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[硕士论文] 吴波
海洋生物学 广东海洋大学 2013(学位年度)
摘要:金钱鱼存在雌雄生长二态性,雌鱼生长速度明显快于雄鱼,但引起此现象的原因至今尚未明了。本研究以金钱鱼为研究对象,采用主成分分析、聚类分析和判别分析方法对其雌、雄形态学特征进行分析;运用RT-PCR和RACE法,克隆并获得生长激素(GH)cDNA全长序列;应用荧光实时定量PCR检测1龄以下、1-2龄和2龄以上雌雄金钱鱼脑垂体中GH的表达;通过福林-酚法、3,5-二硝基水杨酸法及脂肪酶试剂盒对各龄雌、雄金钱鱼的胃蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶酶活力进行测定;并对2龄以下雌、雄金钱鱼生长性能指标进行检测。研究结果不仅可以探究金钱鱼呈现雌雄生长二态性的可能原因,还可以为金钱鱼生长和繁殖提供理论依据,并为后续单性苗种培育及单性化养殖奠定基础。主要研究结果如下:
  1.雌雄金钱鱼形态学研究
  通过对2012年和2013采集到的142尾金钱鱼形态学性状的测定,进行主成分分析和R-聚类分析,建立了金钱鱼雌雄判别模型。对11项标准化比例性状进行主成分分析和 R-聚类分析均得出,金钱鱼雌雄个体差异主要集中在头部特征、形体特征和丰满度等3个方面。利用逐步判别法从11个标准化比例性状中筛选出吻长/头长、眼间距/头长、体宽/体长、体高/体长、头高/体长5个性状,建立性别判别方程,对2012及2013年采集样品进行回测,其准确率为85.21%;利用性别判别方程对2011年采集的36尾金钱鱼进行判别,其成功率高达86.11%。单因子方差分析(ANOAV)显示,除体宽/体长和眼间距/头长外,其他3个标准化性状在金钱鱼两性群体间差异显著( P<0.05),表明雌性个体相比于雄性具有体形较高、头较大且吻较长的特征。2.金钱鱼生长激素(GH)基因的克隆及其表达
  金钱鱼GH cDNA全长947 bp,5′端非编码区66 bp,3′端(不包括poly(A))241 bp,开放阅读框(ORF)609 bp,编码202个氨基酸,其中信号肽含有17个氨基酸,成熟肽有185个氨基酸。推测其为不稳定亲水蛋白,分子量为22.7 kD。序列分析及分子系统进化树结果表明,金钱鱼和鲈形目亲缘关系最近,其GH序列与金头鲷GH同源性最高达92%。同源性分析结果与根据传统形态学和生化特征分类的结果相一致。荧光实时定量PCR结果显示,1龄以下、1-2龄和2龄以上雌金钱鱼脑垂体中GH的相对表达量显著高于雄鱼,分别是雄鱼的1.84、4.61和6.34倍。
  3.雌雄金钱鱼生长性能指标及消化酶活力的比较
  雌性金钱鱼日摄食量(IDF)、特定生长率(SGR)、食物转化率(FC)均显著高于雄鱼(P<0.05);3-5月期间雌、雄金钱鱼性腺成熟指数(GSI)均上升,且实验结束时(5月底)雌鱼GSI显著大于雄鱼(P<0.05)。对不同年龄阶段雌、雄金钱鱼消化酶比活力的研究发现,1龄以下和1-2龄组金钱鱼,雌鱼胃蛋白酶、胰蛋白酶(后肠除外)、肝胰脏和前肠淀粉酶比活力均显著高于雄鱼(P<0.05),而2龄以上金钱鱼雌鱼上述消化酶及各年龄阶段脂肪酶比活力与雄鱼相比均无显著差异(P>0.05)。雌、雄金钱鱼胃蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶在不同年龄阶段的比活力均表现为1龄以下组>1-2龄组>2龄以上组,而脂肪酶表现为2龄以上组>1-2龄组>1龄以下组,且1龄以下与2龄以上组(除个别组织外)有显著差异。
