸咖啡因治疗早产儿呼吸暂停有效率高且副作用小,因而更适宜用于早产儿呼吸暂停。
[博士论文] 于嘉智
小儿外科学 山东大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  由于B超技术的进步,越来越多的婴幼儿包括早产儿在内的发育性髋关节发育不良在生后6月内被诊断并给予Pavlik吊带治疗,获得了满意的疗效,尤其是生后3月内诊断并给予治疗者,效果更好。然而,文献检索没有发现早产儿髋关节发育不良的诊断及治疗的报道,因此有必要分析一下早产儿DDH的B超观察情况及临床治疗效果。本研究目的按照Graf方法测量早产儿髋关节a角大小,并监测其变化情况,探索早产儿a角成熟规律。同时对于髋关节发育不良者给予Pavlik吊带治疗并分析其治疗效果,并分析Pavlik吊带治疗对发育性髋关节发育不良早产儿运动能力的影响。
  方法:
  对在我院2014年3月至2016年6月住院及门诊就诊的早产儿进行询问病史及查体,将有臀位产、有髋关节发育不良家族史、裹腿者、皮纹不对称、外展受限、Barlow试验及Ortlani试验阳性的早产儿列为观察对象,按照Graf超声法,行髋关节B超检查测量α角。共153例,306髋,其中女99例,男54例,检查时平均周龄36周,α角最小36.7度,最大63.2度,平均53.1度。其中α角小于43度18髋,43度至49度之间58髋,50度至59度之间198髋,60度以上32髋。采用SPSS19.0软件处理数据,以周龄为横坐标,α角度为纵坐标将306髋α角度绘制散点图,观察306髋α角度分布情况,使用直线回归统计方法分析周龄与α角之间的关系。4周后(相当于足月儿)复查B超,再次绘制散点图并再次进行直线回归分析,观察周龄增大与α角大小变化趋势,探讨分析周龄变化与α角大小变化是否呈线性关系。
  由于早产儿各系统发育不完善,髋关节发育不成熟,早产儿髋关节α角分布规律仍然不明确,避免过度治疗,因此将α角小于43度17例18髋即已出现半脱位或脱位者定为DDH组,给予Pavlik吊带治疗。其余136例272髋给予观察4周后(相当于足月)复查,按照Graf方法分型,如发现髋关节发育不良,给予Pavlik吊带治疗。DDH组共有17例18髋,其中女13例,男4例,单侧16例,双侧1例,1分钟Apgar评分6.117±1.536分,5分钟Apgar评分8.059±1.197分,出生时平均周龄34+1周,治疗时平均周龄35+6周。按照Graf方法分型,I型髋关节15髋,均为可复位性,Ⅳ型髋关节3髋,其中2髋为可复性,1髋为难复性。这17例18髋均使用Pavlik吊带治疗,并2周复查一次,复查2次确定复位后改为4周复查一次,α角达到60度后继续治疗4周停止治疗,治疗时间最短14周,最长18周,平均16周。纠正月龄6月时复查X片,随访时间最长29个月,最短6个月,平均18个月。
  由两名经专业培训的医师按照婴儿运动能力测试(TIMP第五版)方法评估DDH组治疗前、治疗后及相同年龄对照组运动能力变化情况并评分,取平均值为其TIMP分值。对照组为20名平均胎龄35+6周早产儿,其中女11例,男9例,出生时平均周龄34+5周,治疗时平均周龄36周,1分钟Apgar评分6.150±1.268分,5分钟Apgar评分8±0.973分。同样由两名经专业培训的医师对20名早产儿在开始时及4月后进行TIMP评分,取平均值为其TIMP分值。t检验分析DDH组与对照组Apgar评分差异,来评估两组间缺氧因素的影响。t检验分析DDH组治疗前、治疗后TIMP评分值差异,并与同龄对照组评分值的进行比较。Pearson相关分析法分析DDH组TIMP分值与1分钟Apgar评分值、5分钟Apgar评分值、吊带治疗周数、出生周龄及α角大小的相关性。
  结果:
  一、α角分布规律:散点图显示35周至36周早产儿306髋α角多位于50度至60度之间,随着胎龄的增加,α角也逐渐增大,直线回归分析发现胎龄与α角呈线性关系,直线回归方程:Y=-91.334+4.008x。观察4周后复查α角并绘制散点图,发现随着胎龄的增加α角也逐渐增大,直线回归分析显示胎龄与α角依然呈线性关系,直线回归方程Y=-73.654+3.264x。
  二、临床结果:306髋中共有45髋给予了吊带治疗,占比14.71%。其中DDH组的18髋吊带治疗2周后复查时均得到复位,经X线随访,有1例难复性Ⅳ型髋关节发育不良出现股骨头骨化中心延迟出现,没有出现股骨头坏死,没有发现脱位及半脱位。
  α角位于43度至49度之间的58髋,有3髋因对侧α角小于43度给予吊带治疗,其余50例55髋给予观察4周(相当于足月儿),结果发现有13髋α角未达到50度,根据Graf分型,属于Ⅱc型髋关节,均给予Pavlik吊带治疗,其余病例继续观察,定期4周复查一次彩超,有10髋α角未达到60度,根据Graf分型,属于Ⅱa(-)型髋关节,均给予Pavlik吊带治疗。本组58髋在共有23髋给予了吊带治疗,占比39.6%,经B超及X线随访20髋获得满意效果,3髋失访。
  α角位于50度至59度的198髋,10髋因对侧α角均小于43度给予吊带治疗,9髋对侧α角位于43度至49度经随访4周未达到50度给予吊带治疗,其余179髋有4髋(占比2.1%)在纠正胎龄3月时α角未达到60度,均给予Pavlik吊带,1例恢复满意。2例治疗后失访,1例因心脏手术中断治疗后失访。
  三、Pavlik吊带治疗对早产儿运动能力的影响:DDH组Pavlik吊带治疗后运动能力较前下降较明显,通过婴儿运动能力测试评分发现,DDH组治疗之前TIMP分值为71.059±9.371分,吊带治疗之后TIMP分值为62.764±11.840分,较治疗之前明显降低,将两组间的差异行t检验分析,t=12.307,p<0.01,差异有统计学意义。对照组初始TIMP分值74.125±8.705分,4月后TIMP分值84.150±7.569,较前有所增长,t检验分析,t=8.369,p<0.01,差异有统计学意义。t检验分别分析两组1分钟Apgar评分及5分钟Apgar评分,差异无统计学意义,说明两组早产儿围生期缺氧处于同等水平。t检验分析DDH组治疗前TIMP分值与对照组初始TIMP分值,t=1.053,p>0.05,无统计学意义,提示两组早产儿运动能力处于同一水平,而DDH组经吊带治疗后TIMP评分明显下降,与对照组4月后TIMP评分比较,t=6.644,p<0.01,差异有统计学意义。t检验分析显示DDH组经吊带治疗后TIMP分值均低于治疗前及同龄对照组,提示DDH组经吊带治疗后运动能力是明显降低的。Pearson相关分析发现DDH组治疗后TIMP分值降低的数值与出生周龄、治疗时周龄、治疗周数、1分钟Apgar评分、5分钟Apgar评分及α角的相关系数p分别为0.696、0.174、0.230、0.829、0.701、0.083,说明DDH组治疗后TIMP分值与1分钟Apgar评分极强相关,与出生周龄及5分钟Apgar评分强相关,与治疗周数弱相关,与治疗时周龄及α角无相关。根据t检验分析结果和Pearson相关性分析结果,得出结论:14至18周的Pavlik吊带治疗均能导致DDH组早产儿运动能力下降,下降程度与1分钟Apgar评分极强相关,与早产时间及Apgar评分强相关,与α角(小于43度)大小不相关。
  结论:
  一、35周至36周有高危因素的早产儿髋关节发育不成熟,α角多位于50度至60度之间,随着周龄增大,α角逐渐增大,趋势呈线性,且多能达到正常范围。
  二、有高危因素的早产儿DDH发病率为14.71%,明显高于正常足月儿,建议尽早完成髋关节超声检查。对于α角位于50度至59度之间的早产儿有2.1%髋关节出现发育不良,建议避免绑腿,定期随访至发育正常,如果出现髋关节发育不良应给予Pavlik吊带治疗,能取得满意疗效。对于α角位于43度至49度之间者观察12周后有39.6%髋关节出现发育不良,应尽早给予Pavlik吊带治疗,尤其是46度以下者好转可能小,建议发现后即给予吊带治疗,能取得满意疗效。对于α角小于43度者,建议发现后即给予Pavlik吊带治疗,能取得满意疗效。
  三、早产儿DDH给予Pavlik吊带治疗后患儿运动能力较前下降,早产时间越早及Apgar评分越低,运动能力下降越明显。建议在不影响Pavlik吊带治疗的情况下,可以在治疗期间给予相应的感官刺激及肢体训练,在提高运动能力的同时,也能减轻Pavlik吊带治疗对早产儿运动能力的影响。治疗结束后应给予一定康复锻炼,经过康复训练多能逐渐改善。
[硕士论文] 黄子琳
临床医学(儿科) 汕头大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  探索新生儿肺动脉高压值与血流右向左分流程度和治疗策略的关系,指导临床对新生儿持续性肺动脉高压病人病情的评估及治疗方案的选择。
  方法:
  选取我院(深圳市儿童医院)2015年10月至2017年2月期间入住新生儿科可疑或明确新生儿肺动脉高压的患儿23例以及正常新生儿23例,采用彩色多普勒超声诊断仪,测定三尖瓣反流量、动脉导管两侧流速峰值,动脉导管分流病人的肺动脉及主动脉内径,计算肺体循环血流量比值(Qp/Qs),Qp/Qs波动于1.0-1.5为右向左分流量少组(简称为分流量少组)及Qp/Qs波动于0.6-0.9为右向左分流量多组(简称为分流量多组)。通过t检验、非参数检验、卡方检验等统计学方法统计,比较分流量多组及分流量少组右向左分流的肺动脉压力值、血氧饱和度及治疗策略选择。
  结果:
  1.分流量少组肺动脉压力值45.08±6.36mmHg、经皮血氧饱和度73.58±6.79%,分流量多组肺动脉压力值56.27±12.80mmHg、经皮血氧饱和度64.45±9.83%,两组肺动脉压力值比较P<0.05,两组经皮血氧饱和度比较P<0.05,均具有统计学差异,即分流量多组肺动脉压力值高于分流量少组肺动脉压力值;分流量多组血氧饱和度低于分流量少组血氧饱和度。
  2.分流量少组及分流量多组中单纯NO吸入组的肺动脉压力值比较P>0.05,无统计学差异,即分流量少组及分流量多组中单纯NO吸入组的肺动脉压力值无差别;分流量多组中单纯NO吸入组及NO吸入联合扩管组的肺动脉压力值比较P<0.05,具有统计学差异,即分流量多组中NO吸入联合扩管治疗的肺动脉压力值高于单纯NO吸入组;分流量少组中单纯NO吸入组及分流量多组中NO吸入联合扩管组的肺动脉压力值比较P<0.05,具有统计学差异,即分流量多组中NO吸入联合扩管的肺动脉压力值高于分流量少组中单纯NO吸入组。
  结论:
  1.当肺动脉压力值为56.27±12.80mmHg时,右向左分流量大于50%。
  2.分流量少患儿,多予单纯NO吸入治疗即可,分流量大患儿,肺动脉压力值59.50±7.56mmHg时,考虑NO吸入联合扩管治疗更有效。
[硕士论文] 曾照军
儿科学 湖北医药学院 2017(学位年度)
摘要:目的:观察新型外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)供体GYY4137对坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)大鼠肠黏膜的保护作用,并初步探讨其可能的作用机制。
  方法:取70只健康新生SD大鼠,按随机数表法随机分成五组,除正常对照组为10只外,其余四组均为每组15只。正常对照组,不施加任何干预;NEC模型组,通过人工代乳品喂养、缺氧-冷刺激、腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide LPS)方法制备NEC模型;H2S干预组,在NEC模型组已有干预的基础上,腹腔注射H2S供体GYY4137;Nrf2-ARE通路抑制剂组,在H2S干预组已有干预的基础上,腹腔注射Nrf2-ARE通路抑制剂全反式维甲酸(all-trans retinoic acid ATRA);血红素加氧酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)抑制剂组,在H2S干预组已有干预的基础上,腹腔注射HO-1抑制剂锌原卟啉(zinc protoporphyrin,Znpp)。其中NEC组肠黏膜病理评分≥2视为NEC建模成功。于试验第4天空腹12h后处死各组大鼠,取回盲部肠管进行HE染色并作组织病理学评分;用相关试剂盒检测各组新生大鼠肠组织中丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量及总超氧化物歧化酶(total Superoxide dismutase,T-SOD)活性,肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白介素6(interleukin-6,IL-6)水平;用Western Blotting检测各组肠组织Nrf2、HO-1蛋白表达情况。
  结果:NEC组病理评分≥2,表明本实验采用的建模方法有效。NEC组与正常对照组相比,肠黏膜病理评分明显增加,T-SOD活性显著下降,MDA、TNF-α、IL-6含量明显上升,差异具有统计学意义(P<0.05);H2S干预组同NEC模型组相比,肠黏膜病理评分降低,MDA、TNF-α、IL-6含量明显下降,T-SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.05),Nrf2、HO-1蛋白表达增加;Nrf2-ARE通路抑制剂组与H2S干预组相比,肠黏膜病理评分增加,MDA、TNF-α、IL-6含量明显升高,T-SOD活性降低,差异有统计学意义(P<0.05),Nrf2、HO-1蛋白表达下降;HO-1抑制剂组较H2S干预组相比,肠黏膜病理评分明显增加,T-SOD活性明显下降,MDA、TNF-α、IL-6含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Nrf2-ARE通路抑制剂组与HO-1抑制剂组相比,肠黏膜病理评分、MDA、TNF-α、IL-6含量、T-SOD活性差异均不具有统计学意义(P>0.05)。