  综上所述,根据形态学可建立金钱鱼性别判别方程:雌=3.76*X1+11.31*X2+1.84*X3-1.9*X4+0.72*X5-380.8,雄=3.68*X1+11.4*X2+1.75*X3-2.03*X4+0.84*X5-385.03;雌鱼脑垂体中GH的高表达可能是导致雌鱼生长速度快于雄鱼的内在因素之一;此外2龄以下雌性金钱鱼生长快于雄鱼还与其具有较高的摄食量、食物转化率及较高的蛋白酶和淀粉酶活性有关,而2龄以上金钱鱼雌、雄间生长速度出现差异与消化酶活性无关。
[硕士论文] 何文
特种经济动物饲养 浙江大学 2012(学位年度)
摘要:蜘蛛牵引丝因其具有优异的力学性能、生物相容性、生物可降解性,可骨组织工程支架的材料。蜘蛛牵引丝MaSp1蛋白的一级结构由富含甘氨酸的非结晶区和聚丙氨酸结晶区交替排列,其中,聚丙氨酸结晶区是赋予牵引丝强度的功能序列。而牙本质基质-1蛋白(DMP-1)作为骨、软骨、牙骨质和牙本质生物矿化所必需的一种非胶原蛋白,对启动矿化结晶、维持矿化组织结构起着重要作用。为了开发蜘蛛丝蛋白骨修复材料支架,本研究利用基因重组技术在蜘蛛牵引丝MaSp1蛋白一级结构中导入DMP-1钙离子结合序列,促进蜘蛛丝蛋白的生物矿化功能。本研究包括以下三部分内容:
   1、蜘蛛丝多肽的分子设计在蜘蛛牵引丝结晶区[GGAGGAAAAAAAAGGAGGA]中插入来自于DMP-1蛋白的钙离子结合序列[QESQSEQDS],获得蜘蛛丝多肽[GGAGGAAAAAAAAGGAGGAQESQSEQDS]。
   2、蜘蛛丝多肽的合成与生物矿化功能表征利用固相多肽合成法得到蜘蛛丝多肽[GGAGGAAAAAAAAGGAGGAQESQSEQDS]。通过冯库萨染液实验证实该多肽具有钙离子结合能力。傅里叶红外分析、扫描电镜及×射线衍射仪图谱表明多肽在1.5SBF溶液中能诱导生成羟基磷灰石结晶,证实多肽具有生物矿化功能。
   3、构建重组蜘蛛丝蛋白原核表达载体在多肽氨基酸序列的基础上,利用基因重组技术,设计了有生物矿化功能重组蜘蛛丝蛋白的[G GAG GAAAAAAAAGGAGGAQESQSEQDS]4。将[GGAGGAAAAAAAAGGAGGAQESQSEQDS]4的核苷酸序列导入原核表达载体pET30(+),得到重组蜘蛛丝蛋白原核表达载体。
   由此可见,本研究设计了具有生物矿化功能的重组蜘蛛丝蛋白的序列,并通过基因重组技术,构建了重组蜘蛛丝蛋白表达载体。
  
[硕士论文] 施海燕
特种经济动物饲养 中国农业科学院 2008(学位年度)
摘要:随着现代化农业的发展,利用传粉昆虫为设施农作物授粉越来越受到重视。本文主要研究小峰熊蜂(Bombushypocrita)和意大利蜜蜂(Apismellifera)为温室草莓授粉时,它们的传粉行为的区别,包括熊蜂和蜜蜂的出巢时间、出巢温度、访花时间、访花间隔时间、访花频率、携带花粉量等行为上的差异性,进而得出各自为农作物授粉的优越性。同时研究了在实验室模拟条件下,小峰熊蜂(Bombushypocrita)对紫色花的偏爱性,实验结果如下: 1.熊蜂的出巢时间比较固定,一般在8:15~8:30之间,而蜜蜂的出巢时间和天气有一定的关系,晴天时,出巢时间在9:30~10:00之间,阴天时,出巢时间跨度比较大,在9:30~11:30之间。晴天时,熊蜂的出巢温度是7.19±0.07℃,湿度是86.77±0.26%;蜜蜂的出巢温度是14.30±0.04℃,出巢湿度是82.34±0.16(%)。阴天时,熊蜂的出巢温度是7.44±0.07℃,湿度是87.46±0.13(%),蜜蜂的出巢温度是15.07±0.04℃,出巢湿度是85.71±0.17(%)。而且熊蜂的出巢温度在不同天气下差异不显著(t=-2.479,P>0.05);蜜蜂的出巢温度差异极显著(t=-14.186,P<0.01)。熊蜂的出巢湿度在不同天气下差异较显著(t=-2.405,P<0.05);蜜蜂的出巢湿度差异极显著(t=-14.771,P<0.01)。 