  结论:新型H2S供体GYY4137能够保护NEC大鼠肠黏膜,增加T-SOD活性,降低MDA、TNF-α、IL-6含量,该过程伴随Nrf2-ARE/HO-1通路的显著激活。故推测H2S可能通过激活Nrf2-ARE/HO-1通路发挥对NEC大鼠肠黏膜的保护作用。
[硕士论文] 张燕雨
临床医学 江苏大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  建立早产大鼠肺泡 II型上皮细胞(Alveolar type II Epithelial Cell,AECII)原代培养高氧细胞损伤模型,研究泛素蛋白酶体途径(Ubiquitin Proteasome Pathway,UPP)对高氧暴露下内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress,ERS)诱导 AECII凋亡的影响。
  方法:
  早产大鼠 AECII原代培养,随机分为空气组和高氧组,分别用空气和950 mL/L O2进行干预,其中部分高氧组利用蛋白酶体抑制剂 MG132进行干预,以 DMSO作为对照。空气或高氧暴露24、48和72 h后,于倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexin V-FITC/PI)双染法结合流式细胞术检测细胞凋亡;特异性荧光底物检测20s蛋白酶体活性,实时荧光定量 PCR(Real-Time PCR,RT-PCR)检测 GRP78、CHOP和泛素(Ubiquitin,Ub)mRNA表达;Western blot法检测细胞内 GRP78、CHOP、总泛素化蛋白及凋亡相关蛋白 Bax、Bcl-2和 Caspase-3的表达;免疫荧光染色后荧光显微镜下观察 Caspase-3的表达。
  结果:
  (1)空气或高氧暴露24、48和72h后,与同时间点空气组相比,高氧组AECII细胞数量减少,细胞形态不规则且出现空泡样改变;细胞凋亡检测显示高氧组 AECII凋亡增加,差异具有统计学意义(P均<0.05);高氧组 AECII中20s蛋白酶体活性降低,而 GRP78、CHOP和 Ub mRNA的表达增加,同时AECII中 GRP78、CHOP和 Caspase-3蛋白表达增加,Bax/Bcl-2比值上升,总泛素化蛋白表达增加,差异均具有统计学意义(P均<0.05);
  (2)与高氧+DMSO组相比,高氧+MG132组 AECII凋亡增加,差异具有统计学意义(P<0.05);高氧+MG132组 AECII总泛素化蛋白、GRP78、ATF4、CHOP和 Caspase-3蛋白表达明显上调,Bax/Bcl-2比值上调,差异均具有统计学意义(P均<0.05);荧光显微镜下高氧+MG132组 AECII中 FITC标记的 Caspase-3绿色荧光增多。
  结论:
  (1)高氧暴露引起 AECII发生 ERS,使20s蛋白酶体活性降低,泛素化蛋白降解减少,诱导 AECII凋亡。
  (2)利用 MG132抑制蛋白酶体活性,可增强高氧暴露下 ERS诱导的AECII凋亡。
[硕士论文] Monica(莫妮卡)
临床医学 东南大学 2017(学位年度)
摘要:尽管随着新生儿重症监护技术的成熟、肺表面活性物质的使用及机械通气技术的发展,新生儿呼吸窘迫综合征(Neonatal Respiratory distress syndrome,NRDS)的病死率有所下降,但其仍是新生儿重症监护病房中最常见的呼吸系统疾病,多见于早产儿,且胎龄越小发病率越高。近年来有研究指出足月或近足月儿RDS的发病率明显升高,认为可能与择期剖宫产率增加有关。而足月或近足月儿RDS的危险因素、临床表现、治疗、并发症与预后早产儿存在明显差异。因此,有必要对其进行进一步研究,以指导临床预防及治疗。
  目的:
  本研究旨在根据不同胎龄对病例进行比较
  1)通过调查早期早产儿、晚期早产儿和RDS患儿的不同临床特点和发病率,为临床治疗提供新的依据;
  2)了解不同风险因素之间的相关性,呼吸窘迫综合征的临床特征及治疗(RDS)在不同胎龄儿:早期早产儿组(<34周),晚期早产儿组(34~36+6周)和足月组(≥孕37周)送入新生儿监护单位(NICU),为评估疗效和预后提供依据。
  方法:
  1.研究对象和分组:
  收集2011年01月至2014年12月,东南大学附属中大医院新生儿科住院诊断NRDS患儿共524例,按胎龄分为三组,分别为早期早产儿(<34周,228例),晚期早产儿组(34周~36+6周,162例)和足月的婴儿组(≥37周,134例),对其进行回顾性病例分析研究。
  2.方法:
  对所有524例NRDS患儿进行以下方面分析:
  (1)发病率:每年在NICU所有住院患儿中诊断RDS的比例以及不同胎龄发生RDS的构成比;
  (2)一般情况:包括性别、Apgar评分(生后1min,5min),出生体重、孕产妇年龄、产前糖皮质激素使用情况以及住院时间;
  (3)危险因素:择期剖宫产、胎儿宫内窘迫、新生儿窒息、胎膜早破、胎盘、羊水异常、双胎、妊娠期疾病;
  (4)治疗:CPAP、有创机械通气(常频/高频通气)的应用和重复剂量肺表面活性物质使用;
  (5)并发症:肺炎、败血症、气胸、ICH、HIE、ROP、BPD、先天性心脏病CHD、黄疸、贫血、甲状腺功能减退等。
  (6)预后:包括治疗结局,好转或治愈,放弃和死亡率。
  3.统计学方法:
  应用SPSS20.0软件进行统计学数据分析,定量资料以均数±标准差((x)±s)表示。采用单因素方差分析方法进行组间比较。定性资料以率(%)表示,采用卡方检验。P<0.05为具有统计学意义。
  结果:
  RDS多见于早产儿。近四年内(2011-2014),每年RDS患儿占总住院患儿的比例分别为13.1%、15.5%、8.6%and11.6%。早期早产儿的RDS发病率有显著升高。RDS的男性比例高于女性,尤其是在胎龄和体重明显优势的不同组间。早期早产儿的产前糖皮质激素比例和住院时间明显高于其他两组(P<0.05),有统计学意义。在本研究中,通过比较三组RDS新生儿危险因素,发现选择性剖宫产,宫内窘迫,双胞胎或三胞胎,胎膜早破,羊水异常有统计学差异(P<0.05)。剖宫产率在三组均高,特别是足月(78.4%)和晚期早产组(72.2%)。早产儿RDS的危险因素有:出生窒息、胎膜早破、胎盘异常、妊娠期高血压,双胎,而足月新生儿RDS的危险因素主要是择期剖宫产,感染与男性性别。PS在早期早产儿组的应用和重复给药的比例较其他两组高,有显著统计学差异(P<0.05)。足月新生儿组常频机械通气比例明显高于早产儿,但是肺炎、持续肺动脉高压、缺血缺氧性脑病和气胸发生率更高(P<0.05)。早期早产儿组ICH、ROP、败血症、黄疸、贫血及死亡率高于其他两组。三组间肺出血、支气管肺发育不良,动脉导管未闭和放弃治疗率无明显统计学差异。
  结论:
  NRDS主要发生在早产儿。不同胎龄RDS新生儿的高危因素、并发症及治疗反应均存在差异,因此在诊断和治疗的时候需考虑胎龄因素。足月儿RDS常见危险因素为择期剖宫产、感染和男性,故而应严格控制择期剖宫产率,以减少RDS的发生率。
[硕士论文] 王萌萌
儿科学 石河子大学 2017(学位年度)
摘要:目的:检测钙敏感受体(CaSR)和II型11β羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD2)在新生小鼠PPHN模型中小鼠肺组织中的表达,探讨CaSR激动剂及抑制剂在新生小鼠PPHN模型中对CaSR和11β-HSD2的表达影响,明确其在新生小鼠PPHN模型中的作用及意义。
  方法:SPF级c57bl/6小鼠,怀孕产仔后将实验组母鼠和新生小鼠(n=37)暴露在12%的氧浓度中,随机分为低氧组(PPHN组)(n=11)、低氧+激动剂组(n=13)、低氧+抑制剂组(n=13);对照组母鼠和新生小鼠(n=10)暴露在空气中。激动剂组和抑制剂组每日分别给予GdCl316 mg/kg、NPS23901 mg/kg腹腔注射一次,每组所有的处理时间均持续14天。后行病理检查和免疫组织化学检查肺血管的变化;采用激光共聚焦技术观察在新生小鼠肺组织中CaSR和11β-HSD2的表达位置及含量;RT-PCR技术检测新生小鼠肺组织中CaSR和11β-HSD2 mRNA的表达;蛋白质印迹法检测新生小鼠肺组织中CaSR和11β-HSD2蛋白的表达。
  结果:
  1)与对照组相比,实验组肺小动脉血管壁厚度占外径百分比(WT%)及右心室与左心室壁厚度比(RV/LV)均较对照组明显增大,模型验证成功;
  2)与对照组相比,PPHN组CaSR表达明显增加,激动剂组增加更加明显,而抑制剂组表达减少(均P<0.01)。
  3)与对照组相比,PPHN组11β-HSD2在肺血管上的表达下降,激动剂组进一步降低而抑制剂组增强了其表达。
  结论:持续低氧建立新生小鼠持续性肺动脉高压动物模型是一种比较有效、可靠的方法; CaSR和11β-HSD2在肺血管上表达,并参与了低氧诱导的新生小鼠持续性肺动脉高压,可能发挥重要作用。
[硕士论文] 李昌健
儿科学 湖北医药学院 2017(学位年度)
摘要:目的:探讨窒息对新生小鼠β受体的影响及β2受体激动剂对未成熟心肌细胞是否具有保护性。
  方法:第一部分取出生3天的ICR小鼠36只,随机数字表法编号,分别于小鼠生后3、5、7、14、21、28天随机从中各取6只,开胸取出心肌组织,分别进行免疫组化及western蛋白印迹法检测心肌β1、β2受体表达。第二部分取出生3天的ICR小鼠12只,采用随机数字表法随机分为2组,对照(Control, CTL)组(n=6只)仅置于广口瓶中,不做窒息处理。窒息(Asphyxia, AS)组(n=6只)参照新生鼠常压窒息模型进行窒息处理,各组小鼠均开胸取出心肌组织,分别进行免疫组化及western蛋白印迹法检测心肌β1、β2受体表达。第三部分取出生3天的小鼠36只,采用随机数字表法随机分为3组,CTL组(n=12只)仅置于广口瓶中,不做窒息处理。AS组(n=12只)参照新生鼠常压窒息模型进行窒息处理。非诺特罗(Fenoterol, FEN)组(n=12只)在窒息处理前2小时予以非诺特罗前期给予1次,余处理同AS组。分别在各组小鼠出生3天、28天行心脏超声检测小鼠心率及左心室射血分数,开胸取心脏组织,免疫组化及western蛋白印迹法检测心肌β1、β2受体表达。
  结果:
  1.CTL组出生第3、5、7、14、21、28天各组小鼠β1受体表达随着鼠龄增长逐渐增加,28天小鼠β1受体表达明显高于3天小鼠(P<0.05);
  2.CTL组出生第3、5、7、14、21、28天各组小鼠β2受体表达随着鼠龄增长逐渐减少,28天小鼠β2受体表达明显低于3天小鼠(P<0.05);
  3.与CTL组相比,AS组3天小鼠心肌β1、β2受体均出现明显下调(P<0.05);
  4.CTL组3天正常小鼠心肌细胞排列整齐,细胞核清晰,细胞膜完整,无炎性细胞渗出、心肌细胞水肿及坏死。AS组3天小鼠进行窒息处理后,心肌细胞排列紊乱,有少许炎性细胞渗出。AS组3天小鼠相比于 CTL组,心率上升(P<0.05),LVEF%明显降低(P<0.05),HB/WB比对比无明显差异(P>0.05),提示心肌损伤;
  5.与CTL组28天小鼠相比,AS组HW/BW比升高,FEN组HW/BW比降低, FEN组较AS组HW/BW降低(P<0.05);
  6.与CTL组28天小鼠相比,AS组心率降低,FEN组心率升高,但三组组间互无明显差异(P>0.05);
  7.与CTL组28天小鼠相比,FEN组及AS组LVEF%均降低,FEN组对比AS组LVEF%升高(P<0.05);
  8.与CTL组28天小鼠相比,FEN组及AS组β1、β2受体表达均降低,FEN组β1受体相比于AS组有升高趋势,无统计学意义(P>0.05),FEN组β2受体相比于AS组有升高趋势(P<0.05)。
  结论:
  1.正常小鼠心肌β1、β2受体表达在一定的时间段内可以随着鼠龄变化而发生改变,主要表现为β1受体表达上调,β2受体下调;
  2.窒息3天小鼠出现心率增快、LVEF%下降,提示窒息可以引起心肌损伤;
  3.窒息所致新生3天小鼠心肌损伤后,心肌β1、β2受体均出现大量下调;
  4.特异性β2受体激动剂非诺特罗处理后的窒息小鼠相比于单纯窒息小鼠, HW/BW更低,LVEF%升高,β2受体增加,提示非诺特罗可以改善心肌功能,可能是通过提高β2受体活性来发挥作用。
[硕士论文] 施尚威
中西医结合临床 福建中医药大学 2017(学位年度)
摘要:目的:探讨新生儿窒息与母亲孕期体质的关系,为针对性调理母亲孕期体质从而为预防新生儿窒息提供新思路。
  对象与方法:
  1.研究对象及分组
  选择2016年2月至2016年12月就诊于南京军区福州总医院儿科新生儿重症监护室的符合纳入标准的100例窒息新生儿及其母亲作为新生儿窒息组(窒息组),另选择同期出生的100例健康新生儿及其母亲作为健康足月儿组(对照组)。
  2.方法