2.熊蜂和蜜蜂在晴天时的日活动规律相似,熊蜂在一天中出现两个高峰期,第一个高峰期为10:00~11:00之间,第二个高峰期为13:00~14:00之间。蜜蜂在一天中只有一个高峰期,高峰期在11:00~12:00之间。阴天时蜜蜂的出巢高峰期在12:00~13:00之间,比晴天推迟了1h左右。晴天时,蜜蜂一天中出巢总数约为阴天的5倍。通过对三个环境因子对熊蜂和蜜蜂的出巢数的相关系性分析结果表明,温度是影响熊蜂出巢数的主要因子,光照强度对熊蜂的影响没有达到显著性,湿度对熊蜂的出巢数起负面作用。但是,温度、湿度、光照强度对蜜蜂的出巢影响都达到显著性水平,温度和光照强度呈正相关性,湿度呈负相关性。 3.在不同的温度下,熊蜂和蜜蜂的访花时间,访花间隔时间、访花频率的结果各不相同。熊蜂的访花时间、访花间隔时间比蜜蜂的短,但访花频率比蜜蜂的高。同时,蜜蜂对不同形态的花朵的访花时间的差异性极显著。 4.熊蜂携粉量大于蜜蜂的携粉量;熊蜂传粉后的作物的柱头花粉沉降数大于蜜蜂,差异都达到极显著水平。 5.在不同的模拟试验组中,小峰熊蜂(Bombushypocrita)对紫色花朵的偏爱性不同,当只改变花朵颜色的数目时,D-值比较稳定,差异无显著性,表明熊蜂在面对多种颜色的花朵时,对紫色花朵的偏爱性不变,显示出了一定的专一性。当改变花朵的花部构成时,熊蜂对紫花的D-值变化较大,同时比较得出,花朵的大小和形态比花朵的气味更能影响其访问紫色花朵。当花朵附加的特征数不同时,熊蜂的D-值差异性显著。
[博后论文] 党向利
动物学 中山大学 2008(学位年度)
摘要:家蝇作为一种重要的资源昆虫,长期以来仅被作为一种物美价廉的饲料蛋白来使用,对其其它价值未作深入的研究及开发。研究表明家蝇抗菌肽具有广谱的抗菌、抗病毒、抗癌和抗原生虫等功效,但目前家蝇抗菌肽制备工艺多处于实验探索阶段,且提取工艺抗菌肽得率较低(低于1%),难于进行大规模生产及制备。本研究以家蝇蛹为材料,利用酸过夜提取-热处理-过滤-超滤-喷雾干燥等工艺制备家蝇抗菌肽。结果表明该制备工艺简便快速,且制备的抗菌肽得率较高,接近1.3%,是已报道的家蝇抗菌肽提取工艺的5倍左右,抗菌活力回收率高达80%。制备的家蝇抗菌肽分子量小于20kDa,主要是一些分子量小于14.4kDa的小分子肽类。产品为淡黄色粉末状,对多种革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌均具有较强的抑菌活性,对小鼠红细胞无溶血性,能耐受100℃30分钟的加热,在较广泛的pH(2-12)条件下仍具有抗菌活性,4℃存放60天,仍具有90%以上的抗菌活力,稳定性较好。工艺的副产物可用作饲料昆虫蛋白。制备的抗菌肽可用于果蔬的防腐保鲜、食品添加剂、饲料添加剂及化妆品中,具有良好的应用价值和市场前景。 国内外学者已就家蝇的免疫诱导防御反应分别在蛋白质水平和基因水平进行了研究。虽然关于家蝇的抗菌肽研究有报道,但主要是同源克隆家蝇的抗菌肽基因及其表达。从虫体内提取天然抗菌物质从上世纪80年代就已开始,但直到最近才见单一较纯的抗菌肽利用色谱技术被纯化出来的报道,对纯化的抗菌肽进行一级结构研究甚少。利用色谱技术分离纯化诱导家蝇蛹体内的抗菌肽,从诱导的家蝇蛹的粗提液中分离纯化出了4种抗菌物质,即3个抗菌肽和1个抗菌化合物。3个抗菌肽分别是分子量为11992.48Da的IA,家蝇defensin和分子量为7988.43Da的IIB。其中家蝇defensin是首个从家蝇体内分离纯化并鉴定出的家蝇抗菌肽。首次从诱导家蝇蛹中分离得到一个非肽/蛋白类抗菌活性成分,分子量为1051.67Da。 应用RT-PCR技术对4种抗菌肽/蛋白基因在家蝇蛹内的表达进行了研究,明确了家蝇蛹体内cecropin、defensin和attacin等抗菌肽的表达是诱导型的,而lysozyme是组成型表达。应用生物信息学的方法,证实了家蝇defensin具有典型的昆虫防御素空间构象,即αββ结构,家蝇lysozyme属于c-typelysozyme,具有家族的共同特征,如保守的8个Cys和两个活性催化位点及三个α-螺旋和三个β-折叠股。