  按照《中医体质分类与判定表》标准,进行横断面抽样调查方法,对纳入研究的母亲怀孕4个月至分娩时身体实际情况进行体质调查。分析新生儿窒息组与健康足月儿组的母亲孕期中医体质差异情况。
  结果:
  1.根据偏颇体质标准分最大值法判定的中医体质分型,新生儿窒息组分别是平和质17例、气虚质6例、阳虚质29例、阴虚质4例、痰湿质11例、湿热质7例、血瘀质2例、气郁质24例、特禀质0例;健康足月儿组分别是平和质53例、气虚质3例、阳虚质7例、阴虚质13例、痰湿质3例、湿热质11例、血瘀质3例、气郁质5例、特禀质2例;
  2.新生儿窒息组偏颇体质类型出现频次,最多为阳虚质29例,其次为气郁质24例;健康足月儿组偏颇体质类型出现频次,最多为阴虚质13例,其次为湿热质11例。
  3.两组间体质构成比有差异(P<0.001),其中新生儿窒息组阳虚质、气郁质比例明显高于健康足月儿组;健康足月儿组平和质比例明显高于新生儿窒息组。
  结论:
  1、新生儿窒息组母亲孕期体质主要以偏颇体质为主,健康足月儿组母亲孕期体质以平和质为主;两组间母亲孕期体质构成比有差异(P<0.001)。
  2、新生儿窒息组母亲孕期偏颇体质以阳虚质、气郁质比较多见。
[硕士论文] 鞠慧敏
临床医学 江苏大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  多种危险因素包括高氧作用于早产儿,特别小早产儿不成熟的肺组织可导致支气管肺发育不良(BPD)的发生。肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)形态及功能变化在肺发育和 BPD发生发展中发挥重要作用,内质网应激(ERS)凋亡途径参与多种疾病病理过程,其中CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)是ERS重要下游信号通路。本研究拟利用原代培养AECⅡ探讨CHOP介导ERS途径对高氧暴露诱导的AECⅡ凋亡的影响。
  方法:
  SD雌雄大鼠交配,雌鼠孕19~20 d时剖腹取胎鼠,取胎鼠肺组织培养AECⅡ原代细胞用于后续实验。原代AECⅡ随机分为空气组、高氧组,细胞培养24、48及72 h后收集两组细胞,其中高氧组经过95%高氧处理,而空气组直接暴露于空气中,两组细胞分别经倒置相差显微镜观察形态学改变,Annexin V/PI双染流式细胞术检测AECⅡ凋亡,qRT-PCR及Western blot分别检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子4(ATF4)、需肌醇酶1(IRE1)、活化转录因子6(ATF6)、X盒结合蛋白1(XBP1)、激酶R样内质网激酶(PERK)及C/EBP同源蛋白(CHOP)等mRNA及蛋白质表达情况,及免疫荧光法观察CHOP定位及表达。
  结果:
  (1)AECⅡ原代培养:成功利用胎肺组织培育出原代AECⅡ细胞。
  (2)AECⅡ高氧损伤模型建立:高氧暴露后,AECⅡ透光度减少,细胞逐渐伸展,形态表现不规则,细胞内点状颗粒聚集,呈空泡化改变的细胞增多,且呈漂浮状态的死细胞增多。
  (3)AECⅡ细胞凋亡:在各时间点,空气组AECⅡ凋亡不明显,同时间点高氧组AECⅡ凋亡率则显著增加,且给氧时间越长AECⅡ凋亡率越高(P均<0.05)。
  (4)qRT-PCR检测GRP78、CHOP、PERK、IRE1、ATF6、XBP1和ATF4 mRNA的表达:各时间点,GRP78、CHOP、PERK、IRE1、ATF6、XBP1和ATF4 mRNA在高氧暴露组AECII中表达较同时间点空气组均明显增加,差异有统计学意义(P均<0.05)。且经高氧处理时间延长,各待检测因子 mRNA表达水平渐增加(P均<0.05)。
  (6)Western blot检测GRP78、CHOP、PERK、IRE1、ATF6、XBP1和ATF4的表达:与同时间点空气组相比,高氧暴露组各时间点AECⅡ中GRP78、CHOP、PERK、IRE1、ATF6、XBP1和ATF4蛋白表达显著增加,差异有统计学意义(P均<0.05)。且高氧组各因子蛋白表达含量随着给氧时间加长呈逐渐上升趋势(P均<0.05)。
  (7)免疫荧光检测 CHOP表达:结果示在各个时间点,高氧组荧光强度明显强于空气组,提示氧暴露后CHOP表达量较前增多,而空气组CHOP表达均不明显荧光强度弱(P均<0.05)。
  结论:
  (1)高氧暴露可增加原代培养AECⅡ细胞凋亡率。
  (2)高氧暴露可启动ERS参与原代培养AECⅡ凋亡。
  (3)CHOP介导的ERS途径可能参与高氧暴露后AECⅡ凋亡发生。
  (4)这三条信号通路,包括 PERK、IRE1及ATF6,可能均在CHOP介导的AECⅡ凋亡中发挥着重要作用。
[硕士论文] 王燕彬
儿科学 石河子大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  探讨热休克蛋白70(HSP70)对新生儿窒息的诊断价值及其与不同窒息程度新生儿行为神经测定(NBNA评分)的关系。
  方法:
  选择2014年1月至2016年5月本院产科出生的足月窒息新生儿,根据其窒息程度分为轻度窒息组和重度窒息组;另随机选取Apgar评分正常的足月新生儿为对照组。所有入选新生儿生后立即抽取脐动脉血,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组HSP70表达水平,并在生后第7、14、28天行NBNA评分,比较各组间HSP70表达水平和NBNA评分与窒息的相关性。
  结果:
  共纳入窒息新生儿81例,其中轻度窒息组46例,重度窒息组35例,对照组共纳入50例。各组新生儿脐血HSP70的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),其中轻、重度窒息组HSP70的表达水平高于对照组[(14.4±2.7)ng/ml、(17.7±2.6)ng/ml比(11.9±2.3)ng/ml,P<0.05],且重度窒息组高于轻度窒息组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组新生儿于生后第7、14、28天行 NBNA评分比较差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示:HSP70水平与 NBNA评分(第7、14、28天)呈负相关(r=﹣0.574、﹣0.493、﹣0.208,P均<0.05)。新生儿窒息的曲线下面积(AUC)值为0.798(95%CI:0.722~0.874,P<0.05), HSP70为12.9 ng/ml,约登指数最大,灵敏度84%,特异度68%。
  结论:
  脐血HSP70的表达水平与新生儿窒息程度和NBNA评分相关,窒息程度越重, HSP70表达水平越高,NBNA评分越低。
[硕士论文] 吴敬芝
儿科学 石河子大学 2017(学位年度)
摘要:目的:探讨新生儿脐动脉血血清淀粉样蛋白A(SAA),白细胞介素-6(IL-6)表达水平及效能。
  方法:收集2015年5月至2016年4月我院产科新分娩86例断脐后立即取脐动脉新生儿血3ml(极危重组13例、危重组23例、非危重组20例、正常组30例),应用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法进行血清SAA,IL-6水平测定,比较四组血清 SAA,IL-6水平变化;采用受试者工作特性曲线(ROC)确定 SAA, IL-6诊断新生儿危重症的适宜切点位,计算其判断新生儿危重症的敏感度、特异度。统计分析:应用 SPSS17.0统计软件进行数据处理。计量资料以均数±标准差(-x±s)表示,计数资料采用百分率表示,多组均数比较采用单因素方差分析及q检验。计数资料应用卡方检验。两变量间的相关性用pearson相关分析,等级资料相关性用 Spearman秩相关分析。诊断价值评价采用受试者工作特征曲线(ROC);适宜切点确定采用约登指数最大法;统计学处理取双侧检验,以p<0.05为差异有统计学意义。
  结果:
  1.病例组脐血SAA水平明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);不同程度病情新生儿脐血SAA水平的差异有统计学意义(P<0.05),且病情越重,SAA水平越高。
  2.病例组脐血IL-6水平明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.001);不同程度病情新生儿脐血IL-6水平的差异有统计学意义(P<0.001),且病情越重,IL-6水平越高。
  3.危重症新生儿脐血SAA与IL-6水平呈正相关(r=0.729,P<0.001)。
  4.新生儿脐血SAA表达水平与新生儿危重症程度的关系:病情程度越重,SAA表达水平越高,两者呈正相关(r=0.769,P<0.001)。
  5.新生儿脐血IL-6水平与新生儿危重症程度的关系:病情程度越重,IL-6表达水平越高,两者呈正相关(r=0.934,P<0.001)。
  6.脐血SAA、IL-6水平对诊断新生儿危重症程度ROC曲线下面积分别为0.925(95%CI0.867~0.983, P<0.01),0.945(95%CI0.902~0.988,P<0.01),SAA,IL-6适宜切点分别在1.27,39.76处,其敏感度、特异度分别依次为83.9%、96.7%;76.8%、96.7%。
  结论:脐血SAA、IL-6能反映出患儿病情严重程度,可作为早期的判断危重症新生儿病情。同时, SAA、IL-6也具有较高的敏感性,特异度,可在新生儿危重症的病情评估中应用。
临床医学 东南大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  新生儿管理的最新成果是超低出生体重儿(ELBW)和极低出生体重儿(VLBW)的存活率显著增加。早产儿发生暂时性甲状腺功能障碍的风险很大,尤其是胎龄小于34周的早期早产儿。早产儿比足月儿更易发生暂时性甲状腺功能障碍,主要表现为暂时性低甲状腺素血症(transient hypothyroxinemia of prematurity,THOP)、低T3综合征和高TSH血症。本研究通过回顾性分析早产儿出生后第15-20天和生后第30-40天的TSH、T3、T4、FT3、FT4水平,了解早期早产儿生后的暂时性甲状腺功能障碍发生情况;并对围产期因素及住院期间临床情况进行分析,从而了解早产儿暂时性甲状腺功能障碍的危险因素,为临床提供诊断及治疗依据。
  方法:
  本研究选取2014年一月至2016年七月间在东南大学附属中大医院新生儿监护病房住院的184名胎龄小于34周出生的早产儿为研究对象进行回顾性分析。早产儿首先被分为两组,GA28-<31w为第一组(Group1)和GA≥31-<34w为第二组(Group2)。再分别在出生后第15-20天和生后第30-40天检测TSH、T3、T4、FT3、FT4,根据甲状腺功能将对象分为4组:正常对照组(Group A)、THOP组(Group B)、高TSH血症组(Group C)、和低T3综合征组(Group D);同时提取患儿围产期信息中的危险因素。采用无条件极大似然估计的多因素Logistic回归分析研究甲状腺激功能障碍与不同混杂因素的关系。
  结果:
  1.39例诊断为暂时性甲状腺功能障碍,26例TSH高,15例为低T3综合征,和104婴儿正常。第一组和第二组暂时性低甲状腺素血症的发生率分别为31.4%和18.8%,高TSH血症的发生率分别11.4%和14.8%,低T3综合征的发生率分别5.7%和8.7%。
  2.在第一组,高TSH血症与多巴胺的使用有关(OR2.783,95%CI1.336~182.090);而在第二组THOP与出生后5分钟低Apgar评分相关(≤5)(OR3.399,95%CI1.344~8.593),新生儿呼吸窘迫综合征(OR2.801,95%CI1.172~6.693),窒息(OR3.399,95%CI1.344~8.593)、低蛋白血症(OR4.261,95%CI1.787~10.159)有关。
  3.有一半胎龄<31周的早产儿,在出生后第15-20天检测甲状腺功能正常,生后第30-40天出现高TSH血症,因此,应进行反复的甲状腺功能检查。
  4.本研究并未发现孕妇甲状腺功能异常和其它因素对早产儿甲状腺功能产生影响;并未发现早产儿暂时性甲状腺功能异常与大脑异常有关。
  结论:
  本研究表明,GA<31w婴儿高TSH血症与多巴胺的使用有关;而GA≥31w早产儿THOP与NRDS、出生后5分钟低Apgar评分、新生儿呼吸窘迫综合征、新生儿窒息及低蛋白血症有关。胎龄<31周的早产儿应反复检测甲状腺功能,避免误诊。
[硕士论文] 赵丹丹
中医学 南京中医药大学 2017(学位年度)
摘要:目的:探讨光疗前后前胸(遮盖及未遮盖)、眉心、肩胛部位经皮胆红素(TcB)值,与同时测定的血清胆红素(TSB)值比较,分析其准确性。运用经皮胆红素水平评价茵栀黄口服液对新生儿(尤其是早产儿)高胆红素血症的疗效及安全性。