[硕士论文] 王震
特种经济动物饲养 东北林业大学 2006(学位年度)
摘要:标记是对野生动物及其产品进行管理的有效措施之一,是实现有限资源可持续利用与发展的基本保证,对此,《濒危野生动植物种国际贸易公约》早已做出有关规定。目前,标记做为野生动物及其产品的管理模式已在全球范围内得到广泛的应用与认可,成为一种国际通行的做法。我国也从2003年5月1日起,开始对野生动物及其产品试行标记化管理。 纵观全球发展,对野生动物及其产品实行标记化管理已是必然的趋势。同其他国家相比,我国对野生动物及其产品的标记虽起步较晚,尚处于探索阶段,但起点较高。随着标记化管理的逐步推进,已在短期内充分体现出了其优越性,在一定程度上达到了预期的效果。标记化管理的初步实施,推动了我国野生动物管理事业的发展进程,是实现规范化管理的重要标志;提高了我国的履约水平,更进一步维护了国家形象,更坚实地奠定了我国在公约事务中的国际地位;为更科学、合理地利用野生动物资源提供了可靠的依据,为野外资源的有效保护创造了必要的条件;实现了与国际接轨,满足了国际间贸易合作的要求;为涉及野生动物及其产品的执法创造了有利条件,使打击更有针对性,更加有效;社会力量的参与,营造出了一个规范企业经营行为的环境,净化了行业与市场,使消费者的利益得到了基本的保障……。 但是,对野生动物及其产品实行标记化管理在我国是一个新生事物,需要根据我国的国情进行不断地修正与完善。本文经过对我国试行阶段野生动物及其产品的标记化管理进行充分地调研、分析与评估,认识到应分层次、渐进式地推进我国的标记化管理进程,并在此基础上进行了探讨,提出了完善我国现阶段标记化管理的建议:应尽早确定并完善标记化管理的法律依据,以明确标记的法律地位,并制定实施细则规范标记活动;建立完善的标记化管理体系,不仅需要强化标记化管理组织体系、执法监管体系的建设,而且要建立有效的科技保障体系,对资源的利用进行监测与评估;制定严格的标记市场准入条件、引入竞争机制以充分发挥标记产品的市场竞争能力;扩大宣传,营造推动标记化管理进程的氛围;加强行业组织的建设等。
[硕士论文] 刘云华
特种经济动物饲养 湖南农业大学 2005(学位年度)
摘要:  本文研究了MT对杜长大杂交猪和杂种野猪抗氧化功能和肉质的影响。文章探讨了外源性Zn-MT对应激状态下的杜长大杂交猪和杂种野猪肉质及对抗氧化功能的影响,并以SOD为代表,测定SODmRNA丰度,进一步研究了MT对抗氧化酶作用的机制。研究结果表明,MT从基因和蛋白水平提高了抗氧化酶的活性,因而提高了机体抗氧化、抗应激的能力,达到了改善肉质的目的。MT对杂种野猪和杜长大杂交猪的作用效应具有一致性,总的趋势是MT对杜长大杂交猪的作用效应比杂种野猪强。因此,MT在实际应用中,对不同的动物要区别对待。本研究为MT在动物生产中的科学应用提供理论依据。
[硕士论文] 何理平
特种经济动物饲养 湖南农业大学 2005(学位年度)
摘要:  本文对海狸鼠尾部肌腱制作医用可吸收缝合线进行了研究。文章介绍了肌腱缝合线的制作及物理性能;分析了肌腱缝合线细胞的毒性;试验了肌腱缝合线的生物相容性;将大量肌腱缝合线溶液输入家兔耳静脉内,研究了肌腱缝合线溶液的免疫反应性;通过动物试验,观察了肌腱缝合线植入后反应及降解性能和吸收性能。研究结果表明,用海狸鼠尾部肌腱可以制作成一种新型的可吸收缝合线,此缝合线具有良好的生物相容性,较低的抗原性,降解、吸收性能优良的特点,是一种理想的可吸收手术缝合线。
[博士论文] 韦启浪
动物学 中国科学院大学 2015(学位年度)
摘要:物种资源具有自身的价值,这是保护生物学最核心的思想和理论基础之一,也是我们开展物种保护的前提条件。物种价值评估即是保护生物学最核心的研究内容,还是野生动植物保护管理部门在实际保护管理中必需要面对和解答的问题,只有科学地评估物种价值,才能使我们的物种保护工作获得好的成果。
  当前学术界对物种价值的划分主要分为直接使用价值、间接使用价值和非使用价值,其中非使用价值又通常分为选择价值、遗产价值和存在价值。目前对于非使用价值特别是存在价值的分类和计量仍然存在较大的争议。支付意愿法(WTP)是当前物种价值评价的主流方法,其采用向特定调查对象询问其对某一事物最大支付意愿来评估该事物价值。然而,支付愿意法的计量结果过于主观,且在应用于物种价值计量时往往被忽略了最重要的一点,普通民众对于物种在生态系统中的作用所知甚少,这点违背了支付愿意法应用的前提:评价者必须对被评价的对象充分了解,因而支付意愿法不适合用于物种价值评价。
  太空船经济学(Spaceship economics)将地球当成携带有限资源的太空船,在找到新的着陆点之前,人们必须尽最大努力经营利用好有限的资源来维护好太空船(地球)的良好运行和乘客(人类)的安全和福利。从太空船经济学的角度出发将有助于我们更好地认识和评价物种的价值。
  从太空船经济学的角度进行物种价值评价,主要得出以下结论:(1)物种的价值主要由其效用价值和物种存在的时间所决定;(2)存在价值因其定义和计量方法之间存在不可调和的矛盾,不应被纳入物种的价值评价体系;(3)理论上,物种存在一个特定的种群数量使其物种价值达到最高点,当种群数量偏离该数值时,物种价值单调递减;(4)依据物种种群数量与价值之间的关系,可将物种分为3大类:S1值得保护和值得存在的物种;S2值得存在但不值得保护的物种;S3不值得存在也不值得保护的物种;(5)通常濒危物种的物种价值低于其相近种的物种价值,但个体价值则更高;(6)基于太空船经济学的物种价值计量体系将使物种的价值计量变得更为客观和可行。
  以太空船经济学物种价值计量体系对9种蛙类物种价值进行计量,将蛙类物种的主导价值分为4大类:商业价值、生态价值、科研价值和文化价值,计量结果表明,蛙类的物种价值与种群数量呈正相关(Y=1.144x+1091.801,R2=0.999,P<0.001),4个主导价值也表现出随着种群数量增长而增长的趋势。濒危物种务川臭蛙的个体价值远高于其它种群数量较大的蛙类物种的个体价值,且其价值以科研价值和文化价值为主,而其它蛙类物种的价值以商业价值和生态价值为主。种群下降会使蛙类动物的物种价值受损,下降率越大,损失越严重,而同样的下降率下,通常种群数量越大,则物种价值损失越严重。
  本文在物种价值评价研究中首次采用了理论模型和案例分析紧密结合的方式,而且实际计量结果与理论分析结果具有较好的拟合性,使得评价体系的理论和案例分析的结果更具有实用性和说服力。太空船经济学物种价值评价体系的研究为人们认识和评价物种价值提供了一个良好的工具。蛙类物种的价值计量的案例分析和计量结果,既验证了太空船经济学物种价值评价体系的实用性和科学性,还能为蛙类物种的保护和管理工作提供数据支持和管理依据。
  本研究最大的不足之处在于:因物种在生态系统中的作用实在过于复杂,目前乃至在未来很长时期内,我们都不可能完全掌握其机制。此外,人类对物种的研究、认知和开发利用水平也对物种价值的评价产生影响。这些必然会影响物种价值评价的准确度。因此,加强研究力度,提高认知水平才能实现对物种价值更为科学地评价,最终达到有效保护和合理利用物种资源的目标。
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