  方法:选自2015年9月至2016年7月入住我院新生儿科的新生儿。1.符合入选标准后检查TSB,并在0.5 h内采用JH20-1C型经皮黄疸仪测定前胸、眉心、肩胛部位的TcB(364例,437组数据)。新生儿光疗停止后0h(193例)、12 h-24 h(175例)测定TSB值,并在0.5 h内测定左胸遮盖、右胸、眉心、肩胛部位的TcB。2.将胎龄≥32周且出生体重≥1500g的新生儿高胆红素血症患儿用随机数字法随机分为两组:单纯光疗组(光疗组,67例),仅给予光疗治疗;光疗联合茵栀黄组(联合组,69例),给予光疗及茵栀黄口服液2 ml/(kg.次),每12h一次,连服5天。每12h监测一次胸骨左缘贴片遮盖下的经皮胆红素(TcB)水平。记录两组患儿一般资料、入组第0h、第60 h和入组第120 hTcB水平、入组120 h内总计光疗时间、再光疗率、皮疹及腹泻等不良反应发生率。采用SPSS20.0软件,选用相关分析、方差分析、一致性分析、t检验、卡方检验、重复测量数据的方差分析、积矩相关性分析。
  结果:1.光疗前,不同部位TcB与TSB均有较高的相关性及一致性(均P<0.05),前胸TcB相对最佳、与TSB差值相对最小。光疗停止后0h及12-24 h,TSB与左胸遮盖TcB差值最小(-1.2±2.3 mg/dl、-0.5±1.6 mg/dl),相关性及一致性均最佳。光疗前当TSB≥15 mg/dl时,(TSB-前胸TcB)差值1.5±1.6 mg/dl;当TSB<15 mg/dl时,(TSB-前胸TcB)差值-1.9±1.9 mg/dl,差异有统计学意义(P=0.000)。(TSB-前胸TcB)差值不受性别、胎龄、出生体重、测定时龄及重复测量影响。当前胸或左胸遮盖部位TcB值低于光疗或停光疗TSB阈值大于3.3 mg/dl或2.6 mg/dl时,假阴性率小于2.5%;当前胸或左胸遮盖部位TcB值低于光疗或停光疗TSB阈值大于4.2 mg/dl或3.2 mg/dl时,假阴性率小于1%。2.光疗组和联合组之间入组第60 hTcB水平相似(P>0.05),联合组入组第120 h TcB水平低于光疗组,差异有统计学意义(9.4±1.1 mg/dl对9.8±1.4 mg/dl,P=0.045)。联合组TcB水平下降程度大于光疗组。联合组与光疗组入组120 h内总计光疗时间(70.1±13.0 h对72.0±13.4h)、再光疗率(31.9%对34.3%)、皮疹发生率(10.1%对9.0%)差异均无统计学意义(P>0.05)。联合组腹泻发生率(21.7%)明显高于光疗组(11.9%),但差异尚无统计学意义(P=0.127)。联合组入组120 h内大便总次数与入组第120 hTcB水平下降值呈显著线性正相关关系(r=0.75,P=0.000)。联合组中早产儿亚组(41例)在入组第60h、第120h TcB水平下降率(14.0±13.1%、24.3±12.7%)均低于足月儿亚组(28例)(26.9±13.4%、35.4±11.7%),差异均有统计学意义(P=0.000、0.000)。早产儿亚组与足月儿亚组入组120 h内总计光疗时间(72.3±14.8 h对66.9±8.9 h)、再光疗率(34.1%对28.6%)、皮疹(9.8%对10.7%)及腹泻发生率(24.4%对17.9%)的差异均无统计学意义(P>0.05)。
  结论:1.光疗前,前胸TcB相对最准确;光疗后,左胸遮盖TcB最准确,能替代TSB用于新生儿黄疸的评估与管理。2.茵栀黄在辅助光疗治疗新生儿高胆红素血症方面有一定疗效,但起效相对较慢,作用相对较弱,仅能作为一种辅助疗法。不良反应主要是大便次数稍有增多。大便次数与疗效呈正相关。茵栀黄口服液可以一样安全有效地用于辅助光疗治疗足月儿及早产儿高胆红素血症,但用于早产儿疗效略低于足月儿。
[硕士论文] 曹芳芳
儿科学 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  探讨依达拉奉干预对高胆红素血症新生大鼠血清神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)水平的影响。
  方法:
  将72只7日龄SD大鼠随机地分到H、E、C组,H组为高胆红素血症组(n=24)、E组为依达拉奉干预组(n=24)、C组为正常对照组(n=24)。每组又根据处死时间的不同随机分为3个亚组:12h组、24h组、48h组,每亚组8只。采用腹腔注射的方法,给H组、E组新生大鼠按100μg/g的剂量注入胆红素1次建立高胆红素血症动物模型,用同样的方法给C组新生大鼠按100μg/g的剂量注入生理盐水1次,造模后立即给予E组依达拉奉干预,剂量为2mg/kg/次,一日一次。观察各组新生大鼠有无行为异常如有无抽搐、活动减少、对外界刺激的逃避反应减弱等,并于各时间点取血及脑组织。苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察各组新生大鼠脑组织的病理改变,用酶联免疫法(ELISA法)测定血清中NSE。
  结果:
  1.实验前,H、E、C3组新生大鼠行为均无明显的异常;造模后H组、E组新生SD大鼠出现行为异常,如抽搐、活动减少、对外界刺激的逃避反应减弱等,但E组在行为异常方面较高胆红素血症组轻;C组新生SD大鼠在整个实验中均未出现行为方面的明显异常。
  2.HE染色结果:C组海马区细胞排列整齐,细胞形态结构完整,无明显细胞水肿;H组海马区细胞排列略紊乱,细胞水肿明显,有明显炎性细胞浸润;E组脑组织可见少许神经细胞水肿,但在各时间点上脑组织病理改变均较H组轻。
  3.在各时间点上,H组新生大鼠血清NSE水平较C组高,P<0.05,差异具有统计学意义;
  在各时间点上,E组新生大鼠血清NSE水平较H组低,但仍高于C组,P<0.05,差异有统计学意义。
  结论:
  新生大鼠高胆红素血症时,血清NSE水平增加,给予依达拉奉干预,可以降低血清NSE水平,表明依达拉奉对高胆红素血症脑损伤新生大鼠有神经保护作用。
[硕士论文] 申雅洁
儿科学 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  观察高胆红素血症(hyperbilirubinemia)脑损伤新生大鼠血清S100B蛋白水平及依达拉奉(edaravone,MCI-186)干预后其浓度的变化。探讨依达拉奉对高胆红素血症脑损伤的作用,为临床上依达拉奉防治胆红素脑病提供一定的实验依据。
  方法:
  将96只7日龄SD(Sprague-Dawley,SD)大鼠随机分为3组:正常对照组、高胆红素血症组、依达拉奉干预组,即A、B、C三组,每组32只大鼠。A、B、C组再依据处死时间点分为4个亚组:24h组、48h组、72h组和96h组,每组8只大鼠。采取腹腔注射的方法给B、C组大鼠按100mg/kg的剂量注入1次胆红素,用同样方法给A组大鼠按同样剂量注入1次生理盐水,造模后C组大鼠立即接受依达拉奉干预,使用同样方法注入2mg/kg/d,连续4天,最后在各不同处死时间点尽快将各组大鼠的血清及脑组织取出。用HE(Hematoxylin and eosin)染色方法观察大鼠脑组织的病理学改变,用Elisa法测血清中S100B蛋白的浓度,然后记录实验结果、计算相关数据并对其进行统计学分析,并得出结论。
  结果:
  (1)造模后,明显的神经行为异常均出现在B、C组大鼠,各不同时间点C组大鼠症状较B组的明显改善,而A组大鼠行为无明显异常。
  (2)造模24h后,B、C组大鼠脑组织出现水平不一的水肿、变性及炎性浸润等,随着时间延长其程度加重。各处死时间点C组大鼠脑组织改变程度较B组的减轻,A组大鼠脑组织结构基本正常。
  (3)B组大鼠血清S100B蛋白的浓度显著高于A、C两组,且和时间呈正相关性,差异存在统计学意义(P<0.05);C组大鼠血清S100B蛋白的浓度显著低于B组,高于A组,差异存在统计学意义(P<0.05);A组大鼠血清S100B蛋白水平较低,各处死时间点组内相比,差异没有统计学意义(P>0.05)。
  结论:
  (1)高胆红素血症时,大鼠血清S100B蛋白水平明显升高,且和时间呈正相关性;经药物干预后,血清S100B蛋白水平明显降低。
  (2)高胆红素血症时,24h后大鼠脑组织出现水肿、变性及炎性浸润等改变,且随着时间延长,其程度有所加重;经依达拉奉干预后,不同时间点大鼠脑组织的水肿、变性及炎性浸润等可被不同程度减轻。
  (3)表明依达拉奉可减轻过量胆红素对中枢神经系统的损伤,起到保护神经元的作用。
[硕士论文] 徐颖
临床医学 东南大学 2017(学位年度)
摘要:目的:未成熟脑白质损伤(white matter damage,WMD)是早产儿缺氧缺血性脑损伤,对其保护的研究一直是新生儿学科关注热点。该实验通过构建早产儿WMD动物模型,探讨抑制HIF-1α、激活Wnt信号通路对早产儿脑损伤是否有保护作用,为临床干预治疗早产儿脑损伤提供新思路。
  方法:取三日龄(postnatal day3,P3)SD大鼠,随机分为WMD、WMD+PHI、WMD+PHI+Wnt激动剂、WMD+PHI+XAV939组,建立WMD模型,于造模24h后,利用脑室定位仪,根据实验分组分别干预。通过组织免疫荧光的方法,对OPC进行O1单标,OL进行O4单标,分别观察各组新生大鼠术后1d、3d、7d、14d脑组织中OPC及OL的数量改变。利用Western blot技术测定各组新生大鼠术后1d、3d、7d、14d脑组织中HIF-1α蛋白表达情况。通过RT-qPCR技术检测各组新生大鼠术后1d、3d、7d、14d脑组织中HIF-1α及Wnt7a的mRNA水平。应用悬吊实验、旷场实验、避暗实验对各组大鼠于术后28d进行神经运动、认知、记忆能力检测,观察各组大鼠行为学情况。
  结果:WMD组OPC、OL数量最少,而在造模后联合应用PHI(HIF-1α抑制剂)、Wnt激动剂组中OPC、OL数量较其余三组均明显增多。HIF-1α在1d、3d、7d、14d各时间点中,WMD组含量最少,而在联合应用PHI+Wnt激动剂组中含量最高,与免疫荧光中OPC趋势一致。RT-qPCR结果与免疫荧光、Western blot结果一致,HIF-1α与Wnt7a的表达量呈正相关(r=0.765,p<0.05)。行为学实验提示:各组大鼠在肌力运动方面无差别,PHI的应用对大鼠情感认知和记忆能力方面有部分修复保护作用,其中联合应用Wnt激动剂后效果更佳。
  结论:3日龄未成熟大鼠脑白质损伤后通过HIF-1α抑制剂PHI和Wnt激动剂联合应用后,可有效减少由缺氧所致的OPCs损伤及丢失、同时促进OPCs的增殖;当机体缺氧状态改善后,可观察到更多的OPCs参与向构建髓鞘化的OLs的分化;并且远期神经行为学实验显示联合应用后,对实验鼠的情感认知和记忆功能有明显改善,提示其对早产儿脑损伤具有保护作用。
[硕士论文] 陈黎丽
内科学 宁波大学 2017(学位年度)
摘要:目的:通过检测窒息新生儿与正常新生儿中尿白细胞介素-18(IL-18)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C(Cys-C)的水平,动态观察窒息新生儿尿 IL-18、Cys-C的变化,分析比较各指标间的差异和优劣,评价尿 IL-18、Cys-C对窒息新生儿急性肾损伤(AKI)的早期诊断的价值,为早诊断和尽早干预治疗提供客观依据。
  方法:本研究选择足月窒息新生儿50例,窒息的诊断标准参考第四版《实用新生儿学》的相关内容,按相关的分级标准将窒息组分为轻度窒息组32例、重度窒息组18例;另外选择正常的足月新生儿50例作为对照组,入选的新生儿均需通过超声检查排除先天性泌尿系统疾病,分别收集生后6h、24h、48h的尿液,通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测尿 IL-18、尿 Cys-C的值,并动态检测患儿入院时及恢复期的血 Cys-C值,同时检测尿β2微球蛋白(β2-MG)、尿转铁蛋白(TRF)的值,并通过肾小球滤过率(estimateglomerular filtration rate,eGFR)作为肾功能损害的评价标准,比较窒息组与正常组,轻度与重度窒息组不同时间检测数据的结果,探讨尿 IL-18联合 Cys-C在窒息新生儿急性肾损伤早期诊断中的临床意义。所得数据经 SPSS18.0软件进行统计学处理。
  结果:
  1、窒息组与正常对照组尿中 IL-18、Cys-C、β2-MG、TRF检测结果分析:窒息组生后6h、24h、48h尿中 IL-18、Cys-C、β2-MG、TRF各项指标水平均高于正常对照组,差异有明显的统计学意义(P  2、24小时内尿 IL-18,尿 Cys-C分别与血 Cys-C与 Scr和 BUN的相关性分析:尿 IL-18、尿 Cys-C的变化与血 Cys-C、Scr和 BUN呈现明显的正相关性(P均< O.05),而与 GFR呈现明显的负性相关 P< O.05。
  3、尿 IL-18、尿 Cys-C、血 Cys-C、尿β2-MG、尿 TRF、Scr、BUN各项指标在窒息新生儿 AKI诊断价值比较:经过对比患儿入院后第1天的血、尿 Cys-C、尿 IL-18、尿β2-MG、尿TRF、Scr、BUN水平,发现尿 IL-18、尿Cys-C联合诊断AKI的灵敏度和特异度最高,经过统计学分析显示其灵敏度高于单一的血 Cys-C,特异度高于 Scr和 BUN,差异均有明显的统计学意义。
  结论:
  1、血Cys-C、尿Cys-C、尿 IL-18在新生儿早期 AKI诊断中具有重要价值,可以用于早期诊断 AKI。2.尿 Cys-C与血 Cys-C的值变化存在高度相关性,联合尿 IL-18在早期诊断 AKI的价值优于单一的血 Cys-C检测。3.尿液标本可以反复多次留取,相对抽血来讲为无偿检查,可以多次采集后用于动态观察,解决新生儿反复抽血困难的实际问题。
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